1、11810456001V18三碘甲狀腺原氨酸（Triiodothyronine，T3） Elecsys 和 cobas e 分析儀 5/5 2009-04, V 18 11731360 122 200測試本試劑盒適用的分析儀Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途用于體外定量檢測人體血清或血漿中的總T3。Elecsys和cobas e 免疫分析儀的工作原理是電化學發光免疫分析“ECLIA”。臨床應用三碘甲狀腺原氨酸（T3）是一種作用于各種靶器官的主要甲狀腺激素。T3（3、5、3-三碘酪氨酸）

2、主要是在肝臟內由T4經酶解脫去5位的碘而生成。因此，血清中T3的濃度更能反映出外周組織的功能狀態，而非甲狀腺的分泌功能。由T4向T3的轉化減少會導致T3濃度的下降，可見于一些藥物的影響（如丙醇、糖皮質類固醇、胺碘酮）以及重癥非甲狀腺疾病（NTI），也被稱為T3低下綜合征。與T4一樣，99%以上的T3與運輸蛋白結合，但親和力要低10倍左右。1，2，3，4T3檢測可診斷T3型甲亢，甲亢早期的篩查和人為造成的甲狀腺毒癥的診斷。5，6，7ElecsysT3采用競爭法原理和特異性的T3多克隆抗體。使用8-苯基-1-萘磺酸（ANS）釋放內源性的T3與添加的生物素化的T3衍生物競爭結合釕復合物標記抗體的結合

3、位點。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三聯吡啶釕檢測原理競爭法，總檢測時間：18分鐘第一次孵育：30l樣本和釕復合物標記的特異性抗T3抗體一起孵育；樣本中與結合蛋白結合的T3經ANS作用而釋放。第二次孵育：添加生物素化的T3和包被鏈霉素的磁珠微粒，前者將與未結合的標記抗體結合，形成抗體-半抗原復合物。復合物通過生物素、鏈霉素之間的反應結合到微粒上。將反應液吸入測量池中，通過電磁作用將磁珠吸附在電極表面。未與磁珠結合的物質通過ProCell被去除。給電極加以一定的電壓，使復合體化學發光，并通過光電倍增器測量發光強度。Elecs

4、ys軟件自動通過定標曲線計算得到檢測結果。試劑工作溶液M包被鏈霉素的磁珠微粒（透明瓶蓋），每瓶12ml；包被鏈霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐劑。R1釕復合物標記的Anti-T3抗體（灰色瓶蓋），每瓶16ml：釕復合物標記的多克隆Anti-T3抗體（羊），75ng/mL；ANS 0.8 mg/Ml;磷酸鹽緩沖液100 mmol/L，Ph7.4; 防腐劑。R2 生物素化的T3（黑色瓶蓋），每瓶16ml：生物素化的T3 3ng/mL；磷酸鹽緩沖液100 mmol/L，pH7.4; 防腐劑。警告和注意事項僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時必需遵循所有試驗室試劑操作的注意事項。所有廢棄物必需按照

5、當地法規進行處置。專業人員可要求獲得安全數據報告。避免試劑和樣本（樣本、定標液和質控品）產生氣泡。試劑處理試劑盒（M,R1和R2）為即用型，不能分開使用。試劑相關信息可以通過試劑條形碼閱讀獲取。儲存及穩定性存放于28。請垂直擺放Elecsys T3試劑盒，確保儀器的自動攪拌器能夠完全混勻磁珠微粒。穩定性：未開封試劑，28有效期內均可使用開封試劑，2812周放置分析儀MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上8周放置分析儀Elecsys 2010 和 cobas e 411上8周放置分析儀Elecsys 1010上8周（試劑交替放置于冰箱和20-25的分析儀中，持續

6、開蓋的情況下至多20小時）樣本的采集和準備下僅以下羅列的樣本類型通過測試并符合檢測要求。血清樣本須用標準試管或有分離膠的真空管收集。肝素鋰、鈉、銨，K3-EDTA，枸櫞酸鈉，氟化鈉/草酸鉀抗凝的血漿都適用。標準：回收率90-110%，斜率0.9-1.1，截距0.95。穩定性： 2-8可保存7天；-20可保存1個月。4一次凍融。選擇合適的試管進行不同類型樣本的采集，不是所有的試管均可用于檢測。不同廠商的樣本采集系統可能含有不同的物質，某些情況下會影響檢測結果。如果使用原始管進行檢測（樣本前處理系統）時，應遵循生產商所提供的指導。有沉淀和冰凍的樣本檢測前必須先作離心處理。避免使用熱滅活的樣本。添加

7、疊氮化合物的樣本和質控品均不能使用。檢測前，樣本、定標液及質控品須室溫平衡(20-25)。由于蒸發因素的影響，樣本、定標液及質控品在分析儀上的檢測必須2小時內完成。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節。需要的物品（未提供）貨號11731548122, T3 CalSet, 規格4 x1 ml貨號11731416122, PreciControl Universal，規格2 x3 ml，分別為PreciControl Universal 1和2或貨號11731416190, PreciControl Universal，規格2 x3 ml，分別為PreciControl Universal 1和2

8、實驗室基礎設備Elecsys 1010/2010 、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析儀Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析儀所需材料：貨號11662988122, ProCell, 6 x 380 mL ,系統緩沖液貨號11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL,測量池洗液 貨號11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液貨號11933159001, SysClean 適配器 貨號11706829001, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反應管或者貨

9、號11706802, Elecsys 2010 分析杯, 60 x 60 反應管貨號11706799001, Elecsys 2010 分析吸頭, 30 x 120 移液管吸頭 MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀所需材料：貨號04880340190,ProCell M, 2 x 2 L 系統緩沖液貨號04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L測量池洗液 貨號03023141001, PC/CC杯, 12個用于在檢測前預熱Procell M及Cleancell M。貨號03005712190,ProbeWash M, 12 x 70

10、 mL 清洗液，用于在檢測完畢后或更換試劑時清洗試劑針。貨號12102137001,反應杯/吸頭 組合裝,84反應杯/吸頭 組合裝48盒,廢物袋 貨號03023150001, WasteLiner,廢物袋 貨號03027651001,系統清潔適配器 M所有分析儀需要：貨號11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系統清洗液 檢測要優化檢測性能，請遵照本說明書中有關分析儀的相關指導，并參照分析儀操作手冊。試劑使用前分析儀自動攪拌磁珠微粒，使其處于懸浮狀態。試劑相關信息可通過條形碼自動讀取，在特殊情況下，分析儀無法自動讀取條碼信息時，請輸入條碼標簽上的15

11、位數字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析儀：將冷藏試劑室溫平衡至20C左右，放置分析儀的試劑盤（20C）內。避免泡沫產生。分析儀能自動調節試劑溫度和開、關各試劑盒瓶蓋。Elecsys 1010 分析儀: 將冷藏試劑室溫平衡至20-25C左右，放置分析儀的試劑盤（20- 25C）內。避免泡沫產生。使用前后手動開關試劑盒瓶蓋。使用后保存于2-8C冰箱。定標溯源性：Elecsys T3 檢測可溯源至稱量摻入法參考標準。每套Elecsys T3試劑的條碼標簽上均含有其批號特異的定標信息。使用Elecsys T3 定標液可調整定標曲線。定校頻率

12、：新批號試劑必須進行定標（新試劑盒在分析儀上放置不能超過24小時）。以下情況建議重新進行定標：MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析儀:使用同一批號試劑，1月后（28天）7天后（同一試劑盒在分析儀上使用）Elecsys 1010 分析儀:每盒試劑7天后（室溫 20-25C）3天后（室溫 25-32C）所有儀器根據需要：如失控。質控室內質控可使用Elecsys PreciControl Universal 1和2。也可以使用其他合適的質控品。各濃度質控至少每24小時內檢測一次，每次更換試劑盒或定標后也須進行質控。每個實驗室可根據各自的情況

13、設定合適的控制限和質控周期。質控值必須處于規定的控制限內。若失控每個試驗室必須采取相應的糾正措施。計算儀器會自動計算每個樣本中的分析物濃度，單位是nmol/L，ng/mL或ng/dL。轉換因子:nmol/L0.651=ng/Mlnmol/L65.09998=ng/dLng/mL1.536nmol/L 干擾因素檢測結果不受黃疸（膽紅素599mol/L或35 mg/dL）, 溶血（血紅蛋白1.2mmol/L或 2.0g/dL）, 脂血(脂肪乳劑 1800mg/dL)和生物素40.9 nmol/L或 5mg/天），必須在末次生物素治療8小時后采集樣本。濃度高達1500 IU/ml的類風濕因子和血液透

14、析樣本均對檢測無影響。體外對26種常用藥物進行試驗未發現會影響檢測結果。胺碘酮治療能夠導致T3濃度的降低。苯妥英、苯基丁氮酮和水楊酸鹽類能夠導致結合蛋白結合的T3釋放，因此導致總T3濃度的降低，但FT3水平正常。8甲狀腺激素的自身抗體能夠干擾檢測。結合蛋白異常，如FDH患者 (家族性異常白蛋白高甲狀腺素血癥)在特定條件下可能會導致檢測值偏離預期結果。9病理性的結合蛋白濃度（TBG、白蛋白）能夠導致T3水平超出正常范圍，盡管其甲狀腺功能代謝是正常的（如NTI病人、妊娠、口服避孕藥）。這些病例需要檢測FT3和FT4的水平。少數病例中極高濃度的特異性被分析物抗體、鏈霉素抗體或釕抗體會影響檢測結果。通

15、過適宜的實驗設計可減少這些干擾。作為診斷指標，必須結合患者病史，臨床檢查和其他臨床資料來綜合評估檢測結果。檢測范圍0.300-10.00 nmol/L或O.195-6.51 ng/mL（通過最低檢出限和廠商定標曲線的最高值確定）。低于檢出限的值報告50.00 nmol/L或6.51 ng/mL。稀釋檢測范圍較寬，標本不需要稀釋。期望值1.3-3.1 nmol/L或0.8-2.0 ng/mL：甲狀腺機能正常該期望值通過檢測514例健康個體的T3，取2.5th和97.5th的百分位點值獲得。 注:MCE Elecsys2010，1996，校驗1998年第一季度如果需要獲取兒童、青春期和妊娠婦女的參

16、考區間信息可參見名為兒童和成人參考區間的小冊子，貨號：04640292（英語）；04625889（德語）。該手冊還包含了參考人群組的甲狀腺參數影響因素的研究結果。參照NACB導則的入選及排除規則也羅列在內（如：甲狀腺超聲檢測的量和密度）。每個實驗室應通過實驗確定參考范圍的適用性，必要時建立本實驗室的參考范圍。特殊的性能指標試劑在分析儀上的性能試驗數據如下。各實驗室由于具體情況不同，所得出的數據可能會稍有差異。精密度應用Elecsys試劑盒、人混合血清/血漿樣本和質控品驗證重復性，按照CLSI的EP5-A執行：每天6次，共10天 (n=60)。批內精密度由 MODULAR ANALYTICS E

17、170分析儀完成，n=21下面是獲得的結果。分析靈敏度最低檢出限0.300 nmol/L或者0.195 ng/mL最低檢出限是指區別于零點的最低分析物濃度。方法學比較使用臨床標本比較Elecsys T3（y）檢測和酶免 T3（x） 檢測，相關性數據如下（nmol/L）：標本數n=300Passing/Bablok10 線性回歸y = 1.26x - 0.56 y = 1.18x - 0.35r = 0.754 r = 0.957比較樣品濃度約為0.59 nmol/L(大約0.35.9 ng/mL)。分析特異性抗體交叉反應如下：D-T3 100%;L-T40.16%; D-T40.16%; L-

18、rT30.04%;L-T21.0%;3,3,5-triiodothyroacetic acid106%;3,3,5,5-tetra-iodothyroacetic acid0.01%.參考文獻1. Wheeler MH, Lazarus JH. Diseases of the Thyroid. London, Glasgow, Weinheim, New York, Tokyo, Melbourne, Madras:2. Pfannenstiel P, Saller B. Schilddrsenkrankheiten Diagnose und Therapie. Berliner Medizi

19、nische Verlagsanstalt GmbH, 1995;2:30-32,60-62.3. Fisher DA. Physiological variations in thyroid hormones; physiological and pathophysiological considerations. Clinical Chemistry 1996;42:135-139.4. Tietz NW. Clinical Guide To Laboratory Tests. 3rd ed. Philadelphia,5. Surks MI, Chopra IJ, Mariash CN,

20、 Nicoloff JT, Solomon DH. American Thyroid Association guidelines for use of laboratory tests in thyroid disorders. JAMA 1990;63:1529-1532.6. Becker DV, Bigos ST, Gaitan E, Morris JC, Rallison ML, Spencer CA, et al. Optimal use of blood tests for assessment of thyroid function (letter). JAMA 1993;269:273.7. Klee GG. Clinical usage recommendations and analytic performance goals for total and free triiodothyronine measurements. Clinical Chemistry 1996;42:155-159.8. Wild D. The Immunoassay Ha