ICS07080

A40.

中華人民共和國國家標準

GB/T34265—2017

Sanger法測序技術指南

GuideforthemethodofSangersequencing

2017-09-07發布2018-04-01實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

GB/T34265—2017

目次

前言

…………………………Ⅰ

引言

…………………………Ⅱ

范圍

1………………………1

規范性引用文件

2…………………………1

術語和定義

3………………1

縮略語

4……………………2

原理

5………………………2

主要儀器設備

6、……………2

法基因測序指標

7Sanger…………………3

法基因測序方法

8Sanger…………………4

法基因測序的應用

9Sanger………………5

附錄資料性附錄法測序原理示意圖

A()Sanger………6

附錄資料性附錄試劑及溶液配制

B()…………………7

附錄資料性附錄測序反應體系的配制

C()……………8

附錄資料性附錄擴增程序

D()…………9

附錄資料性附錄待測序產物純化

E()…………………10

參考文獻

……………………11

GB/T34265—2017

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國生化檢測標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標準起草單位深圳華因康基因科技有限公司深圳市華因康高通量生物技術研究院廣州康昕

:、、

瑞基因健康科技有限公司武漢康昕瑞基因健康科技有限公司中國測試技術研究院上海交通大學醫

、、、

學院附屬瑞金醫院國家人類基因組南方研究中心中國計量科學研究院中山大學腫瘤防治中心

、、、。

本標準主要起草人盛司潼譚輝彪李花曾濤楊杰斌周李華張俊王升躍全燦陳功

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34265—2017

引言

基因測序方法是基因科技產業鏈的核心技術其發展狀況直接關系到生物產業的發展狀況對生物

,,

學癌癥攻克遺傳學醫藥研制藥效分析農業新能源國家民族戰略安全和人類生命健康安全具有

、、、、、、、

至關重要的支撐作用

。

基因測序技術在全球的發展非常迅速目前實際應用最廣泛的是測序方法它是超高精度

,Sanger,

測序的黃金標準是迄今為止唯一既能用于人類基因組提供從頭測序又能用于從頭組裝的技術將

,,。

測序方法標準化并加以推廣應用生物企業乃至整個國內行業就會獲得一個絕好的技術規范和

Sanger,

保護自我發展的壁壘推動整個行業產業鏈的發展提升整個行業的技術實力早日實現測序

,,。Sanger

方法的標準化將對我國基因生物檢測產業這一戰略性新興產業的發展起到至關重要的促進作用為

,。

了使測序方法更加規范有效發揮其重要的科技支撐作用有必要對其制定標準

Sanger,,。

由于測序方法并非單一技術涉及到不同技術領域的結合包括生物化學機械數據處理

Sanger,,、、、

等因此本標準僅對法基因測序的術語技術指標以及所涉及的儀器設備試劑方法進行說明

,Sanger、,、、

和規定

。

Ⅱ

GB/T34265—2017

Sanger法測序技術指南

1范圍

本標準規定了測序方法的術語和定義縮略語原理主要儀器設備法基因測序

Sanger、、、、、Sanger

指標法基因測序方法法基因測序的應用

、Sanger、Sanger。

本標準適用于對動物組織植物組織血液口腔黏膜毛發糞便土壤微生物等生物樣品中的

、、、、、、、

通過測序方法進行測序

DNASanger。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T6682

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件

。

31

.

基因測序genesequencing

對核酸分子的核苷酸排列順序的測定即測定組成核酸分子的腺嘌呤鳥嘌呤胞嘧啶

,(A)、(G)、(C)

和胸腺嘧啶或者是尿嘧啶的排列順序

(T)(U)。

定義

[GB/T30989—2014,3.18]

32

.

Sanger測序方法methodofSangersequencing

用于基因測序的雙脫氧鏈末端終止法在鏈延伸過程中利用熒光標記雙脫氧堿基隨機阻斷產生以

,,

結束的四組不同長度的核苷酸鏈