ICS6502030

B41..

中華人民共和國國家標準

GB/T286303—2012

.

白斑綜合征WSD診斷規(guī)程

()

第3部分原位雜交檢測法

:

Diagnosticprotocolsforwhitespotdisease—

Part3Insituhbridizationmethod

:y

2012-07-31發(fā)布2012-11-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T286303—2012

.

前言

白斑綜合征診斷規(guī)程分為五個部分

GB/T28630《(WSD)》:

第部分核酸探針斑點雜交檢測法

———1:;

第部分套式檢測法

———2:PCR;

第部分原位雜交檢測法

———3:;

第部分組織病理學(xué)診斷法

———4:;

第部分新鮮組織的染色法

———5:T-E。

本部分為的第部分

GB/T286303。

本部分按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本部分由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本部分由全國水產(chǎn)標準化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC156)。

本部分起草單位中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部全國水產(chǎn)技術(shù)推廣總站

:、。

本部分主要起草人黃倢楊冰陳愛平宋曉玲史成銀楊叢海魏琦劉莉

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T286303—2012

.

白斑綜合征WSD診斷規(guī)程

()

第3部分原位雜交檢測法

:

1范圍

的本部分規(guī)定了白斑綜合征原位雜交檢測法所需試劑與材料儀器設(shè)備操作步驟和

GB/T28630、、

結(jié)果判定

。

本部分適用于進行對蝦及白斑綜合征的其他敏感宿主組織細胞的感染程度及病毒擴增狀況的評估

和疾病的確診不適于對病毒的非感染性攜帶的標本進行病毒檢測

。。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡不注日期的引用文件其最新版本包括所有修改單適用于本文件

。,()。

白斑綜合征診斷規(guī)程第部分核酸探針斑點雜交檢測法

GB/T28630.1—2012(WSD)1:

白斑綜合征診斷規(guī)程第部分組織病理學(xué)診斷法

GB/T28630.4—2012(WSD)4:

3原理

31白斑綜合征的病原和病理學(xué)特征

.

見的

GB/T28630.4—20122.1。

32技術(shù)原理

.

原位雜交檢測方法是以非放射性標記物地高辛標記的白斑綜合征病毒核酸探

———(DIG)(WSSV)

針與存在于切片中的進行核酸分子雜交并通過抗原抗體反應(yīng)和酶底物的化學(xué)顯色反應(yīng)

WSSVDNA,--

在組織切片上顯示出的存在位點原位雜交可完整保持組織與細胞形態(tài)能在復(fù)雜組織中對單

WSSV。,

一細胞進行病毒檢測準確反映組織細胞中病毒的分布

,。

4試劑和材料

41除非另有說明在分析中僅使用確認為分析純的試劑和蒸餾水或去離子水或相當(dāng)純度的水

.,。

42核酸探針按中的規(guī)定

.GB/T28630.1—20126.2。

43堿性磷酸酶偶聯(lián)的抗體抗生化試劑

.DIG(AP-DIG,0.75U/μL,4℃):。

44二甲苯

.。

45無水乙醇

.。

46乙醇

.95%。

47中性樹膠生物染色用

.:。

48石蠟熔點切片級

.