ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T18644—2020

代替

GB/T18644—2002

豬囊尾蚴病診斷技術

Diagnostictechniquesforporcinecysticercosis

2020-12-14發布2020-12-14實施

國家市場監督管理總局發布

國家標準化管理委員會

GB/T18644—2020

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范圍

1………………………1

規范性引用文件

2…………………………1

縮略語

3……………………1

顯微鏡檢查

4………………1

試劑

4.1…………………1

儀器設備

4.2……………1

蟲體采集

4.3……………2

壓片制備

4.4……………2

顯微鏡檢查

4.5…………………………2

顯微鏡檢查結果判定

4.6………………2

法

5PCR……………………2

試劑

5.1…………………2

儀器設備

5.2……………2

引物

5.3…………………3

樣品

5.4…………………3

操作程序

5.5PCR………………………3

擴增產物電泳檢測

5.6…………………4

試驗成立條件

5.7………………………4

結果判定

5.8PCR………………………4

間接

6ELISA………………4

試劑

6.1…………………4

儀器設備

6.2……………4

樣品

6.3…………………5

試驗步驟

6.4……………5

試驗成立條件

6.5………………………6

結果判定

6.6ELISA……………………6

7Dot-ABC-ELISA…………………………6

試劑

7.1…………………6

儀器設備

7.2……………7

樣品

7.3…………………7

試驗步驟

7.4……………7

試驗成立條件

7.5………………………8

結果判定

7.6Dot-ABC-ELISA…………8

綜合判定

8…………………8

Ⅰ

GB/T18644—2020

附錄規范性附錄生理鹽水及豬囊尾蚴頭節形態特征

A()……………9

附錄規范性附錄引物位置溶液配制及電泳結果

B()PCR、…………10

附錄規范性附錄試劑及其配制

C()ELISA……………12

附錄資料性附錄豬囊尾蚴重組蛋白的制備

D()TS-CC18…………14

附錄資料性附錄間接酶聯免疫吸附試驗的加樣

E()…………………16

附錄資料性附錄豬囊尾蚴和烯醇化酶單克隆抗體的制備

F()TS-CC18…………17

附錄資料性附錄相關試劑配制及結果判定

G()Dot-ABC-ELISA…………………20

Ⅱ

GB/T18644—2020

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準代替豬囊尾蚴病診斷技術與相比除編輯性修

GB/T18644—2002《》,GB/T18644—2002,

改外主要技術變化如下

,:

范圍部分增加了和技術見第章

———PCRDot-ABC-ELISA(1);

增加了縮略語部分見第章

———(3);

增加了病原的檢測方法見第章

———PCR(5);

修改了酶聯免疫吸附試驗的檢測抗原和檢測步驟直接對血清樣品進行抗體檢測見第章

———,(6,

年版的第章

20023);

增加了檢測循環抗原的方法見第章

———Dot-ABC-ELISA(7);

增加了綜合判定見第章

———(8);

增加了生理鹽水及豬囊尾蚴頭節圖片見附錄引物位置溶液配制及電泳圖片見附

———(A),PCR、(

錄試劑及其配制見附錄年版的附錄豬囊尾蚴重組蛋白的

B),ELISA(C,2002A),TS-CC18

制備見附錄間接酶聯免疫吸附試驗加樣示例見附錄豬囊尾蚴和烯醇化

(D),(E),TS-CC18

酶單克隆抗體的制備見附錄相關試劑配制及結果判定見附錄

(F),Dot-ABC-ELISA(G)。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文件的發布機構不承擔識別這些專利的責任

。。

本標準由中華人民共和國農業農村部提出

。

本標準由全國動物衛生標準化技術委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位中國農業科學院蘭州獸醫研究所

:。

本標準主要起草人才學鵬駱學農張少華鄭亞東郭愛疆侯俊玲

:、、、、、。

本標準所代替標準的歷次版本發布情況為

:

———GB/T18644—2002。

Ⅲ

GB/T18644—2020

引言

豬囊尾蚴病是由豬帶絳蟲Taeniasolium的幼蟲所引起的一種危害嚴重的

(porcinecysticercosis)()

人獸共患寄生蟲病世界動物衛生組織將該病列為需申報的疾病之一目前該病廣泛存在于發展中

。。,

國家而且發達國家的病例也有逐年增加的趨勢不僅影響養豬業的發展造成巨大的經濟損失而且還

,,,,

嚴重威脅人類健康

。

豬囊尾蚴病的診斷包括病原學診斷與血清學診斷病原學診斷的目的在于確定臨床剖檢樣本中蟲

。

體的形態特征在顯微鏡下觀察頭節頂突上有內外兩圈排列整齊的小鉤即可判為豬囊尾蚴若囊尾蚴

,,。

主要寄生于肝臟則要注意與亞洲帶絳蟲囊尾蚴相區別目前該病的生前診斷主要采用血清學方法

,。,,

所用的抗原有蟲體抗原囊液抗原或分泌代謝抗原等雖然這些抗原的檢測敏感性較高但特異性差而

、,,,

且抗原來源非常有限鑒于以上原因本次對豬囊尾蚴病診斷技術的修訂除間

。,GB/T18644—2002《》,

接所用抗原改為豬囊尾蚴期特異性基因重組蛋白外還增加了血清循環抗原

ELISA18ku(TS-CC18),

檢測方法和病原的檢測方法以滿足豬囊尾蚴病流行病學調查藥物治療效果評價和動物

(CAg)PCR,、

流通風險評估等不同需求

。

本文件的發布機構提請注意聲明符合本文件時可能涉及到第章間接酶聯免疫吸附試驗

,,6

相關的專利使用

(ELISA)。

本文件的發布機構對于該專利的真實性有效性和范圍無任何立場

、。

該專利持有人已向本文件的發布機構保證他愿意同任何申請人在合理且無歧視的條款和條件下

,,

就專利授權許可進行談判該專利持有人的聲明已在本文件的發布機構備案相關信息可以通過以下

。。

聯系方式獲得

:

專利持有人姓名才學鵬張少華景志忠駱學農郭愛疆鄭亞東竇永喜

:、、、、、、。

地址甘肅省蘭州市鹽場堡徐家坪號

:1。

請注意除上述專利外本文件的某些內容仍可能涉及專利本文件的發布機構不承擔識別這些專

,。

利的責任

。

Ⅳ

GB/T18644—2020

豬囊尾蚴病診斷技術

1范圍

本標準規定了豬囊尾蚴病的顯微鏡檢查聚合酶鏈式反應法法間接酶聯免疫吸附試驗間

、(PCR)、(

接斑點生物素親和素復合物酶聯免疫吸附試驗診斷技術及綜合判定

ELISA)、-(Dot-ABC-ELISA)。

本標準適用于豬和野豬的囊尾蚴病診斷

。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

基因擴增領域檢測實驗室認可指南

CNAS-GL029:2