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文檔簡介
實驗一一、淋巴細胞的分離二、細胞抗原片的制備三、人血清分離
杜聯峰外周血細胞淋巴細胞單核-巨噬細胞粒細胞紅細胞血小板一、淋巴細胞的分離
原理：根據淋巴細胞與血液中的其他細胞存在密度差異（比重差異），利用密度與淋巴細胞相近且近于等滲的分離液（ficoll液）作密度梯度離心進行分離。方法：聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度離心法（Ficoll分離液法）目的：將淋巴細胞從外周血細胞中分離出來分離液要求：①對細胞無毒②基本等滲③有一定比重（根據所分離物質選擇分離液）實驗材料：淋巴細胞分離液，離心管，刻度吸管，毛細吸管，抗凝管等。
實驗步驟：1、無菌采外周靜脈血2ml加入抗凝管混勻、5分鐘后加入Hank’s液2ml稀釋血液。2、將抗凝血沿管壁緩慢加入分離液中。3、配平，放入水平離心機2000rpm離心10分鐘4、用毛細吸管吸取血漿與分離液處淋巴細胞，放入刻度離心管中。5、加入Hank’s液至5ml,，2000rpm離心5分鐘。棄去上清，沉淀為淋巴細胞Ficoll分離液法血漿淋巴細胞分離液粒細胞紅細胞2000r/min20min稀釋的抗凝血淋巴細胞分層液
淋巴細胞血漿
分層液稀釋液
紅血球二、淋巴細胞抗原片制備吹鋪冷風吹干冷丙酮固定5~15min冷風吹干，密封置－30℃以下低溫保存三、人血清分
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