臨床實驗室生物安全防護培訓臨床實驗室生物安全1一、術語和定義（1）.氣溶膠：懸浮于氣體介質中的粒徑一般為0.001~1000um的固態或液態微小粒子形成的相對穩定的分散體系。（2）.生物安全柜：具備氣流控制及高效空氣過濾裝置的操作柜，可有效降低實驗過程中產生的有害氣溶膠對操作者和環境的危害。一、術語和定義2二.實驗室生物安全防護水平分級

將實驗室生物安全防護水平分為一級、二級、三級和四級，一級防護水平最低，四級防護水平最高：A.生物安全防護水平為一級的實驗室適用于操作在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物B.生物安全防護水平為二級的實驗室適用于操作能夠引起人類或者動物疾病，一般情況下對人、動物或者環境不構成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物C.生物安全防護水平為三級的實驗室適用于操作能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物D.生物安全防護水平為四級的實驗室適用于操作能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發現或者已經宣布消滅的微生物二.實驗室生物安全防護水平分級將實驗室生物安全防護水平分為3三、臨床實驗室生物安全管理A.生物安全柜應安放在實驗室中的什么地方比較合適：1.遠離人員活動，物品流動以及可能會擾亂氣流的地方，避免放在離門口很近的地方。2.進入生物安全柜的低速率的定向氣流，極易受到干擾，包括人員走進生物安全柜所形成的氣流、打開窗戶、送風系統調整以及開關門等都可能造成影響。三、臨床實驗室生物安全管理A.生物安全柜應安放在實驗室中的什4B.生物安全柜性能檢測

1.個體防護能力

2.樣品保護能力3.交叉污染防護能力B.生物安全柜性能檢測5

C.個體防護裝備

包括：眼鏡、口罩、帽子、防護衣、手套、鞋套、聽力保護器。

6D.微生物危害評估：

1.當建設使用傳染性或有潛在傳染性材料的實驗室前，必須進行微生物危害評估。2.確定對象微生物應在那一級的生物安全防護實驗室中進行操作。3.制定相應的操作規程，實驗室管理制度和緊急事故處理方法，必須形成書面文件并嚴格遵守執行。D.微生物危害評估：7四、各類緊急情況處理A.手部清洗消毒

1.推薦使用肘動式或者自動式洗手開關2.流動水沖洗手部多次，然后用液體皂滴在手上，反復撮手，在用水徹底沖洗3.清洗完畢再用干凈的紙巾或手巾擦干4.可用75%的酒精擦手來清除雙手的輕度污染5.在沒有洗手池的地方，可以使用含酒精的“免洗”手部清潔產品代替四、各類緊急情況處理A.手部清洗消毒8B.刺傷、切割傷或擦傷應急處理：1.保持鎮靜，立即停止實驗，脫掉手套。2.用清水或肥皂水清洗傷口。3.盡量擠出傷口處的血液，取出急救箱，用碘酒或75%的酒精擦洗傷口適當的包扎。4.及時就醫，告知醫生受傷原因及可能的微生物污染，必要時要進行醫學處理。5.向實驗室安全員報告，進行事故記錄。B.刺傷、切割傷或擦傷應急處理：9C.生物安全柜內益處處理1.處理益撒物時不要將頭伸入安全柜內，也不要將臉直接面對前操作口，而應處于前視面板的后方。2.選擇消毒劑時需要考慮消毒劑對生物安全柜的腐蝕性。3.如果溢灑的量不足1ml時，可直接用消毒劑浸濕的紙巾擦拭。4.如溢灑量大或容器破碎，按操作規程消毒。5.如果溢灑物流入生物安全柜內部，則視情況，如需要可隊生物安全柜進行熏蒸。C.生物安全柜內益處處理10D.衣物污染：1.盡快脫掉最外層防護衣，并注意防止感染物質進一步擴散。2.將已污染的防護服放入黃色垃圾袋內，待高壓滅菌3.脫掉手套，到污染區出口洗手4.更換防護服和手套5.必要時對發生污染及托防護服的地方進行消毒處理6.如果內衣被污染，應立即脫掉易污染的衣物，消毒處理D.衣物污染：11E.皮膚粘膜被污染

1.感染性液體外溢到皮膚（1）立即停止工作，脫掉手套（2）用75%的酒精進行皮膚消毒（2）再用大量水沖洗

2.感染性液體濺入眼睛（1）立即停止工，脫掉手套(2)迅速到緩沖區用洗眼器沖洗（3）用生理鹽水沖洗

3.兩種情況都應做適當的預防治療和醫學觀察，并報告實驗室安全員進行事故記錄E.皮膚粘膜被污染12五、離心機內有感染性物質破裂的處理A.非封閉離心機內帶有感染性物質離心管發生破裂：

1.離心機正在運行時發生破裂或懷疑發生破裂，應關閉電源，密閉30分鐘使氣溶膠沉淀，離心機停止后發生破裂，應立即蓋上蓋子密閉30分鐘。2.帶結實的手套或口罩（避免吸入氣溶膠）3.使用鑷子清理玻璃碎片，或用鑷子夾著的棉花來清理。4.破碎的離心管及離心筒、轉軸或轉子都應放在屋腐蝕性的、對相關微生物具有殺滅作用的消毒劑內浸泡60分鐘以上。五、離心機內有感染性物質破裂的處理A.非封閉離心機內帶有感染13

B.在可封閉的離心筒內離心管發生破裂：

1.如果懷疑封閉的離心筒內有管子破裂，應在生物安全柜內打開離心筒蓋子查看。2.確有破裂時，松開離心筒蓋子，但不要打開，放入黃色垃圾袋，直接高壓滅菌。3.或者采用化學消毒法：將離心筒及內容物放到對該種微生物有效的無腐蝕性消毒劑里浸泡60分鐘以上4.離心杯在使用消毒劑浸泡后5.應再用清水洗凈后干燥6.向實驗室安全員報告7.進行事故記錄B.在可封閉的離心筒內離心管發生破裂：14C.運輸途中發生泄漏的應急操作：1.現將污染區域隔離，物管人員撤離2.穿好防護裝備3.可以用土、沙或其他不燃性物質吸收漏出物質，同事避免直接接觸4.用吸收材料覆蓋遺灑物質，從外圍向中性傾倒適當量的消毒劑，使消毒劑與溢灑物混合并作用30-60分鐘5.將污染材料置于防漏、防穿透的廢棄物溶劑中密封6.對溢出區域再次清潔并消毒，并消毒手套和防護衣7.所有處理材料和防護服都放入廢棄物溶器中密封8.向主管部門報告溢出情況和消除污染情況。出現嚴重泄漏時要向當地疾病預防疾控中心報告。C.運輸途中發生泄漏的應急操作：15六、微生物實驗室的消毒要求

1.實驗室如果發現微生物污染了實驗環境應立即停下實驗，用實驗前備好的消毒劑進行消毒處理。2.如實驗室被空氣和氣溶膠傳播的微生物污染，應立即關閉實驗室進行消毒處理。3.盛裝污染微生物實驗耗材的容器應有足量的消毒劑，用過的耗材立即侵泡在消毒劑中。4.實驗結束后應立即對實驗環境進行消毒處理，擦洗、消毒工作臺面、地面，開啟紫外線燈等照射1小時以上。生物安全3級和4級實驗室、層流實驗室應在實驗結束后繼續開啟空氣循環系統30分鐘以上。六、微生物實驗室的消毒要求165.實驗廢棄物應立即進行滅菌或消毒燈無害化處理。6.實驗人員在實驗結束后應立即清洗消毒雙手，必要時應洗澡，更衣。7.對需消毒的物品應采取徹底的消毒措施，不留死角。8.用消毒劑浸泡消毒時要保證消毒物品全部浸沒在消毒劑中。9.用消毒劑擦拭消毒時要保證所有需要消毒的表面都被均勻的擦拭到10.所有消毒方法均應保證消毒時間臨床實驗室生物安全培訓課件1711.要根據消毒對象和微生物的種類選擇合適的消毒和滅菌方法：（1）對受到細菌芽孢、真菌孢子和枝桿菌污染的物品，選用高水平消毒法或滅菌法。（2）對受到真菌、親水病毒、螺旋體、支原體、衣原體和病毒微生物污染的物品，選用中水平以上的消毒方法（3）對受到一般細菌和親脂病毒等污染的物品，可選用低水平或中水平消毒法（4）對從在較多較多有機物的物品消毒時，應加大消毒劑的使用劑量或延長消毒作用時間。（5）消毒物品上微生物污染特比嚴重時，應加大消毒藥劑的使用劑量和延長消毒作用時間。（6）選擇表面消毒方法，應考慮表面性質，光滑表面可選擇紫外線消毒器近距照射，或體液消毒劑擦拭；多孔材料表面可采用噴霧消毒法11.要根據消毒對象和微生物的種類選擇合適的消毒和滅菌方法：18八、常用消毒方法A.實驗室內空氣的消毒：1.一般可加強開窗通風，自讓通風換氣，條件許可時采用排氣扇人工機械通風，做到每小時換氣10-15次。2.紫外線燈管適用于室內空氣，無疑表面的消毒。常用的室內懸吊式紫外線燈對室內空氣消毒時安裝的數量為平均1.5W每立方米，照射時間不少于30分鐘。3.使用循環風紫外線空氣消毒器連續開機器達到使用說明書規定的時間即可起到空氣消毒作用。八、常用消毒方法A.實驗室內空氣的消毒：19B.實驗室地面物體表面消毒：

實驗室、辦公室等場所地面要濕式拖掃，禁止干拖干掃。可用0.1%過氧乙酸拖地或0.2%-0.5%過氧乙酸噴灑或拖地消毒劑的用量不少于100ml每立方米，拖把應專用，污染區和清潔區不得混用。臨床實驗室生物安全培訓課件20C.物體表面的消毒：

1.實驗臺面、桌子、椅子、凳子、床頭柜、門把手、實驗記錄夾等可用0.2%~0.5%的過氧乙酸噴灑或有效氯為1.0g/L~2.0mg/L的含氯消毒劑噴灑、擦拭，消毒作用10~15min。2.若實驗室臺面等明顯被傳染性標本污染，應立即用0.2%~0.5%的過氧乙酸噴灑或有效氯為1.0g/L~2.0g/L的汗氯消毒劑噴灑于污染表面，保持30~60min。C.物體表面的消毒：21D.一般實驗器材的消毒：1.凡直接或間接接觸臨床標本或實驗微生物的器材均應視為有傳染性，均應作消毒處理。金屬器材、玻璃器皿可用壓力蒸汽和干燥滅菌的方法使用于耐高溫、高濕的醫用器械和物品的滅菌。2.玻璃器材使用過的玻璃吸管、試管、離心管、玻片、玻璃棒、三角瓶和平皿等應立即浸入有效氯為2.0g/L的含氯消毒劑中1小時以上，消毒后用超聲波清洗的方法洗凈瀝干，使用前再進行高壓滅菌處理。D.一般實驗器材的消毒：22E.污染冰箱和冰柜的消毒處理：1.將可能污染的冰箱冰柜外表面用0.2%的過氧乙酸擦拭，作用30min。2.將冰箱冰柜放置在特制的PVC板制成的大托盤上，托盤面積大于冰箱冰柜底面積，邊沿高度為10cm，托盤內放入適量的含氯消毒粉劑，是消毒粉和化凍水混合后有效氯的含量大于1.0g/L。E.污染冰箱和冰柜的消毒處理：23F.實驗室終末消毒處理：

1.實驗室的終末消毒處理及對不耐熱、不耐濕的貴重儀器設備如顯微鏡、離心機等的處理。可用甲醛熏蒸的方法進行消毒處理，將需要消毒的實驗室內柜門，抽屜打開，污染的貴重儀器集中于1個房間內，封閉門窗。2.電磁爐加熱福爾馬林20ml每立方米，加入熏蒸12小時，福爾馬林40ml每立方米加高錳酸鉀30g每立方米，混合后熏蒸12小時。F.實驗室終末消毒處理：24謝謝大家！臨床實驗室生物安全培訓課件25臨床實驗室生物安全防護培訓臨床實驗室生物安全26一、術語和定義（1）.氣溶膠：懸浮于氣體介質中的粒徑一般為0.001~1000um的固態或液態微小粒子形成的相對穩定的分散體系。（2）.生物安全柜：具備氣流控制及高效空氣過濾裝置的操作柜，可有效降低實驗過程中產生的有害氣溶膠對操作者和環境的危害。一、術語和定義27二.實驗室生物安全防護水平分級

將實驗室生物安全防護水平分為一級、二級、三級和四級，一級防護水平最低，四級防護水平最高：A.生物安全防護水平為一級的實驗室適用于操作在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物B.生物安全防護水平為二級的實驗室適用于操作能夠引起人類或者動物疾病，一般情況下對人、動物或者環境不構成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物C.生物安全防護水平為三級的實驗室適用于操作能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物D.生物安全防護水平為四級的實驗室適用于操作能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發現或者已經宣布消滅的微生物二.實驗室生物安全防護水平分級將實驗室生物安全防護水平分為28三、臨床實驗室生物安全管理A.生物安全柜應安放在實驗室中的什么地方比較合適：1.遠離人員活動，物品流動以及可能會擾亂氣流的地方，避免放在離門口很近的地方。2.進入生物安全柜的低速率的定向氣流，極易受到干擾，包括人員走進生物安全柜所形成的氣流、打開窗戶、送風系統調整以及開關門等都可能造成影響。三、臨床實驗室生物安全管理A.生物安全柜應安放在實驗室中的什29B.生物安全柜性能檢測

1.個體防護能力

2.樣品保護能力3.交叉污染防護能力B.生物安全柜性能檢測30

C.個體防護裝備

包括：眼鏡、口罩、帽子、防護衣、手套、鞋套、聽力保護器。

31D.微生物危害評估：

1.當建設使用傳染性或有潛在傳染性材料的實驗室前，必須進行微生物危害評估。2.確定對象微生物應在那一級的生物安全防護實驗室中進行操作。3.制定相應的操作規程，實驗室管理制度和緊急事故處理方法，必須形成書面文件并嚴格遵守執行。D.微生物危害評估：32四、各類緊急情況處理A.手部清洗消毒

1.推薦使用肘動式或者自動式洗手開關2.流動水沖洗手部多次，然后用液體皂滴在手上，反復撮手，在用水徹底沖洗3.清洗完畢再用干凈的紙巾或手巾擦干4.可用75%的酒精擦手來清除雙手的輕度污染5.在沒有洗手池的地方，可以使用含酒精的“免洗”手部清潔產品代替四、各類緊急情況處理A.手部清洗消毒33B.刺傷、切割傷或擦傷應急處理：1.保持鎮靜，立即停止實驗，脫掉手套。2.用清水或肥皂水清洗傷口。3.盡量擠出傷口處的血液，取出急救箱，用碘酒或75%的酒精擦洗傷口適當的包扎。4.及時就醫，告知醫生受傷原因及可能的微生物污染，必要時要進行醫學處理。5.向實驗室安全員報告，進行事故記錄。B.刺傷、切割傷或擦傷應急處理：34C.生物安全柜內益處處理1.處理益撒物時不要將頭伸入安全柜內，也不要將臉直接面對前操作口，而應處于前視面板的后方。2.選擇消毒劑時需要考慮消毒劑對生物安全柜的腐蝕性。3.如果溢灑的量不足1ml時，可直接用消毒劑浸濕的紙巾擦拭。4.如溢灑量大或容器破碎，按操作規程消毒。5.如果溢灑物流入生物安全柜內部，則視情況，如需要可隊生物安全柜進行熏蒸。C.生物安全柜內益處處理35D.衣物污染：1.盡快脫掉最外層防護衣，并注意防止感染物質進一步擴散。2.將已污染的防護服放入黃色垃圾袋內，待高壓滅菌3.脫掉手套，到污染區出口洗手4.更換防護服和手套5.必要時對發生污染及托防護服的地方進行消毒處理6.如果內衣被污染，應立即脫掉易污染的衣物，消毒處理D.衣物污染：36E.皮膚粘膜被污染

1.感染性液體外溢到皮膚（1）立即停止工作，脫掉手套（2）用75%的酒精進行皮膚消毒（2）再用大量水沖洗

2.感染性液體濺入眼睛（1）立即停止工，脫掉手套(2)迅速到緩沖區用洗眼器沖洗（3）用生理鹽水沖洗

3.兩種情況都應做適當的預防治療和醫學觀察，并報告實驗室安全員進行事故記錄E.皮膚粘膜被污染37五、離心機內有感染性物質破裂的處理A.非封閉離心機內帶有感染性物質離心管發生破裂：

1.離心機正在運行時發生破裂或懷疑發生破裂，應關閉電源，密閉30分鐘使氣溶膠沉淀，離心機停止后發生破裂，應立即蓋上蓋子密閉30分鐘。2.帶結實的手套或口罩（避免吸入氣溶膠）3.使用鑷子清理玻璃碎片，或用鑷子夾著的棉花來清理。4.破碎的離心管及離心筒、轉軸或轉子都應放在屋腐蝕性的、對相關微生物具有殺滅作用的消毒劑內浸泡60分鐘以上。五、離心機內有感染性物質破裂的處理A.非封閉離心機內帶有感染38

B.在可封閉的離心筒內離心管發生破裂：

1.如果懷疑封閉的離心筒內有管子破裂，應在生物安全柜內打開離心筒蓋子查看。2.確有破裂時，松開離心筒蓋子，但不要打開，放入黃色垃圾袋，直接高壓滅菌。3.或者采用化學消毒法：將離心筒及內容物放到對該種微生物有效的無腐蝕性消毒劑里浸泡60分鐘以上4.離心杯在使用消毒劑浸泡后5.應再用清水洗凈后干燥6.向實驗室安全員報告7.進行事故記錄B.在可封閉的離心筒內離心管發生破裂：39C.運輸途中發生泄漏的應急操作：1.現將污染區域隔離，物管人員撤離2.穿好防護裝備3.可以用土、沙或其他不燃性物質吸收漏出物質，同事避免直接接觸4.用吸收材料覆蓋遺灑物質，從外圍向中性傾倒適當量的消毒劑，使消毒劑與溢灑物混合并作用30-60分鐘5.將污染材料置于防漏、防穿透的廢棄物溶劑中密封6.對溢出區域再次清潔并消毒，并消毒手套和防護衣7.所有處理材料和防護服都放入廢棄物溶器中密封8.向主管部門報告溢出情況和消除污染情況。出現嚴重泄漏時要向當地疾病預防疾控中心報告。C.運輸途中發生泄漏的應急操作：40六、微生物實驗室的消毒要求

1.實驗室如果發現微生物污染了實驗環境應立即停下實驗，用實驗前備好的消毒劑進行消毒處理。2.如實驗室被空氣和氣溶膠傳播的微生物污染，應立即關閉實驗室進行消毒處理。3.盛裝污染微生物實驗耗材的容器應有足量的消毒劑，用過的耗材立即侵泡在消毒劑中。4.實驗結束后應立即對實驗環境進行消毒處理，擦洗、消毒工作臺面、地面，開啟紫外線燈等照射1小時以上。生物安全3級和4級實驗室、層流實驗室應在實驗結束后繼續開啟空氣循環系統30分鐘以上。六、微生物實驗室的消毒要求415.實驗廢棄物應立即進行滅菌或消毒燈無害化處理。6.實驗人員在實驗結束后應立即清洗消毒雙手，必要時應洗澡，更衣。7.對需消毒的物品應采取徹底的消毒措施，不留死角。8.用消毒劑浸泡消毒時要保證消毒物品全部浸沒在消毒劑中。9.用消毒劑擦拭消毒時要保證所有需要消毒的表面都被均勻的擦拭到10.所有消毒方法均應保證消毒時間臨床實驗室生物安全培訓課件4211.要根據消毒對象和微生物的種類選擇合適的消毒和滅菌方法：（1）對受到細菌芽孢、真菌孢子和枝桿菌污染的物品，選用高水平消毒法或滅菌法。（2）對受到真菌、親水病毒、螺旋體、支原體、衣原體和病毒微生物污染的物品，選用中水平以上的消毒方法（3）對受到一般細菌和親脂病毒等污染的物品，可選用低水平或中水平消毒法（4）對從在較多較多有機物的物品消毒時，應加大消毒劑的使用劑量或延長消毒作用時間。（5）消毒物品上微生物污染特比嚴重時，應加大消毒藥劑的使用劑量和延長消毒作用時間。（6）選擇表面消毒方法，應考慮表面性質，光滑表面可選擇紫外線消毒器近距照射，或體液消毒劑擦拭；多孔材料表面可采用噴霧消毒法11.要根據消毒對象和微生物的種類選擇合適的消毒和滅菌方法：43八、常用消毒方法A.實驗室內空氣的消毒：1.一般可加強開窗通風，自讓通風換氣，條件許可時采用排氣扇人工機械通風，做到每小時換氣10-15次。2.紫外線燈管適用于室內空氣，無疑表面的消毒。常用的室內懸吊式紫外線燈對室內空氣消毒時安裝的數量為平均1.5W每立方米，照射時間不少于30分鐘。3.使用循環風紫外線空氣消毒器連續開機器達到使用說明書規定的時間即可起到空氣消毒作用。八、常用消毒方法A.實驗室內空氣的消毒：44B.實驗室地面物體表面消毒：