ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T35806—2018

動物流感檢測H7N9亞型流感病毒

雙重熒光RT-PCR檢測方法

Animalinfluenzadetection—Protocolofduplexreal-timeRT-PCR

forinfluenzavirussubtypesH7andN9

2018-02-06發布2018-09-01實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

動物流感檢測H7N9亞型流感病毒

雙重熒光RT-PCR檢測方法

GB/T35806—2018

*

中國標準出版社出版發行

北京市朝陽區和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區三里河北街號

16(100045)

網址

:

服務熱線

:400-168-0010

年月第一版

20182

*

書號

:155066·1-59180

版權專有侵權必究

GB/T35806—2018

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由農業部提出

。

本標準由全國動物衛生標準化技術委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位北京出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心中國出入境檢驗檢疫協會中國農業

:、、

科學院哈爾濱獸醫研究所中國檢驗檢疫科學研究院

、。

本標準主要起草人蒲靜高志強汪琳喬彩霞張錫全周琦張鶴曉張偉尹羿柏亞鐸劉艷華

:、、、、、、、、、、、

劉環王秀榮包紅梅韓雪清王慧煜

、、、、。

Ⅰ

GB/T35806—2018

動物流感檢測H7N9亞型流感病毒

雙重熒光RT-PCR檢測方法

1范圍

本標準規定了同時檢測和亞型動物流感病毒核酸的雙重熒光操作

H7N9TaqManRT-PCR

方法

。

本標準適用于和亞型動物流感病毒核酸的快速檢測和篩查

H7N9。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T6682

禽流感病毒通用熒光檢測方法

GB/T19438.1—2004RT-PCR

實驗室生物安全通用要求

GB19489

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

或值每個反應管內的熒光信號量達到設定的閾值所經歷的循環數

Ct(Cp):(ThresholdCycle,or

CrossingPoint)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(Diethypyrocarbonate)

羧基熒光素

FAM:(Carboxyfluorescein)

血凝素

HA:(Hemagglutinin)

六氯甲基熒光素

HEX:-6-(Hexachlorofluorescein)

小溝結合物

MGB:(MinorGrooveBinder)

神經氨酸酶

NA:(Neuraminidase)

羧基四甲基羅丹明

TAMRA:(Carboxytetramethylrhodamine)

熒光實時熒光反轉錄聚合酶鏈反應

RT-PCR:(Real-timeRT-PCR)

4試劑和材料

41試劑

.

411總則除另有說明所用試劑均為分析純所用液體試劑均需使用無酶的容器進行分裝

..:,,RNA。

412保存

..TRIzol:2℃~25℃。

413氯仿預