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文檔簡介

枯草芽孢桿菌的分離篩選微生物設計性實驗第六組1實驗目的2實驗原理配方：牛肉膏1.0g蛋白胨2.0g氯化鈉1.0g可溶性淀粉2.0g瓊脂4.0g蒸餾水200ml調整PH值至7.23.1選擇培養基本次實驗進行產淀粉酶的枯草芽孢桿菌的篩選，所以應選淀粉培養基。配置時應先把淀粉用少量蒸餾水調成糊狀，再加入到融化好的培養基中。

3實驗材料3.2溶液或試劑牛肉膏蛋白胨氯化鈉可溶性淀粉瓊脂碘

碘原液碘化鉀可溶性淀粉磷酸氫二鈉檸檬酸氯化鈷重酪酸鉀0.01NHCL3.3儀器或設備平板培養皿試管三角瓶燒杯稱量紙高壓蒸汽滅菌鍋干燥箱無菌吸管無菌培養皿酒精燈接種鉤滴管

4實驗步驟1制備土壤稀釋液選好采樣點，去土表面5cm，去5-15cm處，用無菌器具規范采樣幾十克。記錄采樣時間，地點環境等，以備考證。采樣后應盡快分離。使土樣與水分充分混合，將細胞分散，放入99ml無菌水三角瓶中，80度水浴處理1小時候取出。用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，然后從該試管中吸取1ml加入另一盛有9ml無菌水試管中，以此類推。制成五分不同稀釋度的土壤溶液。2涂布

將上述每種培養基的三個平板底面分別用記號筆寫上3、4、5、三個稀釋度，然后分別由3、4、5三管土壤稀釋液中各吸取0.2ml，小心的滴在對應的平板培養基表面中央位置。用無菌涂布器涂布，均勻分布，在室溫下靜置5—10分鐘，使菌液浸入培養基。3培養

將淀粉培養基平板倒置于30攝氏度的培養箱中培養1-3d4初篩

觀察菌落表面粗糙不透明，呈污白色或微黃色，將這樣的菌種單個菌落分別挑取少許細胞接種到培養基上，置于30度的培養箱中培養，若發現有雜菌，需要再進行分離純化。（若果不能用肉眼更好的觀察，可以對其進行革蘭氏染色，在顯微鏡下觀察，與標準菌種比較）5復篩測定淀粉酶活2方法步驟7結果分

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