引陽素膠囊中淫羊藿苷的含量測定【關鍵詞】淫羊藿苷；引陽素膠囊；高效液相色譜摘要：目的建立引陽素膠囊中淫羊藿苷的高效液相色譜(HPL)含量測定方法。方法采用HPL法。色譜柱Lihrspher18(4.6×250，5μ)，18保護柱；流動相為乙腈20g/L冰醋酸水溶液(30∶70)；檢測波長270n；流速1.0L/in；柱溫為室溫；進樣量10μL。樣品加50%(體積分數)乙醇超聲提取，浸提液過0.45μ濾膜后測定。結果淫羊藿苷線性范圍為10.0-60.0g/L，回歸方程為=2.042×10-5A+0.554，r=0.9993，平均回收率為99.8%，RSD為0.65%。結論本法用于引陽素膠囊中淫羊藿苷的含量測定時簡便快捷、準確。關鍵詞：淫羊藿苷；引陽素膠囊；高效液相色譜DeterinatinfiariininYinyangsuapsulesbyHPLABSTRAT:bjetiveTestablishanHPLethdfrtestingthententfiariininYinyangsuapsules.ethdsAnLihrspher18(4.6×250,5μ)asusedasthelun,andlun18astheprtetinglun.Thebilephaseasaixturefaetnitrile-20g/Laetu(30∶70)inaflratef1.0L/in.Thedetetedavelengthas270n.lunteperatureasrteperatureandtheinjetinquantityas10μL.Thesapleaspreparedheneadded50%(V/V)alhlandthenadeultrasniextratin.easureentasadeafterthepreparedsapleasfiltratedn0.45μfilterpaper.ResultsIariininthesapleasellseparated.Thelinearrangeas10.0-60.0g/L.Thelinearequatinas=2.042×10-5A+0.554,hiletherrelatineffiientas0.9993;theaveragereveryas99.8%andRSDas0.65%(n=6).nlusinThisethdanbeusedinntenteasureentfYinyangsuapsules.KEYRDS:iariin;Yinyangsuapsule;HPL引陽素膠囊處方由淫羊藿浸膏和五味子浸膏等組成。具有補腎、壯陽、生津的作用。用于陽萎早泄、腰膝酸軟、津虧自汗、頭目眩暈等癥。方中淫羊藿的有效成分是淫羊藿苷。為了有效控制藥品質量,對制劑中的主要成分淫羊藿苷進展含量測定。1材料1.1儀器與試藥日本島津L10AT高效液相色譜輸液泵，SPD10AVP紫外可見檢測儀，島津7725i進樣品，ANASTAR色譜工作站，DL360超聲波清洗器(浙江象山縣石浦海天電子儀器廠，功率240，頻率35kHz)，乙腈為色譜純，水為雙蒸水，其他試劑為分析純。淫羊藿苷對照品由中國藥品生物制品鑒定所提供，批號110737202212，供含量測定用。引陽素膠囊由西安阿房宮制藥提供，批號2022050120220503。1.2標準溶液的配制精細稱取淫羊藿苷對照品，用甲醇溶解并制成每L含淫羊藿苷0.10g的對照品溶液，備用。1.3樣品溶液的制備取試品內容物研細，取0.1g，精細稱取，置具塞三角瓶中，加50%(體積分數)乙醇50L，稱其質量，超聲提取20in，放冷，再稱其質量，用50%(體積分數)乙醇補足減失的質量，搖勻，用0.45μ濾膜濾過，取續濾液測定。1.4陰性對照溶液的制備依處方工藝制成不含淫羊藿藥材的膠囊，再按1.3方法制成陰性樣品溶液。2方法與結果2.1色譜條件色譜柱Lihrspher18(4.6×250，5μ)，18保護柱；流動相：乙腈20g/L冰醋酸水溶液(30∶70)，使用前經0.45μ微孔濾膜過濾并脫氣；檢測波長270n；流速1.0L/in；柱溫為室溫；進樣量10μL。在此條件下，對照品、供試品及陰性樣品溶液的色譜圖見圖1。圖1引陽素膠囊的HPL色譜圖〔略〕Fig.1HPLgraphsfiariininYinyangsuapsulesa:standard;b:saple;:blank;1:iariin2.2線性關系的考察精細汲取對照品溶液，加50%(體積分數)乙醇制成每L分別含10、20、30、40、50、60μg的對照品溶液，混勻，分別進樣10μL，測定，記錄淫陽藿苷峰面積。以峰面積A對對照品的濃度(g/L)作圖，進展回歸分析，得回歸方程為：=2.042×10-5A+0.554，r=0.9993。可見，淫羊藿苷濃度在10-60g/L范圍內與峰面積呈線性關系。2.3樣品溶液的制備方法實驗采用正交實驗法對樣品浸提體積A(L)、超聲時間B(in)等影響因素進展了考察。因素程度：A1=25、A2=50、A3=75；B1=10、B2=20、B3=40。浸提方法與結果：將同批號樣品研細，精細稱取0.2000g于100L具塞三角瓶中，分別按L9(34)正交表進展試驗，制得樣品后再用50%(體積分數)乙醇稀釋使最后的提取液體積均為75L，按2.1測定，用統計軟件SPSS11.0對淫陽藿苷峰面積進展分析處理(表1-表3)。表1淫羊霍苷的不同浸提方法的正交試驗L9(34)結果〔略〕Table1rthgnalexperientresultsflixiviatinfriariin表2淫羊霍苷的不同浸提方法的多因素方差分析〔略〕Table2ultiplefatrvarianeanalysisflixiviatinfriariin表3不同超聲時間淫羊藿苷峰面積的方差分析表〔略〕Table3ultipleparisnfdifferentultrasniextratingties上述實驗結果說明，因素A對實驗結果無顯著性影響(P0.05)，因素B有顯著性影響(P0.01)；B1與B2、B3之間有顯著性差異(P0.01)，B2、B3之間無顯著性差異(P0.05)。考慮到實驗操作的便易程度等因素，樣品最正確浸提工藝為A2B2(見1.3項下)。2.4精細度試驗按1.3項下制備一份樣品，重復進樣5次，每次10μL，按2.1色譜條件測定峰面積，結果峰面積積分值RSD1%,說明精細度良好。2.5穩定性試驗按1.3項下制備一份樣品，分別于0、2、4、8、24h精細汲取10μL，按2.1色譜條件測定，記錄峰面積積分值，結果峰面積積分值RSD1%，說明供試品溶液在24h內穩定。2.6重復性試驗取同批樣品5份，依上法測定，含量測定結果RSD1%。2.7回收率試驗采用加標回收法，取含量的同批樣品數粒，倒出內容物，研缽中研細，精細稱量6份，分別精細參加淫羊霍苷對照品，依上法測定。結果淫羊霍苷回收率平均值為99.8%，RSD為0.65%，說明回收率良好。2.8樣品測定按上法分別測定不同消費批號的三批樣品，結果三批樣品含淫羊藿苷的量在7.562-16.345g/g之間。3結論淫羊藿苷可溶于甲醇、乙醇、稀乙醇、正丁醇，微溶于水。其提取方法有用甲醇超聲提取溶出后，先以氯仿、氨水除去色素等雜質，再用正丁醇提取，殘渣以10%(體積分數)乙醇溶解，用大孔樹脂柱再次純化后測定[1]。也有直接參加70%(體積分數)甲醇，超聲處理30in后測定的報道[2]。本文采用相關文獻[34]的提取方法，樣品加50%(體積分數)乙醇超聲提取，浸提液過0.45μ濾膜后測定，并采用正交試驗L9(34)對樣品的浸提方法進展了研究，結果樣品加50%(體積分數)乙醇50L，超聲提取20in，取續濾液測定效果較佳。色譜流動相有乙腈水(以磷酸調pH值)(30∶70)[12]、直接乙腈水(30∶70)[3]及乙腈20g/L乙酸水(30∶70)[4]系統，本文采用乙腈20g/L乙酸水(30∶70)作為流動相，別離度及理論塔板數均到達了要求。參考文獻：[1]盧日剛,唐敏玲，韋向紅，等.HPL測定腎寶康片中淫羊藿苷的含量[J].中成藥,2022,26(2):167169.