趙春杰沈陽藥科大學藥分教研室第十三章生化藥物分析概論主要內容概述質量檢驗的基本程序與方法常用定量分析方法及其應用生化藥物:系指從動物、植物及微生物提取的，也可用生物-化學半合成或用現代生物技術制得的生命基本物質及其衍生物、降解物及大分子的結構修飾物等，如氨基酸、多肽、蛋白質、酶、多糖、脂質、核苷酸類等。一、概述種類:1．氨基酸、多肽與蛋白質類藥物（1）氨基酸及其衍生物：單氨基酸、氨基酸衍生物和復合氨基酸類。（2）藥用活性多肽：消化道多肽、下丘腦多肽、腦多肽、激肽和其他肽類等。一、概述（3）藥用蛋白：豬或牛的纖維蛋白原、纖維蛋白、水蛭素等；屬蛋白質類的激素有生長素、甲狀旁腺素、催乳素；屬植物來源的蛋白類藥物有植物凝集素、天花粉蛋白等。2.酶類與輔酶類藥物按其功能可分為：助消化酶類、蛋白水解酶類、凝血酶及抗栓酶、抗腫瘤酶類和其他酶類等；還包括部分輔酶類（輔酶Q10）等。另外，一部分輔酶也屬于核酸類。一、概述3.多糖類藥物包括肝素、硫酸軟骨素A和C、硫酸角質素、透明質酸等。類肝素（酸性粘多糖）、殼聚多糖、靈芝多糖、黃芪多糖、人參多糖、海藻多糖、螺旋藻粘多糖等。4.脂質類藥物包括多價不飽和脂肪酸（PUFA）、磷脂類、固醇類、膽酸類和卟啉類等。一、概述5.核酸及其降解物和衍生物類藥物如RNA（包括iRNA-免疫核糖核酸）、DNA（脫氧核糖核酸）、多聚胞苷酸、巰基聚胞苷酸、ATP和cAMP等。此外，有核酪制劑，6-巰基嘌呤核苷、6-巰基嘌呤、5-氟尿嘧啶、呋喃氟尿嘧啶、阿糖腺苷、環胞苷、5-氟環胞苷、5-碘苷和無環鳥苷等。一、概述特點:共同特點分子量大結構確證難全過程的質量控制生物活性檢查安全性檢查效價（含量）測定生化藥物和基因工程藥物生物活性質量控制特點一、概述一．鑒別實驗（一）理化鑒別法

1．化學鑒別法

2．紫外分光光度法

3．高效液相色譜法（二）生化鑒別法

1．酶法

2．電泳法

3．樣品脫鹽后用等電點聚焦法測定（三）生物鑒別法二、質量檢驗的基本程序與方法二.雜質檢查（一）一般雜質檢查（二）特殊雜質檢查

1．原料藥的純度分析（1）多糖類（2）酶類藥物

2．生產過程中雜質的檢查二、質量檢驗的基本程序與方法三.安全性檢查（一）熱源檢查法和細菌內毒素檢查法（二）異常毒性試驗（三）過敏試驗（四）降壓物質試驗（五）無菌試驗（六）基因工程藥物中可能雜質與污染物檢查（七）致突變試驗（八）生殖毒性試驗二、質量檢驗的基本程序與方法四.含量(效價)測定（一）含量測定

1．HPLC法

2．十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDS法）（二）效價測定二、質量檢驗的基本程序與方法一．理化分析法（一）化學分析法

1．重量法（1）

提取法（2）

揮發法（3）

沉淀法

2．滴定分析法（二）電化學分析法（三）光譜分析法

1．比色法

2．紫外分光光度法

3．熒光分光光度法三、常用定量分析方法及其應用（四）色譜分析法

1．高效液相色譜法（HPLC）（1）反相高效液相色譜法(RP-HPLC)

（2）高效離子交換色譜法(HPIEC)

（3）高效凝膠過濾色譜法（4）應用

2．灌注色譜法

3.高效毛細管電泳法(HPCE)三、常用定量分析方法及其應用二、酶法（一）酶活力測定法1．基本概念2．酶促反應的條件及影響因素（1）

底物濃度的影響（2）

PH的影響（3）

溫度的影響（4）

輔助因子的影響（5）

空白和對照試驗三、常用定量分析方法及其應用3．測定方法（1）取樣測定法（2）連續測定法（3）檢測方法4．討論（二）酶分析法

1．動力學分析法

2．總變量分析法（三）酶法應用示例

1．胰蛋白酶效價測定

2.胃蛋白酶的活力測定三、常用定量分析方法及其應用三、電泳法（一）電泳法的基本原理和分類（二）常用電泳法的類型及其應用

1．紙電泳法

2．醋酸纖維素薄膜電泳法

3．PAGE法

4．SDS