關于免疫球蛋白檢測第一頁，共五十五頁，2022年，8月28日概念免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）：是由漿細胞合成和

分泌的一組具有抗體活性、化學結構與抗體相似的蛋白質Ig主要存在于血液中，約占血漿蛋白總量的20%，也可存

在于尿液，腦脊液等體液及外分泌液中Ig含量：血清IgG、IgA、IgM：g/L，IgD、IgE：mg/L

體液IgG、IgA、IgM：mg/L檢測意義：反應機體的免疫功能、免疫缺陷病、自身免疫病、免疫增殖性疾病的診斷和治療第二頁，共五十五頁，2022年，8月28日一、免疫球蛋白的異質性（一）免疫球蛋白的類型（二）免疫球蛋白的多樣性（三）免疫球蛋白的血清型二、免疫球蛋白的功能第一節免疫球蛋白的生物學功能第三頁，共五十五頁，2022年，8月28日免疫球蛋白的基本結構

四肽鏈分子，即由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈通過鏈間二硫鍵連接而成的免疫球蛋白單體，呈“Y”字形。第四頁，共五十五頁，2022年，8月28日可變區和恒定區：氨基酸序列變化第五頁，共五十五頁，2022年，8月28日可變區（variableregion，V區）：位于免疫球蛋白分子N端的氨基酸組成和排列有較大差異（占輕鏈1/2和重鏈1/4或1/5），決定抗體與抗原結合的特異性。恒定區（constantregion，C區)：位于免疫球蛋白分子的C端的氨基酸組成和排列比較恒定（占輕鏈1/2和重鏈3/4或4/5），介導免疫球蛋白多種生物學功能。鉸鏈區：位于CH1和CH2之間，含豐富的脯氨酸，易伸展彎曲，有利于免疫球蛋白V區與抗原互補性結合，有利于暴露補體結合位點；連接免疫球蛋白Fab段和Fc段，易被木瓜蛋白酶和胃蛋白酶水解。第六頁，共五十五頁，2022年，8月28日高變區（hypervariableregion,HVR）：在VL和VH中各有三個區域的氨基酸組成和排列順序特別易變化，分別用HVR1，HVR2，HVR3表示。互補決定區（complementarity-determiningregion,CDR）：高變區是抗體與抗原（表位）特異性結合的位置，所以又稱為CDR。高變區=互補決定區骨架區（frameworkregion,FR）：V區中非HVR部位的氨基酸組成和排列相對保守，此為FR。VH和VL各有4個FR。第七頁，共五十五頁，2022年，8月28日本文由探生科技技術人員提供,Fantibody全球抗體搜索引擎，您身邊的抗體專家!恒定區可變區高變區骨架區第八頁，共五十五頁，2022年，8月28日本文由探生科技技術人員提供,Fantibody全球抗體搜索引擎，您身邊的抗體專家!第九頁，共五十五頁，2022年，8月28日類（class）：根據CH不同Ig分5類：

IgG(γ)、IgA(α)、IgM(μ)、IgD(δ)、IgE(ε)

亞類：IgG1-G4；IgA1-A2；IgM1-M2。型（type）：根據CL不同Ig分為兩個型：

κ型和λ型

亞型：λ型有λ1、λ2、λ3、λ4四個亞型

一、免疫球蛋白的異質性

（一）免疫球蛋白的類型第十頁，共五十五頁，2022年，8月28日第十一頁，共五十五頁，2022年，8月28日（二）免疫球蛋白的多樣性第十二頁，共五十五頁，2022年，8月28日多樣性抗原的存在是導致免疫球蛋白異質性（即特異性）的外源因素，是免疫球蛋白異質性的物質基礎。抗體的這種異質性，反應機體對抗原精細結構的識別和應答。第十三頁，共五十五頁，2022年，8月28日（三）免疫球蛋白的血清型——內源性因素所致免疫球蛋白異質性免疫球蛋白既可與相應的抗原發生特異性結合，本身又可作為抗原，激發機體產生特異性免疫應答。免疫球蛋白有3種不同的血清型(1)同種型(2)同種異型(3)獨特型第十四頁，共五十五頁，2022年，8月28日免疫球蛋白的雙重身份第十五頁，共五十五頁，2022年，8月28日同種型（isotype）指同一種屬所有個體的免疫球蛋白分子共有的抗原特異性標志，位于免疫球蛋白C區。為種屬標志（顏色不一樣）第十六頁，共五十五頁，2022年，8月28日同種異型（allotype）指同一種屬但不同個體來源的免疫球蛋白C區分子所具有的不同的抗原特異性標志。為個體標志

（花紋不一樣）第十七頁，共五十五頁，2022年，8月28日獨特型（idiotype）

即使是同一種屬、同一個體來源的免疫球蛋白分子，其免疫原性亦不盡相同，稱為獨特型，其決定簇又稱為獨特位，主要存在于免疫球蛋白V區。第十八頁，共五十五頁，2022年，8月28日第十九頁，共五十五頁，2022年，8月28日二、免疫球蛋白的功能免疫球蛋白V區的功能：特異性識別結合抗原（主要功能）

抗原結合價：免疫球蛋白結合抗原表位的個數

單體免疫球蛋白可結合2個抗原表位，為雙價；分泌型IgA為4價五聚體IgM由于立體構型的空間位阻，一般只能結合五個抗原表位，為5價

第二十頁，共五十五頁，2022年，8月28日免疫球蛋白的V區特異性識別結合抗原后，在體內可結合病原微生物及其產物，發揮以下作用：（1）中和毒素

（2）阻斷病原體入侵

（3）清除病原微生物（4）構成B細胞的抗原識別受體AgAb特異性識別結合抗原第二十一頁，共五十五頁，2022年，8月28日本文由探生科技技術人員提供,Fantibody全球抗體搜索引擎，您身邊的抗體專家!中和毒素第二十二頁，共五十五頁，2022年，8月28日本文由探生科技技術人員提供,Fantibody全球抗體搜索引擎，您身邊的抗體專家!阻止病毒入侵第二十三頁，共五十五頁，2022年，8月28日本文由探生科技技術人員提供,Fantibody全球抗體搜索引擎，您身邊的抗體專家!阻止細菌入侵第二十四頁，共五十五頁，2022年，8月28日免疫球蛋白C區的功能：（1）激活補體

IgM、IgG1~3激活補體經典途徑

凝聚的IgA或IgG4激活補體旁路途徑（2）細胞親嗜性(與細胞表面FcR結合)①調理作用（opsonization)；IgFc段與吞噬細胞表面FcR結合促吞噬；②抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用（Ab-dependentcell-mediatedcytotoxicity,ADCC)③介導I型超敏反應（3）IgG穿過胎盤——被動免疫、（4）sIgA通過呼吸道和消化道粘膜——粘膜局部免疫第二十五頁，共五十五頁，2022年，8月28日第二十六頁，共五十五頁，2022年，8月28日抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用第二十七頁，共五十五頁，2022年，8月28日第二十八頁，共五十五頁，2022年，8月28日IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是血液和細胞外液中的主要抗體，也是機體再次免疫的主要抗體。出生后3個月開始合成，3-5歲接近成人水平，是唯一能通過胎盤的Ig

IgM為五聚體，是分子量最大的免疫球蛋白，稱為巨球蛋白（macroglobulin）；是個體發育過程中最早合成和分泌的抗體，也是抗原刺激誘導的體液免疫應答中最早出現的抗體；主要存在于血液中，是血管內抗感染的主要抗體。各類免疫球蛋白的特性和功能第二十九頁，共五十五頁，2022年，8月28日各類免疫球蛋白的特性和功能IgA分為血清型和分泌型，是參與黏膜局部免疫的主要抗體，主要存在于胃腸道和支氣管分泌液、初乳、唾液和淚液中。初乳中的sIgA可對嬰幼兒發揮自然被動免疫作用正常人血清中IgD含量很低，膜結合型IgD(mIgD)構成BCR，是B細胞分化發育成熟的標志。

IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴組織中的漿細胞分泌，為親細胞抗體，引起I型超敏反應；與機體抗寄生蟲免疫也可能有關。第三十頁，共五十五頁，2022年，8月28日單克隆抗體和多克隆抗體多克隆抗體（polyclonalantibody）：用含多種抗原決定簇的抗原物質免疫動物，刺激多個B細胞克隆所獲得的免疫血清（含多種抗體的混合物），此為多克隆抗體。

來源廣泛，制備容易；特異性不高。單克隆抗體（monoclonalantibody,mAb）由一個識別一種抗原表位的B細胞克隆產生的同源抗體

純度高、特異性強、可大量生產。第三十一頁，共五十五頁，2022年，8月28日第二節IgG、IgA、IgM測定方法及臨床意義一、血液IgG、IgA、IgM測定方法及臨床意義二、血液IgG亞類測定方法及臨床意義三、尿液免疫球蛋白測定方法及臨床意義四、腦脊液免疫球蛋白測定方法及臨床意義第三十二頁，共五十五頁，2022年，8月28日（一）、測定方法單向免疫擴散試驗

（凝膠內免疫沉淀反應）酶聯免疫吸附試驗（ELISA）：時間長、批量檢測放射免疫試驗（RIA）：放射性核素污染免疫透射比濁試驗（液相免疫沉淀反應）免疫散射比濁試驗（液相免疫沉淀反應）免疫固定電泳（IFE）：M蛋白測定一、血液IgG、IgA、IgM測定方法及臨床意義第三十三頁，共五十五頁，2022年，8月28日

優點：操作簡便、不需特殊耗材缺點：耗時長、靈敏度低、免疫球蛋白分子量大、沉淀

環不明顯、導致結果不準確，臨床應用少單向免疫擴散試驗第三十四頁，共五十五頁，2022年，8月28日免疫比濁試驗原理：第六章免疫沉淀試驗和第十四章免疫濁度測定的自動化分析常見分類：透射免疫比濁試驗：臨床基層單位使用散射免疫比濁試驗（BNP特種蛋白儀)

評價：散射免疫比濁試驗具有檢測范圍寬、時間短、

測定結果準確、精密度高、敏感性高、穩定

性好等優點，臨床應用廣泛。第三十五頁，共五十五頁，2022年，8月28日（二）、臨床意義1、年齡第三十六頁，共五十五頁，2022年，8月28日2、高Ig血癥：

1）多克隆高Ig血癥（

IgG、IgA、IgM均升高）；

eg：肝臟疾病，三種均升高

慢性細菌感染，

IgG升高

宮內感染臍血或新生兒，

IgM升高

自身免疫性疾病，三種均升高；SLE、RF

2）單克隆Ig升高（單一Ig升高）

單克隆蛋白即M蛋白，主要是指患者血清中某一類免疫球蛋

白含量顯著增多，大多在30g/L以上，這種異常增多的免疫

球蛋白理化性質十分均一。又稱副蛋白（無免疫活性）

eg：免疫增殖病第三十七頁，共五十五頁，2022年，8月28日3、低Ig血癥：

1）先天性低Ig血癥（體液免疫缺陷病和聯合免疫缺陷病）

aIg全缺：Bruton型無Ig血癥

b缺一種或缺兩種Ig：缺IgA，反復呼吸道感染缺IgM，革蘭陰性細菌敗血癥缺IgG，化膿性感染

2）獲得性低Ig血癥：大量蛋白丟失（IgG<5g/L)淋巴系統腫瘤重癥傳染病感染性疾病長期使用免疫抑制劑第三十八頁，共五十五頁，2022年，8月28日Ig亞類：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，其含量依次下降（一）、測定方法：

單向免疫擴散試驗：靈敏度低、檢測時間長酶聯免疫吸附試驗：抗原特異性較差、檢測時間長免疫散射比濁試驗：檢測速度快、靈敏度高、準確性好、自動化程度高、應用廣泛二、血液IgG亞類測定方法及臨床意義第三十九頁，共五十五頁，2022年，8月28日（二）臨床意義：

1、

IgG亞類的含量隨年齡的不同而變化（下表）第四十頁，共五十五頁，2022年，8月28日臨床意義：

2、

IgG亞類缺陷：

定義：當某一IgG亞類含量低于年齡對應的參考值區間時

表現：呼吸道感染、腹瀉、中耳炎、支氣管擴張及哮喘等

男女比例：兒童期3:1,IgG2缺陷常見；成人4;2IgG1、

IgG3缺陷常見

典型病例：IgA缺乏癥、病毒感染、腎病綜合癥、糖尿病

（注：有些患者IgG亞類異常，但總IgG正常甚至偏高，因此測定IgG亞類更有價值）

3、

IgG亞類異常增高：I型變態反應第四十一頁，共五十五頁，2022年，8月28日臨床意義：

4、

IgG4相關性疾病：

1）定義：是一組以血清IgG4水平升高、受累組織IgG4陽性漿細胞浸潤及纖維化為特征的疾病；

2）該病累及全身多個組織器官，受累器官出現相應的壓迫癥狀和功能障礙，其中胰腺、淚腺、涎腺的受累最為常見；

3）類風濕關節炎、系統性紅斑狼瘡：IgG4自身抗體、IgG4陽性漿細胞浸潤。

第四十二頁，共五十五頁，2022年，8月28日三、尿液免疫球蛋白測定方法及臨床意義（一）、測定方法單向免疫擴散試驗：靈敏度低、檢測時間長酶聯免疫吸附試驗：抗原特異性較差、檢測時間長免疫散射比濁試驗：檢測速度快、靈敏度高、準確性好、自動化程度高、應用廣泛第四十三頁，共五十五頁，2022年，8月28日

（二）、臨床意義：1、免疫球蛋白的檢測選擇性蛋白尿指數（SPI)：

評價腎小球濾膜受損程度及觀察治療效果和預后的指標通過測定尿液及血液中轉鐵蛋白（TF）及IgG的含量計算計算公式：

SPI=（尿IgG/血清IgG）/（尿TRF/血清TRF)SPI≤0.1腎臟高選擇性排泌分子量較小的蛋白質

微小病變型腎病

SPI≥0.2腎臟非選擇性排泌分子量較大的蛋白質膜性腎病、膜增殖性腎炎、腎病綜合征第四十四頁，共五十五頁，2022年，8月28日

根據尿內Ig增高的類型幫助鑒別診斷腎小球疾病的種類原發性腎小球腎炎慢性腎炎慢性腎炎高血壓型及普通型隱匿性腎炎急性腎炎IgA最高最高輕度增高很少IgG較高較高輕度增高輕度增高IgM甚微出現甚微甚微2、游離輕鏈的檢測用于診斷輕鏈病多發性骨髓瘤等疾病的分型鑒定及預后判斷第四十五頁，共五十五頁，2022年，8月28日四、腦脊液免疫球蛋白測定及臨床意義（一）測定方法免疫散射比濁試驗：腦脊液免疫球蛋白含量低，靈敏度高血腦屏障（BBB)：是指腦毛細血管壁與神經膠質細胞形成的血漿與腦細胞之間的屏障和由脈絡叢形成的血漿和腦脊液之間的屏障。生理情況下，腦脊液（CSF）中免疫球蛋白的含量：IgG>IgA>IgM第四十六頁，共五十五頁，2022年，8月28日（二）、臨床意義腦脊液免疫球蛋白含量的測定有助于神經系統疾病的診斷、療效觀察、預后判斷。通過測定CSF和血液中的白蛋白計算以下臨床指標：白蛋白商值（QAlb）=（Albcsf/Albs)×1000（1）監測血腦屏障損傷的程度（2）提示神經系統發生疾病的類型IgG生成指數=（

IgGcsf×Albs）/（

IgGs×Albcsf）

區分鞘內免疫球蛋白的來源：鞘內合成，

通過BBB進入鞘內

第四十七頁，共五十五頁，2022年，8月28日第三節血液IgE和IgD測定方法及臨床意義一、

血液IgE測定方法及臨床意義包括總IgE（tIgE）和特異IgE（sIgE）測定方法：

酶聯免疫吸附法（ELISA）熒光酶免疫試驗(FEIA)化學發光免疫試驗(CLIA)臨床意義

1、IgE升高：I型變態反應性疾病

嬰兒寄生蟲感染非變態反應性疾病：病毒感染、自身免疫性疾病等。

第四十八頁，共五十五頁，2022年，8月28日臨床意義

2、IgE降低：原發性無丙種球蛋白血癥腫瘤及化療藥物應用后3、影響IgE水平的因素年齡性別種族第四十九頁，共五十五頁，2022年，8月28日二、

IgD測定方法及臨床意義測定方法：放射免疫分析法乳膠顆粒免疫比濁分析法酶聯免疫吸附法臨床意義

IgD升高：妊娠末期、

IgD型骨髓瘤、

甲狀腺炎、

大量吸煙者

IgD降低：原發性無丙種球蛋白血癥肺硅沉著病

細胞毒藥物治療后第五十頁，共五十五頁，2022年，8月28日第四節冷球蛋白測定及臨床意義冷球蛋白（CG)，又稱冷免疫球蛋白，是血清中的一種病理性蛋白質