ICS11020

C50.

中華人民共和國衛生行業標準

WS/T499—2017

下呼吸道感染細菌培養操作指南

Performanceguidelineforbacterialcultureoflowerrespiratorytractinfections

2017-01-15發布2017-07-01實施

中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會發布

WS/T499—2017

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范圍

1………………………1

規范性引用文件

2…………………………1

術語和定義

3………………1

分析前

4……………………2

標本采集

4.1……………2

標本運送

4.2……………2

篩選并拒收的標本

4.3…………………3

分析中

5……………………3

痰及氣管吸出物標本處理

5.1…………3

氣管鏡標本處理

5.2……………………4

連續培養并觀察慢生長菌

5.3…………5

分離并鑒定下呼吸道重要致病菌見附錄

5.4(C)……………………5

質量控制

5.5……………7

分析后報告結果

6…………………………9

革蘭染色報告

6.1………………………9

報告有臨床意義的微生物

6.2…………10

對非致病菌的報告

6.3…………………11

平板上無細菌生長

6.4…………………12

與結果有關的說明

6.5…………………12

附錄規范性附錄下呼吸道感染的主要類型及主要病原體

A()………13

附錄規范性附錄纖維支氣管鏡采集的標本適合診斷的病原體和檢驗項目

B()……14

附錄規范性附錄常見可疑菌落形態及常規快速鑒定方法

C()………15

參考文獻

……………………17

Ⅰ

WS/T499—2017

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準起草單位國家衛生和計劃生育委員會臨床檢驗中心陜西省人民醫院安徽省立醫院北京

:、、、

醫院北京大學人民醫院中國醫學科學院北京協和醫院首都醫科大學附屬北京友誼醫院解放軍總醫

、、、、

院浙江省溫州醫科大學附屬第二醫院

、。

本標準主要起草人胡繼紅任健康馬筱玲胡云建王輝徐英春蘇建榮羅燕萍李向陽

:、、、、、、、、。

Ⅲ

WS/T499—2017

引言

01口咽部定植菌群的變化

.

人類口咽部位定植著大量需氧菌兼性厭氧菌和厭氧菌等微生物口腔菌群總數可達10

、,10CFU/

12健康人咽部定植細菌最少咽部需氧的正常菌群主要由革蘭陽性菌組成人體基

mL~10CFU/mL。,。

礎條件的變化會改變咽部定植菌群的種類和數量長期接觸某些攜帶侵襲性定植菌人群如日托兒童

。,

的父母的肺炎鏈球菌流感嗜血桿菌定植數量會增加在免疫抑制慢性肺病廣譜抗菌藥物治療或住院

、;、、

患者等人群中革蘭陰性桿菌的優勢明顯增加

,。

02肺部感染的常見機制

.

肺部感染的最常見機制是肺泡內吸入了口咽部定植菌健康宿主吸入定植菌后通常無臨床癥狀

。,

細菌可被黏液柱狀纖毛清除吸入性肺炎患者咽部菌群種類趨向于侵襲性細菌或耐藥細菌如肺炎鏈

、;,

球菌或革蘭陰性桿菌等吸入定植菌能否引起肺部感染取決于吸入菌的致病性及數量患者免疫系統

。、

和呼吸道防御功能等因素

。

其次吸入含微生物的氣溶膠亦可引發下呼吸道感染如使用不清潔呼吸機導致的交叉感染

,,。

血液播散是下呼吸道感染第三位的原因感染通常造成雙肺下葉肺炎

,。

03痰涂片對下呼吸道感染病原菌診斷的作用

.

除引起社區非典型肺炎的病原不能常規培養外其他常見肺部感染的病原菌均可用常規培養方法

,

分離但培養方法的敏感性低且無法判斷分離菌的來源

,,。

痰涂片可提高下呼吸道感染病原學診斷的特異性和敏感性涂片革蘭染色可評估痰標本的質量

。,

具有減少口咽部污染菌的影響提高病原菌診斷特異性的作用痰涂片還可發現培養不能生長的細菌

、。。

04纖維支氣管鏡標本定量培養的臨床意義

.

經纖維支氣管鏡獲取的支氣管肺泡灌洗液和保護毛刷標本適合做細菌定量培養當可能致病菌的

,

菌落數大于閾值時其診斷下呼吸道感染的特異性可達診斷價值遠高于痰標本

,82%~91%,。

05下呼吸道感染細菌培養的局限性

.

微生物實驗室選擇的培養方法不支持病原菌生長抗菌藥物影響標本送檢時間延長口腔正常菌

、、、

群污染等可導致假陰性結果出現而污染菌對標本檢測結果的影響以及過度解讀細菌學結果等可導致

;

假陽性報告

。

Ⅳ

WS/T499—2017

下呼吸道感染細菌培養操作指南

1范圍

本標準規定了下呼吸道感染常規細菌培養的操作指南

。

本標準適用于醫療機構微生物實驗室

。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

臨床微生物實驗室血培養操作規范

WS/T503

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件

。

31

.

庫什曼螺旋纖維Curschmannsspiralfibers

’

庫什曼螺旋纖維呈螺旋狀系慢性炎癥時小支氣管分泌的黏液因呼吸困難肺內二氧化碳張力增

,,、

高而凝固同時由于受到喘息氣流的間歇吹動旋轉滾動而成經革蘭染色后在顯微鏡下可見其呈毛蟲

,。,

狀蜷曲中軸藍染邊緣呈淡紅色

,,。

32

.

夏科雷登結晶Charcot-LeydenCrystal

可見于支氣管為菱形或針狀六邊形無色透明結晶其兩端尖長大小不等折光性強由嗜酸粒細

,,,,,

胞破裂后嗜酸性顆粒相互融合而成可用碘染色可在稍放置的痰中找到嗜酸性粒細胞堆在對煙曲

,。。

菌有變態反應的哮喘患者或肺部感染寄生蟲患者的痰液中常見

。

33

.

纖毛柱狀上皮細胞ciliatedcolumnarepitheliumcell

主要分布在下呼吸道內表面在柱狀細胞的游離面附有能擺動的纖毛是能分泌黏液的杯狀細胞