標準解讀

GB/T 17999.6-1999是一項中國國家標準，全稱為《SPF雞胚敏感試驗》。該標準規定了使用無特定病原體（Specific Pathogen Free，簡稱SPF）雞胚進行敏感性測試的方法、條件、過程及結果判定的具體要求，旨在為疫苗生產、病毒學研究及生物制品的效力與安全性評價提供統一和科學的實驗依據。以下是該標準的主要內容概述：

  1. 范圍：本標準適用于評估微生物（特別是病毒）對SPF雞胚的感染性、毒力及免疫原性等特性的測定，是生物制品如疫苗制備過程中不可或缺的質量控制環節。

  2. 術語和定義：明確了SPF雞胚、感染、接種、死亡胚、存活胚等關鍵術語的定義，確保實驗操作中的語言統一性和準確性。

  3. 試劑與材料：詳細列出了進行試驗所需的所有試劑、培養基、雞胚以及器具的具體要求和準備方法，強調所有材料需符合無菌或無特定病原體的標準。

  4. 試驗動物與雞胚：規定了SPF雞胚的選擇標準、來源、孵化條件及使用前的檢查流程，確保雞胚的健康狀態和試驗的一致性。

  5. 試驗方法：

    • 接種方法：包括接種部位、劑量、途徑（如絨毛尿囊膜接種、卵黃囊接種等）的具體操作步驟。
    • 觀察指標：記錄接種后雞胚的生存狀態、病變特征、死亡時間等，以及如何通過這些指標評估微生物的致病性或疫苗的效果。
    • 對照設置：設立陰性對照（未接種病毒的雞胚）和陽性對照（已知反應的雞胚），以驗證試驗的可靠性和準確性。

  6. 結果判定：根據雞胚的存活情況、病變特點等綜合判斷微生物的敏感性或疫苗的有效性，具體標準視試驗目的而定。

  7. 數據記錄與報告：要求詳細記錄試驗過程、觀察結果及任何異常情況，形成規范的試驗報告，便于結果復核和后續分析。

  8. 質量控制：強調整個試驗過程中應采取的質控措施，確保試驗結果的重復性和可比性。


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  • 被代替
  • 已被新標準代替，建議下載現行標準GB/T 17999.7-2008
  • 1999-11-10 頒布
  • 2000-04-01 實施
?正版授權
GB/T 17999.6-1999SPF雞胚敏感試驗_第1頁
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TCS.65.020.30B41中華人民共和國國家標準GB/T17999.6-1999SPF雞胚敏感試驗SPFchicken--Embryosusceptibilitytest1999-11-10發布2000-04-01實施國家質量技術監督局發布

GB/T17999.6-1999禽腦脊髓炎病毒(AEV)感染常用的監測方法有瓊脂擴散試驗(AGP)和胚敏感試驗(ES)二者均可對AEV感染做出確診。ES已在我國SPF雞場的AE監測中得到應用和驗證，本標準在此基礎上·規定了SPF雞胚敏感試驗。SPF雞微生物學質量控制國家系列標準.包括SPF雞微生物學監測總則和9種SPF雞微生物學檢測方法。本標準為《SPF雞旺敏感試驗》。SPF雞微生物學檢測方法還包括以下部分：GB/T17999.1—1999SPF雞紅細胞凝集抑制試驗;GB/T17999.2-1999SPF雞血清中和試驗；GB/T17999.3—1999SPF雞血清平板凝集試驗；GB/T17999.4—1999SPF雞瓊脂擴散試驗；GB/T17999.5—1999SPF雞酶聯免疫吸附試驗;GB/T17999.7—1999SPF雞雞白痛沙門氏菌檢驗：GB/T17999.8—1999SPF雞試管凝集試驗GB/T17999.9—1999SPF雞間接免疫熒光試驗。本標準由中華人民共和國農業部、國家科學技術部提出本標準由農業部畜牧獸醫司歸口。本標準起草單位：農業部實驗動物研究中心、山東省農科院家禽研究所本標準主要起草人：趙立紅、陳德威、張秀美、張冰、李軍。

中華人民共和國國家標準GB/T17999.6--1999SPF雞胚敏感試驗SPFchicken-Embryosusceptibilitytest1范圍本標準規定了胚敏感試驗所用試劑、材料.操作程序及結果判定等本標準適用于SPF雞感染禽腦脊髓炎病毒后的抗體監測。2原理VanRoekel毒株是禽腦脊髓炎病毒的一株旺適應毒株,具有高度暗神經性。對非免疫雞群的雞胚有致病性.引起肌肉營養不良、運動性降低、足趾卷曲等特征性病變。免疫雞群的雞胚對經卵黃囊接種的病毒有抵抗力。3試劑和器材3.1試劑3.1.1AE-VanRoekel病毒(0.2mL含100EIDao)。3.1.2SPF蛋.3.1.3被檢蛋。3.2器材3.2.11ml注射器3.2.27*針頭。3.2.3恒溫培養箱。3.2.4超凈工作臺3.2.5小型孵化器4操作程序4.1取被檢蛋及SPF蛋孵至6日齡4.2取6日齡被檢雞胚，每旺經卵黃囊接種0.2mL含100EID.o的AE-VanRoekel病毒液，接種完畢用蠟封孔.同時取6日齡SPF雞胚接種與不接種病毒作為對照。4.3接種后的雞胚,置37C～37.5C孵化器中孵化，每天照蛋一次，取出死亡雞胚，接種后第12d取出全部雞胚待檢。4.4觀察病變：非免疫雞的雞胚感染VanRoekel后出現特征性病變,早期為胸腹部肌肉、皮下水腫.當接種后10d～12d解部活胚時，見腿肌菱縮、足趾卷曲，注意與接種、不接種SPF對照雞胚對比觀察結果判定5.1當接種SPF對照雞

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