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文檔簡介
果蠅培養基制備與保存注意事項沈妍(果蠅資源與技術平臺)果蠅是經典的模式生物,具有生長迅速、繁殖力強、遺傳物質簡單、突變體多等優點,廣泛應用于遺傳,發育,生理和行為學等研究領域。果蠅培養基是一切以果蠅為模式動物開展試驗的基礎,在果蠅品系保存以及各項果蠅相關試驗中適宜的培養基能達到事半功倍的效果。本文總結果蠅培養基配制與保存的注意事項。培養基制備前注意事項原料果蠅培養基的配方主要包含水、玉米粉、大豆粉、蔗糖、麥芽糖、酵母、瓊脂、丙酸和苯甲酸鈉等。玉米粉是培養基制備的主要原料。目前,市場上玉米粉種類繁多,我們需選擇糯性玉米粉。糯性玉米粉制成的培養基蓬松粘稠,更適合幼蟲生長。而非糯性(粳性)玉米粉顆粒粗,制成的培養基較為稀薄,冷卻凝結后會出現分層現象。瓊脂粉影響培養基硬度。每一批次效價不同。每次新訂購的瓊脂粉應先做預試驗,根據食物硬度確定瓊脂粉的用量。培養基制備容器的選擇根據培養基制備體積的不同,我們需選擇不同的加熱工具。配制少量培養基,1L以下,選用微波爐。配制1L到5L培養基,選用電飯鍋。配制10L以上的培養基,選用專業的帶有攪拌功能的加熱容器。培養基配制過程中的注意事項1加熱前的準備在加熱前,應先將玉米粉、大豆粉、蔗糖、麥芽糖等原材料用冷水攪拌均勻,勿用熱水攪拌,熱水會使玉米粉、大豆粉結塊,溶解不充分。2酵母粉發酵溫度的控制干酵母粉需要和溫水混勻后發酵。在發酵過程中應注意水溫的控制,水溫以25°C到30°C為宜,高溫會使酵母失活。發酵時間以十五分鐘左右為佳。水位的控制在配制過程中,培養基的體積最多只能加到容器體積的三分之二,必須留出三分之一沸騰的空間。在培養基接近沸騰時要時刻關注其狀態,以免培養基因沸騰過度而漫出容器外,而沸騰不充分會導致培養基分層。一般100L的鍋,我們最多只能配制60L培養基。攪拌培養基不管使用哪種加熱工具,在加熱過程中,都需要不停攪拌培養基,防止粘鍋和結塊。培養基配制完成后的注意事項培養基配制完成后,應放在陰涼通風處降溫冷凝。待培養基完全冷卻后保存于低溫環境中。新配制的培養基應在兩周內使用完。保存不當會導致培養基發霉或者干裂。1培養基發霉培養基發霉的原因主要有以下三個:一是保存環境不合適。新制備好的培養基應保存在低溫環境中。一般以4°C左右為宜。若環境溫度較高,濕度大時,培養基易發霉。二是防腐劑添加不當。防腐劑應當在培養基溫度降到75C以下時添加,否則防腐劑的作用將大大降低,培養基易變質。三是防腐劑變質也會導致培養基變質。2培養基開裂培養基放置時間過長,往往會出現培養基萎縮開裂的情況,尤其是在干燥的冬季。因此在保存培養基時應注意保濕。主要方法包括低溫保存和用不透氣材料包裹培養基。另外盡量不要把培養基放在空調的出風口處。總結培養基對于果蠅生長發育有著重要的影響。在配制前,配制中以及配制后都有許多注意事項。配制前,要保證玉米粉和瓊脂粉等原材料的質量,防止出現培養基分層或者凝結不充分的現象。配制中需要對溫度有良好的控制,讓酵母粉得到充分發酵,讓培養基得到充分的沸騰。配制后,需要妥善保存培養基,防止它發霉或者干裂。如發現培養基異常,應當及時丟棄,配制新的培養基。總之,配制培養基是一個需
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