1、PAGE PAGE 6參照EP方案在不同檢測系統評價尿微量白蛋白試劑的分析性能摘要：目的 通過不同檢測系統測定尿微量白蛋白的分析性能評價，以探討新成生物公司尿微量白蛋白測定試劑盒與英國朗道測定試劑盒在分析性能上的差異。方法 在同一臺全自動生化分析儀上，同時對兩個檢測系統的正確度、精密度、最低檢測限、測定范圍、方法學比對共五項性能指標進行評價。結果 在正確度實驗，新成和朗道試劑的相對偏差分別都小于10%。精密度試驗，兩種試劑的批內CV分別都小于5%。兩種試劑的檢測低限分別為：0.87mg/L、0.27mg/L。線性試驗結果，新成試劑的回歸方程和相關系數分別為： Y0.9827X+0.5455，R

2、20.9987（濃度范圍0-400mg/L），朗道試劑的回歸方程和相關系數分別為：Y1.0356X-0.9091，R20.9996（濃度范圍0.0-202.8mg/L），新成試劑的測定范圍更廣。方法比對試驗，試驗結果表明兩種試劑相關性良好，回歸方程和相關系數分別為：Y1.2555X-1.6888，R20.9976。結論 兩種檢測系統對尿微量白蛋白的測定能得到一致的結果，其性能指標均能滿足臨床使用要求，無明顯差異。關鍵詞：尿微量白蛋白；分析性能評價；CLSI EP方案The evaluation of the analytical performance by CLSI EP protocols

3、 between two different detection system of microalbuminuria TIAN Xiujun(Department of Clinical Laboratory,the Fourth People,s hospital of zibo city,Shandong province 255000)Abstract :Purpose Through evaluate the analytical performance between two different detection systems of microalbuminuria, to p

4、robe the analytical performance of sichuan xincheng conpanys detecting system,and find the differences between the xincheng detecting system and the England RANDOX detecting system. Methods On the same automatic biochemical analyzer, evaluate the two detection systems five indicators such as accurac

5、y, precision, minimum detection limit, linear range and the method comparison. Results In the accuracy test, the two reagents relative deviation are less than 10%. In the precision test, the within run coefficient of variation are less than 5%. The two reagents minimum detection limit respectively a

6、re 1.03mg/L and 0.27mg/L. In the linear test,the linear regression equation and correlation coefficient of xinchengs reagent : Y0.9827X+0.5455，R20.9987(the linear range is 0-400mg/L); The linear regression equation and Correlation coefficient of RANDOXs reagent : Y1.0356X-0.9091，R20.9996 (the linear

7、 range is0.0-202.8mg/L); the xincheng reagents linear range is wider than the RANDOXs. In the method comparison test, the test results show that the two reagents correlation is good, the linear regression equation and correlation coefficient Y1.2555X-1.6888，R20.9976.The Conclusion The determination

8、of the microalbuminuria within xinchengs reagent and RANDOXs reagent can get the consistent result, all the performance indexs can meet the request of the clinical, theres no significant difference between the two kands of reagents.Key Words: microalbuminuria;The evaluation of the analytical perform

9、ance; CLSI EP尿微量白蛋白（MAlb）是指尿中白蛋白在30一300mg/L范圍內的臨床病理指征，即超出正常參考值上限而未檢出臨床蛋白尿的中間階段1。在正常生理狀態下，腎小球濾過的濾液中僅僅含有極少量的白蛋白，且大部分被腎小管重吸收。因此尿白蛋白的異常增多對腎臟功能損傷的診斷有重要的參考價值。同時，MAlb是檢測血管損傷的重要指標，是糖尿病、高血壓、心血管疾病、腎病血管損傷的指標，對判斷疾病發生、發展、預后有重要的參考價值。在過去的研究中臨床上重視糖尿病患者MAlb的變化，但是近年的研究發現MAlb對分析血管相關疾病的進展具有十分重要的意義。因此擴大MAlb檢查的應用范圍，已經作為心

10、血管疾病、高血壓等疾病的常規檢查項目。通過這一檢查可以發現潛在病變，為疾病的早期診斷、早期治療提供有用的信息及實驗室指標。現在尿微量白蛋白的檢測方法主要包括ELISA方法、Albustix法、免疫比濁法、RIA方法2，另外臨床上也有尿液白蛋白的簡易試條半定量法。如Micral-Test、Clinitek Strips法等，用隨意尿標本，結果以白蛋白/肌酐比值或白蛋白/比密比值表示，用于白蛋白尿的過篩。相比之下，免疫比濁法精度高，操作簡便，在全自動生化分析儀上就能進行，在臨床上得到了廣泛的應用。本文就四川新成生物科技有限責任公司尿微量白蛋白檢測試劑盒（免疫比濁法）和朗道尿微量白蛋白測定試劑盒（免

11、疫比濁法）的分析性能進行評價，以了解其差異。具體實驗結果如下：材料與方法1.檢測系統檢測系統1試劑：四川新成生物科技有限責任公司尿微量白蛋白測定試劑盒（免疫比濁法）及配套校準品（批號：0309021）。檢測系統2試劑：朗道尿微量白蛋白測定試劑盒（免疫比濁法）及配套校準品。（批號：141710）檢測系統1、2用儀器：日立7060全自動生化分析儀（HITACH 7180）。檢測系統1、2用樣本：本院門診隨機尿液標本40例。檢測系統1、2用質控品：MAlb專用質控品（四川新成生物科技有限責任公司）Level-1: MAlb高值，靶值為127mg/L,批號：0409011，Level-2：MAlb低值

12、，靶值為33 mg/L，批號：0409011。2. 實驗方法有關正確度、精密度、最低檢測限、線性范圍評價實驗、方法比對實驗等評價指標參照相關CLSI EP方案及國內外慣用方法進行。2. 1實驗參數實驗參數設置按照試劑說明書要求進行編寫。2.2 正確度參照在CLSI EP-10文件中對準確度的定義，正確度表示測量結果與真值的一致程度。正確度往往通過相對偏差來衡量。在本次實驗中，同時重復三次測定MAlb專用質控品，以三次測定結果的平均值作為最終測定值，計算其與靶值之間的偏差來衡量正確度。2.3 精密度參照在CLSI EP-5A23文件中對準確度的定義，精密度表示在測量結果中隨機誤差大小的程度，指在

13、一定條件下進行多次測定時，所測得結果之間的符合程度。精密度無法直接衡量，往往以不精密度表達，常用標準差（S）或變異系數（CV%）表示，較小的S或CV%在本次實驗中，分別抽取高值和低值的臨床混合尿液標本，同時用兩種試劑重復測定20次，計算批內精密度。2.4 最低檢測限最低檢測限是指檢測系統可檢出的最低分析物濃度，包括檢測低限(LLD)、生物檢測限(BLD)和功能靈敏度(FS)。本實驗最低檢測限即檢測低限。在同一條件下，兩種試劑同時重復測定零濃度標本20次，在99.7%可能性時，LLD=空白+3S空白。2.5 線性評價實驗參照在CLSI EP6-A4文件中對線性評價實驗的要求，取高低值混合尿液標本

14、各一份，按照0：10、1：9、2：8、3：7、4：6、5：5、6：4、7：3、8：2、9：1、10：0的比例混合，分別編號，隨機排列重復測定3次，計算平均值作為最終的測定值，與設定值做線性對比。2.6 方法比對實驗參照在CLSI EP9-A5文件中方法比對實驗試驗的要求，選取新鮮的尿液標本共40例，用兩種試劑同時進行測定，將數據進行統計學分析，計算其相關系數和回歸方程。3.實驗數據統計學處理用Excel統計軟件進行數據統計。結果1.正確度兩種試劑同時分別測定兩個水平的MAlb專用質控，通過結果的分析，兩種試劑相對偏差均滿足臨床要求（相對偏差10%）。2.精密度新成試劑和朗道試劑分別同時測定高、

15、低值混合臨床尿液標本，測定高值標本時，批內變異系數分別是：1.36%、1.88%；測定低值標本時，批內變異系數分別是：2.95%、3.69%。均滿足臨床要求。3.最低檢測限在同一條件下，兩種試劑同時重復測定零濃度標本20次，99.7%可能性時，新成生物公司MAlb測定試劑盒的檢測低限為：1.03mg/L；朗道MAlb測定試劑盒的檢測低限為：0.27mg/L。4.檢測范圍高值標本和低值標本按比例稀釋后重復測定三次，取其平均值為最終的計算值，做線性回歸分析。新成試劑相關方程及相關系數分別為Y0.9827X+0.5455，R20.9987（濃度范圍0-400mg/L）；朗道試劑相關方程及相關系數分別

16、為Y1.0356X-0.9091，R20.9996（濃度范圍0.0-202.8mg/L）。5.方法學比對實驗用兩種試劑同時測定新鮮臨床尿液標本40例，做線性回歸分析, 計算出相關方程和相關系數為Y0.7946X+1.4677，R20.9976。討論尿微量白蛋白的分子量為69KD，是腎小球濾過膜所能通過的最小蛋白質分子之一，占濾過蛋白總量的40%。經腎小球濾過的蛋白質幾乎全部被近曲小管以主動方式回吸收，因此正常情況下尿中只有極微量白蛋白。但在病理狀況下6，如各種炎癥、代謝異常和免疫損傷，使腎小球血流動力學異常，腎小球濾過膜損害是造成尿微量白蛋白排出量增加的重要原因。由于長期高血糖使非酶糖酞化速率

17、增加，導致缺氧，血液勃度增高，同時內皮細胞釋放內皮素和一氧化氮等血管活性物質使腎小球毛細血管張力改變，進而引起腎血流動力學變化，使腎小球處于高濾過狀態并導致腎損害。尿微量白蛋白的檢測就能較早且較敏感的指示腎臟功能的早期損害，對阻止和延緩糖尿病腎病的發展具有十分重要的臨床意義。同時，大量的臨床研究與觀察還表明7，尿微量白蛋白的發生與高血壓、糖尿病、心血管疾病都有一定的聯系。目前國際上十分重視MAlb的檢測，認為這項指標對早期治療原發性疾病、分析病程進展、評價相關危險因素具有重要的意義。但是8，目前尿微量白蛋白檢測還缺乏“金標準”，各家收集尿液的方法互不統一。有24 h尿、夜尿、隨機尿等。測定結果

18、的單位也不統一，有g/min、mg/d、mg/L等。今后在朝著統一方法、統一標準的目標努力過程中，還需要做很多的工作。實驗數據表明，新成生物公司尿微量白蛋白測定試劑盒和朗道公司尿微量白蛋白測定試劑盒在測定正確度上均滿足臨床上相對偏差10%的要求，在測定高值質控（靶濃度為127mg/L）時，兩者的相對偏差分別是：4.72%、-8.82%；測定低值質控（靶濃度為33mg/L）時，兩者相對偏差分別是：6.06%、-0.09%。在精密度指標上，測定高值樣品時，兩者的批內變異系數分別為：1.36%、1.88%；測定低值樣品時，兩者的批內變異系數分別是：2.95%、3.69%，均滿足臨床使用要求。新成試劑的檢測低限為0.87mg/L，朗道試劑的檢測低限為0.27mg/L。測定范圍，新成試劑相關方程及相關系數分別為Y0.9827X+0.5455，R20.9987（濃度范圍0-400mg/L）；朗道試劑相關方程及相關系數分別為Y1.0356X-0.9091，R20.9996（濃度范圍0.0-202.8mg/L），兩者在測定范圍上均滿足臨床使用要求，新成試劑測定范圍更廣。方法學比對實驗結果，相關方程和相關系數為Y1.2555X-1.6888，R20.9976，表明兩者測定相關性良好，無明顯差異。兩種檢測系統測定尿微量白蛋白能得到一致的結