1、飽食和饑餓對(duì)白鼠肝糖原含量的比較 【目的】掌握糖原合成的主要影響因素，熟悉糖原與葡萄糖的定性鑒定方法。 掌握低速常溫離心機(jī)的使用，了解離心技術(shù)。 1肝糖原是由許多葡萄糖分子聚合而成的物質(zhì)，是動(dòng)物機(jī)體能迅速動(dòng)用的糖儲(chǔ)存形式之一。 【原理】2肝糖原含量定性比較 【原理】提取:用三氯醋酸破壞肝組織的酶和蛋白質(zhì)，使其沉淀而保留糖原，再用乙醇將糖原從濾液中沉淀出來(lái)，溶于熱水中，即為糖原溶液。糖原溶液呈乳樣光澤，遇碘呈紅棕色；性質(zhì)經(jīng)酸水解可生成還原性的葡萄糖，后者可將堿性銅溶液(班氏試劑)中二價(jià)銅還原成氧化亞銅。利用上述性質(zhì)，進(jìn)行飽食與饑餓肝糖原的比較。3【試劑與器材】1.小白鼠（饑餓與飽食，一組各一只）

2、。2.白瓷盤、手術(shù)剪 3.研缽、漏斗、濾紙4.低速常溫離心機(jī)（KA-1000)5.離心管6.試管及試管架、燒杯7.恒溫水浴鍋8. 5%三氯醋酸溶液, 0.3%碘液, 95%乙醇, 20%NaOH溶液,濃鹽酸溶液,班氏定性試劑 4小白鼠肝脫頸處死脫頸處死 右手抓住鼠尾用力向后拉,同時(shí)左手拇指與食指用力向下按住鼠頭。將脊髓與腦髓拉斷，鼠便立即死亡。 【操作】5小白鼠肝脫頸處死5三氯醋酸6mL, 勻漿過濾濾紙先潤(rùn)濕濾液等體積乙醇混勻后，靜置3-5分鐘,3000rpm,離心3min棄上清，沉淀加5mL H2O比較濾液渾濁度觀察、對(duì)比溶液現(xiàn)象取該液2mL0.3碘液2滴, 混勻觀察、記錄顏色，與對(duì)照組對(duì)比

3、取該液2mL加鹽酸10滴，沸水浴10min; 冷后，20NaOH20滴中和可加熱助溶冷卻取水解液5滴加班氏液1mL,混勻，沸水浴3min觀察、記錄現(xiàn)象，與對(duì)照組對(duì)比空白對(duì)照、饑餓組與飽食組6小白鼠肝脫頸處死5三氯醋酸6mL, 勻漿過濾濾液等體積乙醇混勻后，3000rpm,離心3min棄上清，沉淀加5mL H2O觀察、對(duì)比溶液現(xiàn)象取該液2mL0.3碘液2滴, 混勻觀察、記錄顏色，與對(duì)照組對(duì)比取該液2mL加鹽酸10滴，沸水浴10min; 冷后，20NaOH20滴中和冷卻取水解液5滴加班氏液1mL,混勻，沸水浴3min觀察、記錄現(xiàn)象，與對(duì)照組對(duì)比7離心分離技術(shù) 離心技術(shù)就是利用離心機(jī)的轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)時(shí)

4、產(chǎn)生的強(qiáng)大離心力，使置于該旋轉(zhuǎn)體中的懸浮顆粒發(fā)生沉降或漂浮，從而使某些顆粒達(dá)到濃縮或與其他顆粒分離的目的。 8離心試管盛放的溶液不能過多。離心管等重（連同套管）、對(duì)稱放入轉(zhuǎn)子，以保持離心機(jī)的平衡。將離心機(jī)蓋好，開機(jī)，緩緩調(diào)速旋鈕，逐步加速至所需的轉(zhuǎn)速（開機(jī)前，調(diào)速旋鈕應(yīng)置零）。離心完畢，將調(diào)速旋鈕降低至零，關(guān)機(jī)，待離心機(jī)停穩(wěn)后才可開蓋取物。切勿用手或其他物件強(qiáng)行減速 操作要點(diǎn)：9(1) 離心機(jī)為高速旋轉(zhuǎn)設(shè)備，放置必須絕對(duì)平衡。(2) 在啟動(dòng)離心機(jī)時(shí)，應(yīng)檢查開關(guān)是否在零位，調(diào)速器是否在零或在轉(zhuǎn)速較小處，用手輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)軸看是否能自由旋轉(zhuǎn)。(3) 離心機(jī)的金屬(或塑料)離心套管必須完整，管底應(yīng)墊好軟墊(棉花或膠墊)。(4) 使用完畢，必須用干布擦凈離心套管內(nèi)的液體。(5) 在使用中如發(fā)現(xiàn)聲音不正常或振動(dòng)異常，應(yīng)立即切斷電源，待檢查修復(fù)后再使用。(6) 操作人員不得遠(yuǎn)離工作中的離心機(jī)。離心操作注意事項(xiàng)：10實(shí)驗(yàn)結(jié)果饑餓和飽食對(duì)小白鼠肝糖原含量的影響項(xiàng)目處理 每位同學(xué)根據(jù)自已和同組同學(xué)的結(jié)果，綜合記錄并討論。111、為什么要同時(shí)做饑餓和飽食處理的兩組小鼠？2、如何避免個(gè)體差異