細菌不死的“靈魂”——淺談細菌內毒素1主要內容細菌內毒素的檢測2細菌內毒素的簡介31細菌內毒素的去除332細菌內毒素的簡介當消過毒的溶液或物體如針狀的注射器插入無發熱癥狀的病人體內一會可能就引起病人冷感、寒戰、發熱、頭痛、惡心、嘔吐、膚色灰白、休克、嚴重時導致死亡。這樣的事例屢見不鮮，即使這些溶液和器具都經過消毒......3熱原什么是熱原？廣義上說，微量即能引起恒溫動物體溫異常上升的物質，統稱為熱原。廣義的熱原也包括外因性熱原(細菌性熱原、化學熱原)和內因性熱原。而狹義的熱原即內毒素。在臨床上，當受熱原污染的注射劑從靜脈注入人體時，患者常在0.5h～1h內發冷，繼而出現寒顫、發熱、出汗、嘔吐等不適癥狀，有時體溫升高可至40℃以上，嚴重者甚至休克死亡，這種現象稱之為“熱原反應”5細菌內毒素的簡介內毒素（Endotoxin）外毒素（Exotoxin）細菌毒素6外毒素與內毒素的對比區別外毒素內毒素來源G+菌與部分G-G-菌存在部位分泌到菌外，少數是崩解釋出細胞壁組分，菌裂解后釋出化學成分蛋白質脂多糖穩定性60～80℃，30分鐘

160℃，2～4小時

作用方式與受體結合刺激細胞分泌細胞因子、血管活性物質毒性作用強，對組織器官有選擇性，引起特殊臨床表現較弱，引起發熱、白細胞增多、微循環障礙、休克、DIC等抗原性強，刺激機體產生抗毒素；脫毒形成類毒素弱，抗體作用弱7細菌內毒素的簡介內毒素的概念細菌內毒素，英文稱作Endotoxin，是G-菌細胞壁個層上的特有結構，內毒素為外源性致熱原，它可激活中性粒細胞等，使之釋放出一種內源性熱原質，作用于體溫調節中樞引起發熱。內毒素的主要化學成分為脂多糖中的類脂A8內毒素endotoxinG-菌中內毒素位置10細菌內毒素的簡介危害：

內毒素能夠直接作用于人體，激活組織內的炎性細胞和炎癥因子，導致機體發熱并產生全身性炎癥反應，繼而引起彌散性血管內凝血、休克、多臟器功能衰竭等嚴重的病理生理癥狀，危及生命。12細菌內毒素在人體引起的癥狀發熱反應

人體對細菌內毒素極為敏感。極微量（1-5納克/公斤體重）內毒素就能引起體溫上升，發熱反應持續約4小時后逐漸消退。自然感染時，因革蘭氏陰性菌不斷生長繁殖，同時伴有陸續死亡、釋出內毒素，故發熱反應將持續至體內病原菌完全消滅為止。內毒素引起發熱反應的原因是內毒素作用于體內的巨噬細胞等，使之產生白細胞介素1、6和腫瘤壞死因子α等細胞因子，這些細胞因子作用于宿主下丘腦的體溫調節中樞，促使體溫升高發熱。14白細胞反應

由于絕大多數被革蘭氏陰性菌感染的患者血流中白細胞總數都會增加，所以現在醫生在診斷前，為了初步區別是細菌性感染還是病毒性感染，常常要化驗病人的血液，對白細胞進行總數測定和分類計數。被病毒感染的病人，其白細胞總數和中性粒細胞百分比基本在正常值范圍內。15糖代謝紊亂

先發生高血糖，轉而為低血糖，大量糖元消耗，可能與腎上腺素大量分泌有關。血管舒縮機能紊亂

內毒素激活了血管活性物質（5-羥色胺、激肽釋放酶與激肽）的釋放。末梢血管擴張，通透性增高，靜脈回流減少，心臟輸出量減低，導致低血壓并可發生休克。因重要器官（腎、心、肝、肺與腦）供血不足而缺氧，有機酸積聚而導致代謝性酸中毒。

此外，內毒素還能引起早期粒細胞減少血癥，以后繼發粒細胞增多血癥等。16二.內毒素的檢測方法原理器具的處理供試品內毒素的檢測內毒素的檢測方法細菌內毒素檢查包括：

限量實驗凝膠法半定量實驗可使用其中任何一種方法進行試驗。當測定結果有爭議時，除另有規定外，以凝膠法結果為準。

濁度法動態濁度法光度測定法終點濁度法顯色基質法動態顯色法終點顯色法

內毒素檢查方法18堅實凝膠陽性“+”內毒素凝膠法檢測原理20未形成凝膠凝膠不堅實陰性“—”內毒素凝膠法檢測原理21供試品細菌內毒素檢查陽性對照溶液的制備用檢查用水將內毒素標準品稀釋制成2λ濃度的內毒素標準溶液。供試品陽性對照溶液的制備用待檢測的供試品溶液或其稀釋液將內毒素標準品制成2λ濃度的內毒素溶液。陰性對照即細菌內毒素檢查用水。鱟試劑的準備取規格為0.1ml/支的鱟試劑8支，每支加入0.1ml檢查用水使溶解備用。加樣

8支管中2支加入0.ml供試品溶液或其稀釋液作為供試品管，2支加入0.1ml陽性對照溶液作為陽性對照管，2支加入0.1ml檢查用水作為陰性對照管,2支加入0.1ml供試品陽性對照溶液作為供試品陽性對照管。將試管中溶液輕輕混勻后，用封口膜封閉管口，垂直放入37℃±1℃水浴或適宜恒溫器中，保溫60±2分鐘。23供試品細菌內毒素檢查結果判斷當陽性對照都為陽性、供試品陽性對照都為陽性且陰性對照都為陰性時，實驗方有效。

24細菌內毒素的去除離子交換色譜法活性炭吸附法親和色譜法內毒素的去除250℃干烤1h以上相分離法微孔濾膜法化學降解法26結束