標準解讀

《GB/T 35942-2018 隱孢子蟲套式PCR檢測方法》是一項國家標準，旨在規范隱孢子蟲的分子生物學檢測流程。該標準詳細描述了使用套式PCR技術對環境樣本中的隱孢子蟲進行定性分析的方法。套式PCR是一種兩步或多步擴增過程，通過第一次PCR反應放大目標DNA片段后，再以第一次PCR產物作為模板進行第二次或更多次PCR擴增，從而提高檢測靈敏度和特異性。

根據此標準，首先需要從待測樣品中提取總DNA，然后設計針對隱孢子蟲特定基因區域的引物對。標準中推薦了內外兩套引物組合，其中外引物用于第一輪PCR擴增，內引物則應用于第二輪擴增。整個實驗過程中需嚴格遵守無菌操作原則，避免污染，并且每一步驟都應設置陽性對照與陰性對照以確保結果準確性。


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....

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  • 2018-02-06 頒布
  • 2018-09-01 實施
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文檔簡介

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T35942—2018

隱孢子蟲套式PCR檢測方法

NestedPCRmethodfordetectionofCryptosporidiumspp

.

2018-02-06發布2018-09-01實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

GB/T35942—2018

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農業部提出

。

本標準由全國動物衛生標準化技術委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位中國農業科學院上海獸醫研究所中國動物衛生與流行病學中心

:、。

本標準主要起草人陳兆國米榮升黃燕劉陸世王巖

:、、、、。

Ⅰ

GB/T35942—2018

隱孢子蟲套式PCR檢測方法

1范圍

本標準規定了隱孢子蟲套式檢測方法

PCR。

本標準適用于動物的隱孢子蟲感染的檢測流行病學調查和出入境檢驗檢疫

、。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T6682

臨床診斷中聚合酶鏈反應技術的應用

WS/T230—2002(PCR)

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

聚合酶鏈式反應

PCR:(PolymeraseChainReaction)。

磷酸鹽緩沖液

PBS:(PhosphateBufferedSaline)。

乙酸電泳緩沖液

TAE:Tris-(TrisAcetate-EDTABuffer)。

溴化乙錠

EB:(EthidiumBromide)。

牛血清白蛋白

BSA:(BovineSerumAlbumin)。

4儀器材料與試劑

、

41儀器

.

411基因擴增儀

..PCR。

412高速臺式冷凍離心機

..。

413低速大容量離心機

..。

414微量可調移液器

..:2μL、10μL、20μL、200μL、1000μL。

415核酸電泳儀

..。

416核酸電泳槽

..。

417凝膠成像分析系統

..。

418生物樣品均質研磨儀

..。

419高壓蒸汽滅菌器

..。

42材料

.

421一次性封口袋

..。

422棉

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