第三章

實驗動物飼養(yǎng)與應(yīng)用條件的

標(biāo)準(zhǔn)化

蔣靈芝意義實驗動物飼養(yǎng)與應(yīng)用條件標(biāo)準(zhǔn)化的意義：保證實驗動物的質(zhì)量和動物實驗結(jié)果的正確性。豚鼠：特點是毛短而光滑，生長快，抗病力強(qiáng)，繁殖性能好。廣泛用于藥物學(xué)、傳染病學(xué)、免疫學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、耳科學(xué)等各項醫(yī)學(xué)及生物學(xué)的研究中。SD大鼠：白色，產(chǎn)仔多，生長發(fā)育較Wistar大鼠為快，對疾病的抵抗力尤以呼吸道疾病的抵抗力強(qiáng)。自發(fā)腫瘤發(fā)生率較低，對性激素感受性高。C57BL/6J小鼠：黑色，對放射物質(zhì)耐受性強(qiáng)，但照射后肝癌發(fā)生率高。眼畸形，對結(jié)核桿菌有耐受性嗜酒精性高，是腫瘤學(xué)、生理學(xué)、遺傳學(xué)研究常用品系。Lewise大鼠：近交系大鼠，白化，對誘發(fā)自身免疫心肌炎高度敏感，可誘發(fā)過敏性腦脊髓炎、過敏性關(guān)節(jié)炎和自身免疫復(fù)合物血管球性腎炎等立刻移植多種腫瘤，高脂肪食物容易引起肥胖癥。

C57BL/6J小鼠新西蘭兔第一節(jié)實驗動物的環(huán)境包括飼養(yǎng)環(huán)境和實驗環(huán)境。實驗動物的環(huán)境——圍繞動物的所有條件。分自然因素和人為因素兩方面。見書上Ｐ３７頁。（一）控制環(huán)境的重要意義R=（A+B+C）×D±ER代表實驗動物總的反應(yīng)。A實驗動物物種的反應(yīng)。B實驗動物品種或品系的特有反應(yīng)。C個體差異。D表示環(huán)境影響。E代表實驗誤差。D與R呈正比，說明環(huán)境因素起主要作用。（二）環(huán)境因素對實驗動物的影響1.環(huán)境溫度：哺乳動物為恒溫動物，最適溫度18-29Co，溫度通過改變機(jī)體新陳代謝影響實驗動物的生命體征。不同動物適應(yīng)不同的最適溫度，不同溫度對動物實驗結(jié)果的影響不同。2.濕度：大氣中水分的含量。有絕對濕度和相對濕度之分。絕對濕度：每立方米的空氣中含水分的量。相對濕度：在特定溫度下，空氣中實際含水量與該溫度的飽和含水量的百分比值。通常用相對濕度表示。動物體溫受環(huán)境溫度、相對濕度、氣流速度的共同影響。3.氣流：氣流能夠調(diào)節(jié)環(huán)境的溫度和濕度。氣流影響皮膚水分的蒸發(fā)和散熱。氣流過大或過小對實驗動物均有影響。飼養(yǎng)室的換氣次數(shù)以10-20次/h最好。4.光照：包括照度、光線波長、光照時間，明暗交替時間的規(guī)律性。紅光：0.77-0.62微米；綠光：0.58-0.49微米；

藍(lán)光：0.49微米-.

藍(lán)光比紅光更能促進(jìn)動物的性成熟。5.噪聲：噪聲對實驗動物的影響非常復(fù)雜。造成心理和生理的不利影響，嚴(yán)重噪聲還可以導(dǎo)致動物的死亡。室內(nèi)噪聲控制在60分貝以下。6.空氣潔凈度：指室內(nèi)空氣中的塵埃顆粒、微生物、有害氣體三個方面的污染程度。污染源很多，包括實驗動物自身排除的廢物。我國對空氣潔凈度分級見書上P43頁。第二節(jié)實驗動物設(shè)施定義：生產(chǎn)實驗動物和從事實驗動物的建筑物及設(shè)備。實驗動物設(shè)施根據(jù)其功能和使用目的不同在國標(biāo)中將其分為實驗動物繁育、生產(chǎn)設(shè)施和動物實驗設(shè)施。

實驗動物繁育、生產(chǎn)設(shè)施（LaboratoryAnimalFacility）是指用于實驗動物繁育、生產(chǎn)的建筑物、設(shè)備以及運營管理在內(nèi)的總和。動物實驗設(shè)施（AnimalExperimentalFacility）是指以研究、試驗、教學(xué)、生物制品和藥品生產(chǎn)等為目的，進(jìn)行實驗動物飼育、試驗的建筑物、設(shè)備以及運營管理在內(nèi)的總和。一、實驗動物設(shè)施的分類（一）按微生物控制程度分類（二）按設(shè)施功能分類（三）按設(shè)施的平面布局分類（四）按屏障設(shè)施內(nèi)氣流組織形式分類（二）按設(shè)施功能分類（一）按微生物控制程度分類1．普通環(huán)境實驗動物的生存環(huán)境直接與外界大氣相通。飼料、飲水要符合衛(wèi)生要求，墊料要消毒，有防野鼠、防蟲設(shè)施。是飼養(yǎng)普通級實驗動物的場所，亦稱普通級動物設(shè)施。

2．屏障環(huán)境實驗動物生存在與外界隔離的環(huán)境內(nèi)。進(jìn)入實驗動物生存環(huán)境的空氣須經(jīng)凈化處理，其潔凈度相當(dāng)于10，000級。進(jìn)入屏障內(nèi)的人、動物及物品如飼料、水、墊料和實驗用品等均需有嚴(yán)格的微生物控制，通常稱SPF級動物設(shè)施。

3．隔離環(huán)境實驗動物生存在與外界完全隔離的環(huán)境內(nèi)。進(jìn)入實驗動物生存環(huán)境的空氣須經(jīng)凈化處理，其潔凈度相當(dāng)于100級。人不能直接接觸動物。進(jìn)入隔離系統(tǒng)內(nèi)的動物和物品都要經(jīng)過嚴(yán)格的凈化和／或滅菌處理。是飼養(yǎng)無菌級，SPF級實驗動物或進(jìn)行同級動物實驗的場所，通常也稱無菌設(shè)施。（二）按設(shè)施功能分類1．實驗動物生產(chǎn)設(shè)施：主要用于各種實驗動物品種（品系）的保種、育種、繁殖、生產(chǎn)、育成、供應(yīng)的設(shè)施。2．動物實驗設(shè)施：主要以動物實驗或以動物為原材料進(jìn)行臨床前藥物研究、藥品和生物制品等的檢定以及特殊品系的培育、保種、繁殖的設(shè)施。3．特殊實驗動物設(shè)施：包括感染動物實驗設(shè)施和應(yīng)用放射性物質(zhì)或其他特殊化學(xué)物質(zhì)等進(jìn)行動物實驗的設(shè)施。（三）按設(shè)施的平面布局分類1．無走廊式；此類設(shè)施一般面積較小，能最大限度地利用空間，用于飼養(yǎng)單一品種或以實驗為主的設(shè)施。一般用于小型動物研究或改造作為臨時動物房。由于人流物流交叉，進(jìn)出路線交叉，而且污染物品容易影響潔凈物品的清潔度，一般為普通級動物設(shè)施。

2．單走廊式；有效面積充分利用，為實驗動物的生產(chǎn)、實驗提供最大空間。缺點是無法將污染區(qū)和清潔區(qū)分隔開來，形成動物糞便、廢棄物與清潔物品的運行交叉，人流物流交叉，易受到污染。國內(nèi)外已經(jīng)廣泛采用此類設(shè)計，但必須加強(qiáng)管理，方能安全運行。

3．雙走廊式；是常用的一種實驗動物屏障設(shè)施類型。可有效地分割清潔區(qū)和污物區(qū)。作為亞屏障和屏障設(shè)施使用，比較容易控制微生物的危害。缺點是有效利用面積減小。

4．三走廊式；動物隔離良好，人員、動物、物品進(jìn)入有專門通道，可有效避免污物和潔凈物品交叉行走，人員物品進(jìn)出互不影響，可以大量長期飼養(yǎng)實驗動物，但空間利用率低，而且投資大維持費用高。（四）按屏障設(shè)施內(nèi)氣流組織形式分類按屏障設(shè)施內(nèi)氣流組織形式可劃分為單流式、亂流式、輻流式和混合式。一般為亂流式屏障設(shè)施，單流式、輻流式和混合式一般較少使用。亂流式屏障設(shè)施也稱為非單向流潔凈室，是指氣流以不均勻的速度成不平行的流動，伴有回流或渦流的潔凈室。其原理是依靠送風(fēng)氣流不斷稀釋室內(nèi)空氣把室內(nèi)污染逐漸地排出。表示亂流潔凈室的技術(shù)性能指標(biāo)主要有以下三項：（1）換氣次數(shù)換氣次數(shù)越多，空氣潔凈度越高，能量消耗也越大。（2）氣流組織其作用是確保均勻地送風(fēng)和回風(fēng)，充分發(fā)揮干凈氣流稀釋作用，單個風(fēng)口要有足夠的擴(kuò)散作用，全室風(fēng)口布置均勻，數(shù)量盡可能多一些，以盡量減少渦流和氣流回旋。（3）自凈時間指潔凈室從污染狀態(tài)回復(fù)到正常穩(wěn)定狀態(tài)的能力，越短越好，一般不超過30分鐘。屏障設(shè)施

是指一個相對密閉的實驗動物設(shè)施環(huán)境，設(shè)有恒溫、恒濕和除菌換氣系統(tǒng)。要求送入空氣的潔凈度達(dá)10000級，室內(nèi)保持正壓，具有嚴(yán)格的微生物控制系統(tǒng)，用以飼養(yǎng)清潔級或SPF級動物。屏障設(shè)施的布局屏障設(shè)施一般分為清潔區(qū)、污染區(qū)和外部。

凡是進(jìn)入該設(shè)施內(nèi)的物品均需經(jīng)過消毒滅菌處理，人員經(jīng)過專門培訓(xùn)，進(jìn)入清潔區(qū)前經(jīng)淋浴，更換無菌衣帽，遵循嚴(yán)格的操作規(guī)程和管理制度，保證屏障內(nèi)不被污染。一般應(yīng)根據(jù)設(shè)施內(nèi)產(chǎn)生的污染物的特點，采取行之有效的方法。如用水洗法可除去氣體中的氨、細(xì)菌和塵埃，用酸堿洗凈法或用活性炭、硅膠等吸附劑可以除去惡臭成分。在國際上除少數(shù)國家外，一般都不用清潔級這個概念。最初是由于我國經(jīng)濟(jì)還不夠發(fā)達(dá)，總體基礎(chǔ)設(shè)施條件、人們的觀念、科學(xué)素質(zhì)等比較落后的情況下提出的。隨著我國經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，科學(xué)水平的提高，與國際交流的增加，科研人員今后將越來越多的采用SPF級動物進(jìn)行實驗。第三節(jié)實驗動物籠器具1.隔離器隔離器，層流柜2.籠具:有兔籠、大鼠籠、小鼠籠、豚鼠籠、倉鼠籠、犬籠、猴籠、貓籠、層流架、動物專用電子秤、耳號鉗、固定器、解剖臺等。62220240000020980403飲水設(shè)備:大、小鼠的飲水瓶多用不銹鋼或無毒塑料瓶,規(guī)格250-500ml.定期清洗、消毒。無菌飲水機(jī)，是安裝了一層超濾膜濾去0.5微米以上的懸浮顆粒、細(xì)菌、真菌。用紫外線照射，殺死病毒。第四節(jié)實驗動物的飼料、飲水、墊料一、飼料1.飼料：實驗動物的飼料應(yīng)該富含蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、維生素、礦物質(zhì)，同時保證每天足夠的飲用水。2.飼料的種類：按物理性狀分：粉狀、顆粒狀、膨化飼料。按來源分動物性飼料與植物性飼料。按營養(yǎng)特性分：粗飼料、青綠飼料、能量飼料、蛋白飼料、礦物質(zhì)飼料、維生素飼料、添加劑。3.飼料的質(zhì)量要求：1）原料來源清楚；沒有污染，符合國家衛(wèi)生許可標(biāo)準(zhǔn)。2）儲存要保持通風(fēng)干燥，防止霉變。3）飼料加工及生產(chǎn)過程中注意消毒滅菌。4）成品包裝要嚴(yán)密，防止污染。5）飼料配方科學(xué)合理，符合飲食習(xí)慣。二、飼料配合技術(shù)（一）名詞定義1.飼料：能被動物利用，且在合理飼養(yǎng)的情況下不發(fā)生有害現(xiàn)象，有利于動物營養(yǎng)的物質(zhì)。2.日糧：指一只實驗動物一晝夜所采食的飼料總量。3.飼糧：指按日糧中各種飼料的合理比例配制成的混合飼料。4.配合飼料：按一定的飼料配方配制成的多種飼料混合料。（二）飼料營養(yǎng)素對動物實驗結(jié)果的影響1.通過實驗動物進(jìn)食量而影響實驗結(jié)果。2.影響動物的生長發(fā)育而影響實驗結(jié)果。3.影響動物生理生化指標(biāo)而影響實驗結(jié)果。4.影響動物營養(yǎng)而影響實驗