第2課時基因工程的原理和技術1．判斷正誤(1)若目的基因的堿基序列未知，可用化學合成法合成目的基因。(×)(2)利用PCR擴增目的基因時，需要已有的目的基因做模板。(√)(3)構建重組DNA時需要用的工具酶有：限制性核酸內切酶、DNA連接酶、質粒。(×)(4)可用質粒上的標記基因篩選導入重組DNA的受體細胞。(√)2．要使目的基因與對應的載體重組，所需的兩種酶是()①限制性核酸內切酶②DNA連接酶③解旋酶④還原酶A．①②B．③④C．①④D．②③解析目的基因與對應的載體重組時，首先需要用同一種限制性核酸內切酶，切割出相同的末端，再依靠DNA連接酶對目的基因和載體進行“縫合”形成重組DNA分子。答案A3．將目的基因導入微生物細胞之前，要給予一定處理和適宜件，下列敘述錯誤的是()A．CaCl2處理 B．酒精處理C．溫度、pH影響導入 D．增加細胞壁通透性解析將目的基因導入微生物細胞之前，要用氯化鈣(CaCl2)處理微生物，增加其細胞壁的通透性，當然也受溫度和pH影響，而酒精對細胞則有毒害作用。答案B4．如圖為用于基因工程的一個質粒示意圖。用EcoRⅠ限制性核酸內切酶切割目的基因和該質粒，再用DNA連接酶連接形成重組質粒，然后導入大腸桿菌，最后將大腸桿菌放在四種培養基中培養：a—無抗生素的培養基，b—含四環素的培養基，c—含氨芐青霉素的培養基，d—含四環素和氨芐青霉素的培養基。含重組質粒的大腸桿菌能生長的是()A．aB．a和cC．a和bD．b和c解析據圖，EcoRⅠ限制性核酸內切酶的切點位于四環素抗性基因的內部，用該酶切割質粒則會損壞四環素抗性基因的結構，從而導致含有重組質粒的大腸桿菌不具有四環素抗性。答案B5．在培育轉基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術流程。請據圖回答：(1)A過程需要的酶有________________________________________________________________。(2)B過程及其結果體現了質粒作為載體必須具備的兩個條件是________________________________________________________。(3)C過程的培養基中除含有必要營養物質、瓊脂和激素外，還必須加入______________________________________________________。(4)在D過程中，抗蟲基因遺傳信息的傳遞過程是_________________________________________________________________。解析(1)將目的基因和質粒結合形成重組質粒的過程需要用同一種限制性核酸內切酶，連接時還需要DNA連接酶。(2)作為基因工程的載體，必須具備三個條件：①在宿主細胞中能穩定保存并能大量復制；②有多個限制性核酸內切酶切點，而且每種酶的切點最好只有一個；③有一定的標記基因，便于篩選。題目中能體現的是①③。(3)由題可知，我們需要的植株是含有抗蟲基因的植株，因此要進行篩選，含有抗蟲基因的植株也一定含有卡那霉素抗性基因，所以要利用卡那霉素進行篩選。(4)抗蟲基因最終要表現出抗蟲的性狀就必須表達，即通過轉錄和翻譯來實現。