1、中藥分析試驗教案試驗一中藥制劑的理化定性鑒別（4 學時）一、目的要求1、把握 TLC的鑒別方法；2、熟識中成藥分析的理化定性方法；二、試驗內(nèi)容（一）化學定性鑒別和紫外分光光度法定性鑒別1、牛黃解毒片：（1）鑒別方法 取本品 1 片,研細,進行微量升華,所得的白色升華物,加新制的 1香草醛的硫酸 溶液 1 2 滴,液滴邊緣漸顯玫瑰紅色；取本品 6 片（包衣者除去包衣） ,研細,加乙醇 10ml,溫熱 10 分鐘,濾過,取濾液 5ml,加鎂粉少量與鹽酸 0.5ml,加熱,即顯紅色；另取濾液 4ml ,加氫氧化鈉試液,即顯紅 色,再加 30過氧化氫溶液,紅色不消逝,加酸成酸性時,就紅色變?yōu)辄S色；（2

2、）摸索題 試述法的化學定性原理；2、復方丹參片（1）鑒別方法分光光度法：取本品1 片,研細,分次加水少量,攪拌,濾過,濾液移置100ml 量瓶中,并加水至刻度,取溶液2ml ,加水至 25ml ；在 283 2nm 的波特長有最大吸取；取本品 1 片,研細,進行微量升華,所得白色升華物,加新制的 1香草醛的硫酸溶液 1 滴,液滴邊緣漸濕玫瑰紅色；（3）摸索題試述法的化學定性原理；3、穿心蓮片（1）本品為穿心蓮浸膏片（2）鑒別方法取本品 5 片,除去包衣,研細,加乙醇 10ml,置水浴中加熱至沸,加活性炭 0.5g,攪拌,濾過；取濾液 1ml ,加二硝基苯甲酸試液與乙醇制氫氧化鉀試液的等容混合溶

3、液 2 滴,搖勻,即顯紫色；另取濾液 1ml,加堿性三硝基苯酚試液 35 滴,顯橙紅色；取本品 3 片,除去包衣, 研細,加無水乙醇 25ml ,置水浴中加熱回流 1 小時,放冷,濾過,濾液蒸干,加水 5ml,再加 2鹽酸溶液調(diào)劑 pH 值至 1.0,在水浴上加熱 30 分鐘,濾過；取濾液,加 10亞硝酸鈉溶液和 10硝酸鋁溶液各 3 滴,搖勻,再加氫氧化鈉試液0.51ml,顯橙紅色；（3）摸索題試述法的化學定性原理；4、銀黃口服液（1）本品為金銀花提取物、黃芩提取物經(jīng)加工制成的口服液；（2）鑒別方法取本品 1ml,加 5硝酸鈉溶液與10硝酸鋁溶液各0.3ml ,生成黃色沉淀, 再加 5氫氧化

4、鈉溶液使成堿性,沉淀即溶解,溶液顯棕紅色；取本品 0.1ml ,加水 10ml,搖勻,取溶液2ml,加 5二氯氧化鋯溶液12 滴,溶液顯黃色,再加鹽酸12 滴,黃色不褪；（3）摸索題 試述法的化學定性原理；5、板藍根顆粒劑（1）本品為板藍根制成的顆粒劑；（2）鑒別方法 取本品 0.5g,加 5ml 甲醇使溶解, 靜置,取上清液點于濾紙上, 晾干,置紫外光燈（365nm ）下觀看,顯藍紫色；取本品 0.5g,加 10ml 甲醇使溶解,濾過,取濾液1ml,加茚三酮試液0.5ml ,置水浴中加熱數(shù)分鐘,顯藍紫色；（3）摸索題 試述第（ 2）點中法的鑒別原理；（二）薄層色譜鑒別1、牛黃解毒片（1）薄層

5、板制備 參看本書附錄；（2）供試品溶液制備： 取本品 2 片,粉碎, 加氯仿 10ml 研磨,濾液蒸干, 加乙醇 0.5ml 使溶解,作為供試品溶液；（3）對比品溶液制備：取膽酸對比品,加乙醇制成每 品溶液；1ml 中含 1mg 的溶液,作為對比（4）點樣與綻開：吸取上述兩種溶液各5 l,分別點于同一硅膠G 薄層板上,以正已烷醋酸乙酯醋酸甲醇（20：25：2：3）的上層溶液為綻開劑,綻開,取出,晾干,噴以 10硫酸乙醇溶液,在105烘約 10 分鐘；置紫外光燈（365nm）下檢視；在供試品色譜中,在與對比品色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點；（5）摸索題：試述本法分析原理？是鑒別處方中何種

6、中藥材？2、銀翹解毒片薄層色譜法；（1）薄層板制備：同 1、（1）項；（2）供試液制備：取本品 10 片,研細,加石油醚（6090） 20ml ,密塞,時時振 搖,浸漬過夜,濾過,濾液揮散至 1ml,作為供試品溶液；（3）對比溶液制備：取荊芥對比藥材0.8g,加石油醚（ 6090） 20ml,按供試品溶液制備法制備；再取薄荷腦對比品,加乙醇,制成每 1ml 含 2mg 的溶液,作為對比品溶液；（4）點樣、綻開、顯色：吸取上述三種溶液各10 l, 分別點于同一含羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠 G 薄層板上, 以正已浣一醋酸乙酯（17：3）為綻開劑, 綻開, 取出,晾干,噴以茴香醛試液,于 105加

7、熱至斑點顯色清楚；供試品色譜中,分別在與對比品相應的位 置上,顯相同顏色的斑點；（5）摸索題：試述本法測定原理,并說明本法與牛黃解毒片的薄層色譜法的區(qū)分要點；試驗二甲苯法測定中藥制劑中水分含量（4 學時）一 、 目 的 要 求掌 握 甲 苯 法 測 定 中 藥 制 劑 中 水 分 的 原 理 和 操 作 方 法 ；二 、 基 本 原 理中 藥 制 劑 水 分 測 定 的 常 用 方 法 有 烘 干 法 和 甲 苯 法 , 烘 干 法 適 用 于 不 含 或 少 含 揮 發(fā) 性 成 分 的 藥 品 ,甲 苯 法 用 于 含 揮 發(fā) 性 成 分 的 藥 品 ；香 砂 養(yǎng) 胃 丸 是 由 木 香 、

8、砂 仁 、白 術 、陳 皮 、香 附 、廣 藿 香 、茯 苓 、半 夏 等 十 二 味 中 藥 制 成 的 水 丸 ,其 中 有 多 味 中 藥 中 含 揮 發(fā) 性 成 分 , 應 選 用 甲 苯 法 測 定 該 制 劑 中 水 分 的 含 量 ；三 、 儀 器 與 試 藥1、 甲 苯 法 水 分 測 定 裝 備 （ 見 附 圖 ）（ 包 括 500ml 水 分 測 定 管 、 直 形 冷 凝 管 、 外 管 長 40cm ）；2、 電 熱 套 、 分 析 天 平 ；3、 甲 苯 、 亞 甲 藍 （ AR）；4、 銅 絲 ；5、 香 砂 養(yǎng) 胃 丸 （ 市 售 品 ）；四 、 操 作 步 驟短

9、 頸 圓 底 燒 瓶 、甲苯法水分測定裝置將 香 砂 養(yǎng) 胃 丸 研 碎 , 取 約25g（ 約 相 當 于 含 水 量1 4ml ）, 精 密 稱 定 , 置A瓶 中 , 加 甲 苯 約 200ml , 必 要 時 加 入 玻 璃 珠 數(shù) 粒 , 將 儀 器 各 部 分 連 接 , 自 冷 凝 管頂 端 加 入 甲 苯 ,至 充 滿 B 管 的 狹 細 部 分 ；將 A 瓶 置 電 熱 套 中 或 用 其 他 適 宜 方 法 緩緩 加 熱 , 待 甲 苯 開 始 沸 騰 時 , 調(diào) 節(jié) 溫 度 , 使 每 秒 鐘 餾 出2 滴 ； 待 水 分 完 全 餾 出 ,即 測 定 管 刻 度 部 分

10、 的 水 量 不 再 增 加 時 ,將 冷 凝 管 內(nèi) 部 先 用 甲 苯 沖 洗 ,再 用 飽 蘸 甲 苯 的 長 刷 或 其 他 適 宜 的 方 法 ,將 管 壁 上 附 著 的 甲 苯 推 下 ,繼 續(xù) 蒸 餾 5 分 鐘 ,放 冷 至 定 溫 ,拆 卸 裝 置 ,如 有 水 黏 附 在 B 管 的 管 壁 上 ,可 用 蘸 甲 苯 的 銅 絲 推 下 ,放 置 ,使 水 分 與 甲 苯 完 全 分 離（ 可 加 亞 甲 藍 粉 末 少 量 ,使 水 染 成 藍 色 ,以 便 分 離 觀 察 ）；檢 讀 水 量 , 并 計 算 供 試 品 中 的 含 水 量 （ ）；五 、 注 意 事

11、項1、用 化 學 純 甲 苯 直 接 測 定 ,必 要 時 甲 苯 可 先 加 水 少 量 ,充 分 振 搖 后 ,將 水 層分 離 棄 去 , 經(jīng) 蒸 餾 后 使 用 ；2、 樣 品 應 先 粉 碎 成 直 徑 不 超 過 3mm 的 顆 粒 ；六 、 思 考 題1、 實 驗 中 所 用 儀 器 、 器 皿 是 否 要 烘 干 ？ 為 什 么 ？2、 為 什 么 說 本 法 適 用 于 含 揮 發(fā) 性 成 分 的 中 藥 制 劑 中 水 分 的 測 定 ？試驗三礦物藥石膏與玄明粉中重金屬的檢查（4 學時）一、目的要求 1、把握重金屬檢查的方法與原理； 2、熟識目視比色法的操作與判定；二、基本

12、原理目視比色法是以肉眼直接觀看比較樣品溶液與標準品溶液的顏色深淺,判定樣品所含雜質(zhì)是否超出規(guī)定限度；重金屬在試驗條件下都能與硫代乙酰胺或硫化鈉反應顯色,生成黑色硫化物沉淀,標準溶液常以 Pb 2+為代表,其原理為：在酸性溶液中 CH3CSNH 2+H20 CH3CONH 2+H2S Pb2+H2S pbS 黑色 在堿性溶液中 Pb2+Na2S pbS 黑色 +2Na+三、儀器與試藥 1、電爐、 25ml 納氏比色管及比色管架； 2、萬分之一分析天平；3、量瓶、刻度吸管、燒杯、錐形瓶、量筒等； 54、其他試劑均為AR級；、石膏、玄明粉（市售品）四、操作步驟 1. 石膏重金屬檢查 取樣品 16g,

13、加冰醋酸 4ml 與水 96ml,煮沸 10 分鐘,放冷,濾過,用水洗滌并定容至 100ml；取 25ml 納氏比色管 2 支,甲管中加標準鉛溶液 2ml 與醋酸鹽緩沖液 pH=3.52ml 后加水使成 25ml；乙管加樣品濾液 25ml,在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液 2ml,搖勻,放置 2 分鐘,同置白紙上,自上向下透視,乙管中顯出的顏色與甲管比較,不得更深； 2. 玄明粉重金屬檢查 取 25ml 納氏比色管 2 支,甲管中加標準鉛溶液 2ml 與醋酸鹽緩沖液 pH=3.52ml 后,加水使成 25ml,乙管取玄明粉 1.0g ,加醋酸鹽緩沖液 2ml 與適量水溶解成 25ml；在甲乙兩

14、管中分別加入硫代乙酰胺試液各 2ml,搖勻,同置白紙上,自上向下透視,乙管中顯出的顏色與甲管比較,不得更深；附注精密稱取在105干燥至恒重的硝酸鉛0.1598g 置 1000ml 量瓶中,加硝酸 1.標準鉛溶液的配制5ml,水 50ml 溶解后,用水稀釋至刻度,搖勻,作為儲備液；臨用前,精密量取儲備液10ml,置 100ml 量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,即得 每 1ml 相當于 10 g的 Pb ； 2. 硫代乙酰胺試液的配制 取硫代乙酰胺 4g,加水使溶解成 100ml,置冰箱中儲存,臨用前取混合液 由 1mol/L 氫氧化鈉溶液 15ml,水 5.0ml 及甘油 20ml 組成 5.0m

15、l ,加上述硫代乙酰胺溶液 1.0ml ,置水浴上加熱 20 秒鐘,冷卻,立刻使用； 3. 醋酸鹽緩沖液的配制 pH3.5 取醋酸銨 25g加水 25ml 溶解后,加 7mol/L 鹽酸溶液 38ml,用 2mol/L鹽酸溶液或 5mol/L 氨溶液精確調(diào)劑 pH值至 3.5 電位法指示 ,用水稀釋至 100ml,即得；五、摸索題 12石膏及玄明粉的重金屬限量分別是多少. 在酸性溶液中重金屬能否用Na2S作顯色劑 .為什么 . 試驗三冰片中砷鹽限量檢查（4 學時）一、目的要求1、熟識砷鹽檢查法的基本操作；2、明白砷鹽檢查的原理和方法（古蔡法）；二、基本原理本法為中國藥典規(guī)定砷鹽檢查第一法；鋅和

16、酸作用所產(chǎn)生的初生態(tài)氫與供試品中微量砷鹽化合物反應生成揮發(fā)性砷化氫,再與溴化汞試紙作用生成黃色至棕色砷斑；與同條件下肯定量標準砷溶液所產(chǎn)生的砷斑比較,以判定供試品的砷鹽限量；AsO33-+3Zn+9H + AsH3 +3Zn 2+3H2O產(chǎn)生的砷化氫與溴化汞試紙作用；AsH3+2HgBr22HBr+AsHHgBr2 黃色 AsH3+3HgBr23HBr +AsHgBr3 棕色 由于 AsO43-在酸性溶液中被 Zn 仍原的速度很慢,為提高反應速度,常在反應液中加入KI 及酸性 SnC12 將 AsO43 仍原為 AsO33,KI 被氧化生成 有 KI 的仍原劑存在；I2,以 SnC12 來仍原

17、,使反應液中維護AsO43-+2I-+2H+ AsO33-+I2+H2O AsO43-+Sn2+2H+AsO33-+Sn4+H2OI2+Sn2+ 2I-+ Sn4+溶液中的碘離子,與反應中產(chǎn)生的鋅離子能形成協(xié)作物,使生成砷化氫的反應不斷進行；4I-+Zn 2+ ZnI42-在酸性溶液中產(chǎn)生H2S氣體, 干擾試驗, 故需采供試品和鋅粒中可能含有少量硫化物,用醋酸鉛棉花吸取除去 H2S；H2S+PbCH3COO2 PbS +2CH3COOH 三、儀器與試藥1、古蔡法測砷裝置（見附圖）；2、標準砷試液（1gAs/ml ）；碘化鉀試液；酸性氯化亞錫試液；醋酸鉛棉花；鋅粒；溴化汞試紙；3、冰片（市售品）

18、 ；四、操作步驟測試前,先于導氣管 C 中裝入醋酸鉛棉花 60mg（裝管高度為 6080mm）；再于旋塞 D的頂端平面上放一片溴化汞試紙（試紙大小以能掩蓋孔徑而不露出平面為宜）,蓋上旋塞 E并旋緊,即得；1. 標準砷斑的制備 精密量取標準砷溶液 2ml,置 A 瓶中,加鹽酸 5ml 與水 2ml,再加碘化鉀試液 5ml 與酸性氯化亞錫試液 5 滴,在室溫放置 10 分鐘后,加鋅粒 2g,立刻將照上法裝妥的導氣管 C密塞于 A 瓶上,并將 A 瓶置 2540水浴中反應 45 分鐘,取出溴化汞試紙,即得；2. 供試品的檢查 取冰片 1g,加氫氧化鈣 0.5g 與水 2ml,混勻,置水浴上加熱使冰片

19、揮發(fā)后,放冷,加鹽酸中和,再加鹽酸 5ml 與水適量使成 28ml ,照標準砷斑的制備,自“ 再加碘化鉀試液 5ml” 起,依法操作；將生成的砷斑與標準砷斑比較,不得更深；五、留意事項1、標準砷斑的制備應與樣品檢查法平行操作；2、制備標準砷斑應與供試品檢查同時進行；因砷斑不穩(wěn)固,反應中應保持干燥及避光,并立刻比較；3、浸入乙醇制溴化汞試液的濾紙的質(zhì)量,對生成砷斑的色澤有影響,因此必需選用質(zhì)量較好,組織疏松的中速定量濾紙,溴化汞試紙一般宜新奇制備；六、摸索題 1、砷鹽檢查第一法和其次法的異同何在？各自的關鍵環(huán)節(jié)是什么？試驗四左金丸質(zhì)量標準制定（8 學時）一、目的要求 把握中藥制劑質(zhì)量標準的主要內(nèi)

20、容和制定方法 學習設計試驗的思路和方法 明白中藥制劑分析常用定性鑒別和含量測定方法 二、提要 1. 處方 黃連 600g 吳茱萸 100g 2. 制法 以上二味,粉碎成細粉,過篩,混勻,用水泛丸,干燥,即得；性狀 本品為黃褐色的水丸；氣特異,味苦、辛；功能與主治 瀉火,疏肝,和胃,止痛；用于肝火犯胃,腕脅疼痛,口苦嘈雜,嘔吐酸水,不喜熱飲；三、方法 1. 質(zhì)量標準方案設計：依據(jù)以上條件請同學設計本品的定性鑒別、檢查和含量測定分析方案；定性鑒別要寫明所用對比品或?qū)Ρ人幉摹㈣b別方法； 檢查要寫明檢查內(nèi)容及方法；含量測定要寫明樣品提取凈化方法、所測成分、測定條件、測定方法及含量運算方法；2. 在明白中藥制劑質(zhì)量標準制定基本方法和左金丸中各味藥的定性鑒別和含量測定方法基 礎上,參照 2022 版藥典左金丸項下定性鑒別及含量測定方法擬定試驗方法供同學練習；四、試驗用品 分析天平 恒溫水浴鍋 容量瓶、三角瓶、燒杯、量筒、色譜柱等中性氧化鋁（層析用）分光光度計樣品：左金丸（市售品）其他試劑均為 AR級五、試驗步驟1. 定性鑒別取左金丸 1g,研細,加乙醇 10ml,超聲處理 20 分鐘,放冷,濾過,濾液作為供試品溶液；另取吳茱萸對比藥材 0.1g 、黃連對比藥材 0.6g ,分別同法制成對比