ICS65.020B15團 體 標 準T/JAASS9-2020水果、蔬菜中吡蟲啉農藥殘留免疫親和柱凈化高效液相色譜檢測技術DeterminationofImidaclopridbyHighperformanceliquidchromatographywithimmunoaffinitycolumnclean-up2020－10－12發布 2020－10－12實施江蘇省農學會 發布T/JAASS9-2020目 次前言 Ⅲ范圍 1規范性引用文件 1術語和定義 1原理 1試劑與材料 1儀器與設備 1試樣制備 2測定 2結果判定與表述 3檢測限和重復性 3前??言本文件按照GB/T1.1-2020給出的規則起草。本文件由江蘇省農業科學院提出。本文件由江蘇省農學會歸口。本文件主要起草人：劉鳳權、王利民、華修德、王鳴華、張存政、郭逸蓉、徐振林、石松、孫遠明。IIIT/JAASS9-2020水果、蔬菜中吡蟲啉農藥殘留免疫親和柱凈化—高效液相色譜檢測技術范圍本文件規定了吡蟲啉農藥殘留的免疫親和層析凈化—高效液相色譜檢測技術的原理、試劑與材料、儀器與設備、試樣制備、測定、結果計算與表述和重復性。本文件適用于蔬菜、水果中吡蟲啉農藥殘留的測定。規范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB2763 食品安全國家標準食品中農藥最大殘留限量GB/T6682 分析實驗室用水規格和實驗方法術語和定義本文件無術語和定義。原理試樣經過甲醇-水提取后，提取液經過濾、稀釋后，濾液經過含有吡蟲啉特異性抗體的免疫親和層析柱層析凈化，經高效液相色譜儀分離、檢測后，測定試樣中吡蟲啉的含量。試劑與材料除另有規定外，所有試劑均為分析純；實驗室用水符合GB/T6682中規定的二級水，標準溶液和流動相用水為一級水。甲醇色譜純苯色譜純乙腈色譜純儀器與設備1T/JAASS9-2020吡蟲啉免疫親和柱，柱容量≥300ng。濾紙9cm雙圈定性濾紙容量瓶20mL容量瓶高效液相色譜儀試樣制備提取20g。10mL乙腈（5.4）-水（70:30）5min30min。隨后將樣品溶液在濾紙（6.2）上進行固液分離。20mL容量瓶（6.3）20mL（樣品處理液沖洗濾紙中的樣品）。5倍稀釋，待檢測用。凈化將免疫親和柱（6.1）10.0mL玻璃定量管下。10.0mL樣品提取液注入玻璃定量管中。2mL/min流速緩慢通過免疫親和柱。10.0mL2次，棄去全部流出液。1.0mL1mL/min，收集全部洗脫液于玻璃試管中，加純水定容2.0mL，供色譜檢測用。測定色譜條件色譜柱：SB-C18柱、4.6×250mm流動相：甲醇+水（15:85）溶液流速：1.0mL/min檢測波長：紫外波長270nm柱溫：室溫進樣量：20色譜測定2T/JAASS9-2020分別取相同體積樣液和標準工作溶液注入高效液相色譜儀，在上述色譜條件下測定試樣的響應值（峰高或峰面積）。經過與吡蟲啉標準溶液譜圖比較響應值得到試樣中吡蟲啉的濃度。結果計算與表述試樣中吡蟲啉含量以質量分數X計，單位為毫克每千克（mg/kg），按式（1）計算：（1）式中：Pi：試樣溶液中吡蟲啉組分的峰面積值；Cs：吡蟲啉標準溶液濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；Vs：標準溶液的檢測體積（mL）；Ps：吡蟲啉標準溶液面積平均值（系列濃度）；m：試樣質量，單位為克（g）。測定結果用平行測定的算術平均值表示，計算結果表示到小數點后一位。檢測限和重復性0.2mg/kgGB27