第十章甾體激素類藥物的分析第一節甾體激素藥物的分類、化學結構及理化性質第二節鑒別試驗與特殊雜質檢查第三節含量測定根本結構：環戊烷駢多氫菲ABCD12345678910111213141516171819根本骨架分類：甾體激素腎上腺皮質激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素一、結構與性質

1.腎上腺皮質激素主要活性基團性質△4–3–酮UV、與羰基試劑反應

C17

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α–醇酮基還原性氫化可的松2.雄性激素及蛋白同化激素主要活性基團性質△4–3–酮UV、與羰基試劑反應C17–β–羥基可成酯丙酸睪酮3.孕激素主要活性基團性質△4–3–酮UV、與羰基試劑反應C17–甲酮基與亞硝基鐵氰化鈉反應黃體酮4.雌激素主要活性基團性質A環為3–OH苯環UV、與重氮苯磺酸鹽反應C17–乙炔基與AgNO3反應C17–羥基可成酯炔雌醇第二節鑒別試驗及特殊雜質檢查1.呈色反響甾體激素類藥物呈色H2SO4H3PO4HClO4HCl一、鑒別試驗〔1〕與強酸的呈色反響甾酮類激素藥物呈色羰基試劑①C3–酮基和C20–酮基常用的羰基試劑：2,4-二硝基苯肼、異煙肼、硫酸苯肼〔2〕官能團的反響腎上腺皮質激素藥物呈色四氮唑鹽OHˉ②C17–α–醇酮基復原性具有甲酮基或活潑亞甲基的甾體激素類藥物呈色亞硝基鐵氰化鈉間二硝基酚芳香醛③甲酮基黃體酮藍紫色亞硝基鐵氰化鈉其他甾體淡橙色不顯色有機氟Fˉ有機破壞有機氯Clˉ④有機鹵素茜素氟藍硝酸亞鈰硝酸—硝酸銀AgCl↓呈色腎上腺皮質激素藥物Cu2O↓橙紅色堿性酒石酸銅2.沉淀反響Ag↓黑色氨制硝酸銀含炔基的甾體激素銀鹽沉淀硝酸銀↓

3.制備衍生物測定m.p.4.水解產物的反響△４-3-酮240nm苯環280nm5.UV法6.IR法7.TLC法主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別8.HPLC法地塞米松磷酸鈉氫化可的松磷酸鈉倍他米松磷酸鈉氫化潑尼松磷酸鈉對照品法二、特殊雜質檢查方法：??

對照液供試液對樣還原鉬酸銨AAnm????????????7402.甲醇和丙酮〔靈敏度法〕甲醇不得出峰檢測限丙酮≤5.0%內標法+校正因子GC法??3.雌酮原理Zimmermann反響堿性KOH乙醇高純度紫紅色間二硝基苯?????4.硒來源合成中用二氧化硒(SeO2)脫氫劇毒方法+4+6????????????SeSe鹽酸羥胺氧瓶燃燒5.其他甾體與標示藥物結構不同的甾體化合物都稱為“其他甾體〞方法〔具有一定別離能力〕〔1〕TLC法〔上下濃度比照法〕判定方法：規定雜質斑點數目規定雜質斑點顏色〔2〕HPLC法〔類似上下濃度比照法〕判定方法：規定雜質峰數目規定雜質峰面積

腎上腺皮質激素類C17-α－醇酮基有強復原性1.原理一、四氮唑比色法第三節含量測定OH-[還原]有色甲瓚四氮唑鹽醇酮基-a-17C2.方法對照品法40～45′暗???????????????25℃氫氧化四甲基銨對照液供試液ATTC3.討論〔1〕基團對反響速度的影響C11=O＞C11－OHC21－OH＞C21-酯C16無論何種取代基反響速度↓〔2〕溶劑、水分的影響含水量＞5%→ν↓含水10%→A↓10%含水30%→幾無反響—無醛無水乙醇醛→A↑—無水乙醇〔3〕O2與光線的影響反應過程反應產物怕光→避光、快速O2影響顏色強度和穩定性→隔絕空氣、快速、充N2〔4〕堿的種類及參加順序反響應在強堿性〔pH〕條件下進行以氫氧化四甲基銨的結果最正確參加順序：堿試液四氮唑鹽皮質激素溶液??〔5〕溫度與時間t℃↑→ν↑→甲瓚分解↑→%↓ChP25℃40～45′BP30℃1hC3－酮基腎上腺皮質激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素1.原理二、異煙肼比色法?HCl（縮合）異煙腙（黃）酮基異煙肼????-3C異煙腙〔黃色〕2.方法對照品法暗45′???????????????55℃異煙肼揮去乙醇對照液供試液A3.討論〔1〕反響速度C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反響反響專屬性C3－酮基〔2〕溶劑的選擇異煙肼鹽酸鹽→甲醇、乙醇無水甲醇無水乙醇〔3〕水分、O2與光線的影響含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓不揮發溶劑、不吸收水分時→O2與光線無影響〔4〕酸、異煙肼的量鹽酸:異煙肼=2:1樣品:異煙肼=1:8→ν↑酸度↑→異煙肼鹽↓酸度↓→A↓1.原理三、Kober反響比色法λmax=465λmax=515△△桃紅黃色雌