指導教師：白鳳翎組員：付緒磊、高子媛、呂佳煜副溶血性弧菌概況1分布與季節性2Contents

致病性和致病因子3檢測方法4預防和治療5副溶血性弧菌概況副溶血性弧菌(Vibrio

parahaemolyticus，Vp)又名腸炎弧菌，系弧菌科弧菌屬，革蘭氏染色陰性，兼性厭氧菌，為多形態桿菌或稍彎曲弧菌。大多數菌體在液體培養基中有單端鞭毛、能運動。Vp嗜鹽畏酸，當在pH6以下即不能生長，在普通食醋中1—3min即死亡。對高溫抵抗力小，50℃20min，65℃5min或80℃1min條件下即可被殺死。本菌對常用消毒劑抵抗力很弱，可被低濃度的酚和煤酚皂溶液殺滅。最適宜的培養條件：溫度為30℃—37℃，含鹽2.5%—3%(若鹽濃度低于0.5%則不能生長），pH值為8.0—8.5。在固體培養基上菌落隆起，圓形，表面光滑，較濕潤，邊緣不整齊。Vp在科瑪嘉培養基上的菌落特征（紫色為Vp）副溶血性弧菌的分布及季節性Vp主要分布在海洋環境中，尤其是沿海地區的海水、海底沉積物和海產品中。世界各地溫暖的海洋、河口均有分布，如地中海、亞德里亞海、黑海、波羅的海、南太平洋、印度洋、墨西哥彎等海洋，都是Vp分布的地點。而當地捕獲的魚、貝、甲殼類當中均有Vp檢出報告，尤其是貝類(例如蠔)，因為以濾食方式攝食，容易檢出菌體。在海水溫度不低于10℃的地區，季節變化不會對菌株的數量產生影響。但分布于溫度變化較大的地區的菌株則有明顯的季節性。當水溫低于13-15℃時，附著于水產品上的Vp檢出數明顯減少，水樣中的菌含量減少到幾乎可以忽略，但沉淀物中的菌數較為穩定。為了避免低溫造成傷害，Vp附著于浮游生物上，沉降至水底越冬，至隔年溫度上升之后再度隨著季節性水流四處分布，形成年周期的循環。

副溶血弧菌的致病性、致病因子所致疾病：本病多在夏秋季發生于沿海地區，常造成集體發病。由于海鮮空運，內地城市病例也逐漸增多。人類食用被致病性Vp污染的或未煮熟的海產品會引起急性腸胃炎。通常發病的潛伏期為1h至4d不等，大多為10h左右。患者出現腹瀉、腹部痙攣、惡心、嘔吐和發熱現象，嚴重時甚至出現脫水、昏迷等癥狀。Vp引起的中毒比例很高，僅次于沙門氏菌和大腸桿菌。媒介：Vp食物中毒，是進食含有該菌的食物所致，主要來自海產品，如墨魚、海魚、海蝦、海蟹、海蜇，以及含鹽分較高的腌制食品，如咸菜、腌肉等。本菌存活能力強，在抹布和砧板上能生存1個月以上，海水中可存活47天。在中國，由于從業人員衛生意識不強，交叉污染和再次污染的現象經常發生，引起Vp中毒的食物除海產品外，還有涼拌菜和熟食制品等。致病因子：一般認為Vp的致病因子有黏附因子、侵襲力、溶血性毒素、尿素酶、脂多糖、外膜蛋白、蛋白酶、三型分泌系統和攝鐵系統等。副溶血弧菌的檢測方法傳統方法：目前,我國對Vp的檢測方法標準為:國家標準GB/T4789.7—2008《食品衛生微生物學檢驗副溶血弧菌檢驗》。Vp的傳統檢測方法，操作比較繁瑣，包括細菌分離培養、革蘭氏染色鏡檢、生化鑒定、動力、血清學分型、溶血及毒力實驗等步驟，完成鑒定工作一般需要5-7d，檢測周期長,工作量大并且操作復雜,靈敏度有限,不適合快速檢測。Vp檢測的標準程序免疫學方法：免疫學方法是利用抗原抗體反應的顯著特異性來進行細菌鑒別和血清型定性的方法,該項技術已有半個多世紀的歷史。該技術具有特異性強、靈敏度高、易于觀察等優點。目前已建立的Vp的免疫學檢測方法有:酶聯免疫吸附法(ELISA)、免疫熒光抗體技術和膠體金技術等。分子生物學技術：對于Vp的檢測,傳統的微生物檢測方法具有明顯的局限性,如檢測周期長、操作繁瑣、準確度低和許多難以控制的因素等,隨著分子生物學技術的不斷發展和完善以及技術服務的市場化,越來越多的分子生物學技術應用到Vp的檢測中。對Vp檢測來說現有的分子生物學檢測技術有多重PCR技術、環介導等溫擴增技術、有擴增內標的PCR技術、基于DNA染料EMA和PMA的PCR技術、納米金PCR技術、免疫捕獲PCR技術、免疫磁珠-多重PCR技術、Real-timePCR技術、分子信標real-timePCR技術、TaqMan探針技術、MPN-PCR、PCR-ELISA、DNA指紋圖譜技術、變形高效液相色譜技術等。傳感器技術：生物傳感器是將生物感應元件的敏感性、專一性與一個能夠產生和待測物濃度成比例的信號傳導器結合，利用各種生物材料或生物代謝產物如酶、抗體等做成的用于檢測、識別生物與食品的化學成分的傳感器。目前利用傳感技術對Vp檢測的研究主要集中在利用電子化學技術和電子鼻技術對食品中Vp的檢測。研究表明生物傳感器的應用提高了檢測的速度和靈敏度，使Vp檢測過程變得更為簡單，便于實現自動化。其它方法：目前檢測Vp的方法還有噬菌體法、Vp快速測試片、免疫磁性分離技術、吖啶橙染色法、高通量微生物鑒定儀等技術。綜合來看以上介紹的各種方法各有其優點和缺點,在快速檢測、定性和精確定量方面難以兼顧。因此實際操作中常將幾種方法融合在一起使用。預防和治療預防：要有效預防和控制由該菌引起的食物中毒，主要應采取防止污染、控制繁殖和殺滅病原菌等措施，并且這些措施應貫穿于“從農田到餐桌”，即采收、加工、貯運、銷售和消費等所有環節。治療：①發生中毒后要立即停止食用可疑中毒食品，并到醫院醫治。②嘔吐、腹瀉嚴重