1、關于多肽與蛋白質類藥物第一張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月一、多肽和蛋白質藥物的基本概念第一節 概述（一）、多肽類藥物 多肽是-氨基酸以肽鏈連接在一起而形成的化合物,它也是蛋白質水解的中間產物。N條多肽鏈按一定的空間結構纏繞糾結就構成了蛋白質。大分子蛋白質水解會生成多肽。 第二張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月1、多肽藥物的功能特性 多肽是生物體內重要的生物活性成分，主要有以下生理功能特性：（1）作為生理調節的活性分子，參與調節各種生理活動和特性。 （2）多肽在生物體內的濃度很低（110-7 mol/L就可發揮活性，有的甚至更低），但生理活性很強，具有多種多樣的生化功能。如膽

2、囊收縮素在千萬分之一就可發揮作用。 （3）分子小，結構易于改造，可通過化學合成的方法生產。如由中國首先合成的牛胰島素，就屬于一種含51個氨基酸的多肽。 （4）活性多肽的合成過程往往是由蛋白質精加工剪切轉化而來的，許多多肽之間都具有共同的來源、相似的結構。第三張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月2.多肽類藥物的分類 主要有多肽激素、多肽類細胞生長調節因子、含有多肽成分的組織制劑：1、多肽激素（1）腦垂體多肽激素；促皮質素（ACTH），促黑激素,催產素，加壓素（2）下丘腦激素；促甲狀腺激素釋放激素，生長素抑制激素，促性腺激素釋放激素主要多肽類藥物（3）甲狀腺激素；甲狀旁腺激素，降鈣素（4）胰

3、島激素；胰高血糖素，胰解痙多肽（5）胃腸道激素；胃泌素，膽囊收縮素，腸泌素，腸血管活性肽，抑胃肽，緩激肽，P物質（6）胸腺激素；胸腺素，胸腺肽，胸腺血清因子第四張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月2、多肽類細胞生長調節因子 包括表皮生長因子(EGF)，轉移因子(TF)，心鈉素(ANP)等。3、含有多肽成分的組織制劑 這是一類臨床療效確切，但其中所含的具體有效成分還不十分明了的制劑，主要包括骨寧、眼生素、血活素、氨肽素、婦血寧、蜂毒、蛇毒、安胎素、神經營養素、胎盤提取物、花粉提取物、脾水解物、肝水解物、心臟激素等。第五張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月（二）蛋白質藥物 蛋白質藥物可

4、分為蛋白質類激素、血漿蛋白質、蛋白質類細胞生長調節因子、膠原蛋白等。主要蛋白質類藥物有以下幾種：1.蛋白質激素（1）垂體蛋白激素-生長素，催乳素，促甲狀腺素，促黃體生成激素，促卵泡激素（2）促性腺激素-人絨毛膜促性腺激素(HCG )，絕經尿促性腺激素，血清促性腺激素（3）胰島素及其它激素生長素釋放抑制因子，是一種人腦激素，治療肢端肥大癥，50萬個羊腦提取5mg.工程菌：7.5L培養液可得到5mg.肢端肥大癥第六張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月4.粘蛋白: 胃膜素，硫酸糖肽，血型物質A和B等。5.膠原蛋白: 明膠，阿膠6.堿性蛋白: 硫酸魚精蛋白7.蛋白酶抑制劑:胰蛋白酶抑制劑，大豆胰

5、蛋白酶抑制劑8.植物凝集素:PHA， ConA3.蛋白質類細胞生長調節因子干擾素、 、 （IDN）,白細胞介素（116）（IL）神經生長因子等2.血漿蛋白質白蛋白，纖維蛋白溶酶原，血纖蛋白等 硫酸魚精蛋白是一種強堿，能與強酸性肝素鈉或肝素鈣形成穩定的鹽而使肝素失去抗凝作用。抗肝素藥。用于因注射肝素過量所引起的初出血.第七張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 FDGF, IL, CSF, IFN, EPO, hGH的中文名稱IFN：干擾素IL：白細胞介素 hGH：生長激素FDGF：成纖維細胞衍化生長因子 CSF：克隆刺激因子 EPO：紅細胞生成素第八張，PPT共九十六頁，創作于2022年6

6、月二、多肽和蛋白質類藥物特點 1) 基本原料簡單易得 多肽和蛋白質類藥物主要以20種天然氨基酸為基本結構單元依序連接而得,代謝物氨基酸為人體生長的基本營養成分,可通過農產品發酵而制備。2)藥效高，副作用低, 不蓄積中毒 多肽和蛋白質類藥物本身是人體內源性物質或針對生物體內調控因子研發而得，通過參與,介入,促進或抑制人體內或細菌病毒中生理生化過程而發揮作用,副作用低,藥效高,針對性強，不會蓄積于體內而引起中毒。 第九張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月3)用途廣泛，品種繁多，新型藥物層出不窮多肽和蛋白質類藥物是目前醫藥研發領域中最活躍, 進展最快的部分，是二十一世紀最有前途的產業之一。將2

7、0種基本氨基酸按不同序列相互連接, 可得到品種繁多,可用于治療各種類型疾病的多肽和蛋白質類藥物。眾多新型多肽和蛋白質類藥物在治療艾滋病，癌癥，肝炎，糖尿病，慢性疼痛效果顯著。 4) 研發過程目標明確,針對性強借助生命科學領域取得的大量研究成果, 包括對各類疾病發病機理的揭示, 對體內各種酶, 輔酶, 生長代謝調節因子的深入認識, 可以針對性開展多肽和蛋白質類藥物的研發。 第十張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月多肽和蛋白質類藥物研發技術與方向1) 化學合成方法2) 改造生物活性多肽及現有多肽藥物3) 提高活性多肽及現有多肽藥物檔次4) 針對具生物活性的多肽天然產物研發5) 生物技術制備多

8、肽和蛋白質藥物第十一張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月三、多肽及蛋白質類藥物的生產方法（1）化學合成法： 化學合成法只能生產少部分多肽類藥物。化學合成法借助化學催化劑，按一定的氨基酸序列秩序形成肽鍵。蛋白質藥物一般具有復雜的空間結構，而形成這些空間結構還需要一些特殊的細胞因子參與起輔助作用，這些細胞因子是化學合成過程中無法提供的，所以化學合成不能用于生產相對復雜的蛋白質類藥物。 1953年，人類用化學合成法合成了有生物活性的多肽-催產素。（1）化學合成法：（2）天然動植物及重組動植物提取法（3）微生物及重組微生物發酵法第十二張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月（2）天然動植物及重

9、組動植物提取法 通過生化工程技術，從天然動植物中分離純化。由于天然動植物中的有效成分含量過低，雜質太多，引起人們對重組動植物的重視。 重組動植物只通過基因工程技術手段，將藥物基因或能對藥物基因起調節作用的基因轉導入動植物細胞，以提高動植物合成藥用成分的能力，再經過生化分離，制得生物制品。 t-PA(tissue-plasminogen activator)譯成中文為組織纖溶酶原激活劑，人體內自然存在，同時也是臨床上用于急性心肌梗死的一種生物蛋白藥物，有18個半胱氨酸，9對二硫鍵 第十三張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月t-PA組織型纖溶酶原激活劑的轉基因羊第十四張，PPT共九十六頁，創

10、作于2022年6月（3）微生物及重組微生物發酵法 通過基因工程菌發酵生產多肽和蛋白質藥品，生產中期短、成本低、產品質量高。 通過基因工程技術手段，把人體細胞內含有的合成某一多肽或蛋白質的基因分離出來，在結合一定的載體，轉入特定的微生物細胞，通過微生物細胞將該多肽或及蛋白質的基因表達出來，以生產該類藥品用于臨床。 目前，世界上生產的多肽和蛋白質藥品，絕大多數均經過此方法生產。第十五張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月第二節 動植物提取法生產多肽和蛋白質類藥物一、概述（一）材料的選擇 蛋白質類藥物的來源有動植物組織和微生物等，原則是要選擇富含所需蛋白質多肽成分的，易于提取的無害生物材料。 對

11、天然蛋白質類藥物，為了提高質量、產量和降低生產成本，對原料的種屬，發育階段、生物狀態、來源、解剖部位、生物技術產品的宿主菌或細胞都有一定要求，使得純化工作相對容易。第十六張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 (1)種屬： 牛胰含胰島素單位比豬胰島素多，牛為4000IU/Kg胰臟，豬為3000IU/Kg胰臟.抗原性豬比牛低。豬與人胰島素相比，只有1個氨基酸差異，而牛有3個氨基酸差異。（2）發育生長階段： 幼年動物的胸腺比較發達，老齡后逐漸萎縮，因此胸腺原料必須采用幼齡動物。 肝細胞生產因子是從肝細胞分化最旺盛階段的胎兒、胎豬或胎牛肝中獲得的。若用成年的動物，必須經過肝臟部分切除手術后，才能

12、獲得富含肝細胞生長因子的原料。豬胰臟牛胰臟第十七張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月（3）生物狀態： 動物飽食后宰殺，胰臟中胰島素含量增加，對提取胰島素有利，但膽囊收縮素的分泌是膽汁排空，對膽汁收集不利。（4）原料來源： 血管舒緩素可分別從豬胰臟和豬顎下腺中提取，而穩定性以豬顎下腺來源為好，因其不含蛋白質水解酶。 第十八張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 （6）對生物技術產品宿主菌或細胞的要求： 大腸桿菌的產品提取大多要求破壁，有些可能會產生毒素。 枯草桿菌和酵母菌雖然可克服上述毛病，但表達的蛋白質成分有缺乏糖基化等翻譯及修飾的缺陷。 動物細胞較好，如果用腫瘤細胞要考慮其安全性。

13、（5）原料解剖學部位： 豬胰臟中，胰臟尾部含激素較多，而胰臟頭部分含消化酶較多。如果分別摘取則可提高各產品收得率。 胃膜素以采取全胃粘膜為好，胃蛋白酶則以采取胃底部粘膜為好，因胃底部粘膜富含消化腺。 豬胃第十九張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月(二)蛋白質類制品的分離純化方法(1)根據分子大小輕重設計的方法。如離心分離法、篩膜分離法、凝膠過濾法等。(2)根據溶解度大小分離的方法、如鹽析法、有機溶劑沉淀法、共沉淀法、選擇性沉淀法、等電點沉淀法等。(3)按分子所帶正負電荷多少分離的方法，如離子交換分離法、電泳分離法、聚焦層析法等。(4)按穩定性差異建立的分離方法，如選擇性熱變性法表面變性法

14、等。(5)按親和作用的差異建立的分離方法，如親和層析法等.第二十張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月二、主要多肽類藥物的制備1、胸腺素（thymocin） 胸腺位于胸骨后面，緊靠心臟，呈灰赤色，扁平橢圓形，分左、右兩葉，由淋巴組織構成。青春期前發充良好，青春期后逐漸退化，為脂肪組織所代替。 胸腺是造血器官，分泌胸腺素，能產生淋巴細胞，并運送到淋巴結和脾臟等處。這種淋巴細胞對機體的細胞免疫具有重要作用。 生長激素和甲狀腺素能刺激胸腺生長，而性激素則促使胸腺退化。第二十一張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 人體和動物都有免疫系統，包括特異性免疫和非特異性免疫，其中特異性免疫又分為體液

15、免疫系統和細胞免疫系統。當某些外源生物（如細菌）或生物大分子（如蛋白質），也叫抗原，進入動物體后，會刺激動物體本能地產生相應的抗體，引起免疫應答，從而將進入的外源生物或蛋白質分解或清除。 細胞免疫主要指機體受到異己物質抗原的刺激后，一類小淋巴細胞依賴胸腺的T細胞發生增生、分化，直接攻擊靶細胞或間接地釋放一些淋巴因子從而使機體達到免疫的過程。體液免疫則是當機體受到抗原刺激后，來源與骨髓的小淋巴細胞B細胞（即B型淋巴細胞）進行增生并分化為漿細胞，進而合成各類免疫球蛋白（即抗體），然后在體液中發揮免疫作用的過程。第二十二張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 T淋巴細胞來源于骨髓的多能干細胞（胚

16、胎期則來源于卵黃囊和肝）。在人體胚胎期和初生期，骨髓中的一部分多能干細胞或前T細胞遷移到胸腺內，在胸腺激素的誘導下分化成熟，成為具有免疫活性的T細胞。 T淋巴細胞與激活的血小板 T淋巴細胞第二十三張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月嗜中性粒細胞Neutrophil嗜中性粒細胞Neutrophil嗜中性粒細胞Neutrophil嗜中性粒細胞Neutrophil嗜中性粒細胞Neutrophil嗜酸性粒細胞Eosinophil嗜酸性粒細胞Eosinophil嗜酸性粒細胞Eosinophil嗜酸性粒細胞Eosinophil嗜堿性粒細胞Eosinophil嗜堿性粒細胞Eosinophil嗜堿性粒細

17、胞Eosinophil單核細胞Monocyte嗜堿性粒細胞Eosinophil嗜堿性粒細胞Eosinophil淋巴細胞Lymphocyte第二十四張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月胸腺素（thymosin;thymin）， -是由胸腺分泌的一類促細胞分裂的含28個氨基酸殘基的具有生理活性的多肽激素。可誘導造血干細胞發育為T淋巴細胞，具有增強細胞免疫功能和調節免疫平衡等作用。 -臨床上常用的胸腺肽是從小牛胸腺發現并提純的有非特異性免疫效應的小分子多肽。第二十五張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月（1）結構和性質 胸腺素組分5是由80熱穩定的40-50種多肽組成的混合物，分子量在10

18、0015000之間，等電點在3.59.5之間。 胸腺素組分5 胸腺素組分5這一名稱來源于生產加工過程，即以小牛胸腺為原料，采用一定的工藝提取純化得到的第5組分。區-pI5.0以下多肽。 區-pI5.07.0以下多肽區-pI7.0以上多肽（種類較少） 根據等電點不同，可以將胸腺素組分5中所含多肽分為、 、 三個區， 胸腺素組分5中，所含的多肽中并非每一種都有免疫活性，有活性的稱為胸腺素，如胸腺1、 5 、 7 ，無活性的稱為多肽，如1 等。第二十六張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月胸腺素組分5 作用與用途：作為免疫調節劑原發性和繼發性免疫缺陷病，如反復上呼吸道感染等；自身免疫病，如肝炎，

19、腎病，紅斑狼瘡，類風濕關節炎、重癥肌無力等；變態反應性疾病，如支氣管哮喘等；細胞免疫功能減退的中年人和老年人疾病，并可抗衰老。腫瘤的輔助治療。第二十七張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月（2）生產工藝胸腺絞碎胸腺碎塊生理鹽水離心提取提取液（組分1）加熱，去雜蛋白80，15min上清夜（組分2）丙酮沉淀10 丙酮粉（組分3）pH7.0 磷酸鹽緩沖液上清夜（組分4）加硫酸銨0.5飽和度調pH4鹽析物超濾pH8 TrisHCl超濾液Sephadex G25脫鹽，干燥胸腺素（組分5）硫酸銨0.25飽和度第二十八張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月二、主要蛋白質類藥物的制備一、人血漿白蛋白制

20、劑的制備（preparation of human blood plasma albumin）（1）結構和性質 （structure and character） 人血是一種紅色混濁的、具有一定腥味與粘滯性的液體。用適當的抗凝劑除去其中的有形成分（如紅血球）而得到淡黃色、半透明的液體叫血漿。第二十九張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月血漿中除含有大量的水分以外，還含有血漿蛋白等溶質。白蛋白（albumin）又稱清蛋白，白蛋白是血漿蛋白中含量最高（55%）、分子量最小、分子數最多的一類蛋白質。白蛋白對治療因失血、創傷、燒傷等引起的休克，腦水腫和大腦損傷性所致的腦壓增高，防止低蛋白血癥，肝硬

21、化或者由腎病引起的水腫與腹水等嚴重疾病具有良好療效。白蛋白為單鏈分子，由584個氨基酸殘基組成，N端為天門冬氨酸，C端為亮氨酸，分子量為6.6104，在離子強度為0.15時，pI為4.7，易溶于水，在60%硫酸銨飽和度以上沉淀。對酸較穩定，受熱變性。第三十張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月從人體中分離的白蛋白有兩種：一種是從健康人血漿中分離制得的人血清白蛋白，另一種是從健康產婦胎盤中分離制得的胎盤白蛋白。 二者作用相同，后者價格低于前者，且用量多于前者，但目前已停產。 血+混合抗凝劑 草酸銨草酸鉀離 心上清血漿總蛋白：6.2-7.9%白蛋白：3.8-4.8%水：90-92%現常用肝素、

22、檸檬酸鈉 血（無抗凝劑）自然凝固分離出血清（無纖維蛋白酶原、凝血因子等）第三十一張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月（2）白蛋白生產工藝路線 利凡諾,NaHCO3pH8.6,離心分離絡合物蒸餾水，NaCl，HClpH1.281.45 ，40解離，離心離心液濃 縮超 濾濃縮液滅活病毒 65，1h； 60，10h熱處理液除菌除菌過濾白蛋白液干燥冷凍干燥白蛋白去雜蛋白人血漿（%）乳酸依沙吖啶上清液鹽析物 濃縮液 處理液 人血丙種球蛋白哦1mol/LHCl調PH 7.0 (NH4)2SO4鹽析 超 濾 除鹽26 沉降除菌過濾解離后pH至5.5-6.0離心分離出上清液凍干品白色疏松物體將解離混合物

23、溶液用0.5mol/L HCl調節pH至5.5-6.0，加NaCl至0.15%0.2%，充分攪拌、40過夜解離（8-10h）。25白蛋白含量占95%以上，水分1%，水溶后pH為6.6-7.2，硫酸銨殘量0.01%，細菌學和熱原質檢測合格。 第三十二張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月（3）工藝要點 絡合對于絡合所要求的pH值，可以略高些，這樣，白蛋白絡合完全，絡合物形成一個相當硬的塊，傾倒上清液方便，損失少。但不能太高，以防絡合血漿中的其它蛋白，影響解離與白蛋白制劑的純度。若pH值偏低，絡合不完全，絡合物松軟，甚至成湯狀，不利于傾去上清液。血漿攪拌用NaHCO3調節pH至8.5-8.7之

24、間，緩慢加入與血漿等體積的2.3%利凡諾溶液，邊加邊攪拌，充分絡合后。靜置24h，分離上清與絡合物沉淀。第三十三張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月解離生產中要嚴格控制溶液的溫度。25左右室溫，絡合物形成一個硬塊，利于去上清和解離。溫度太低，雖然不影響絡合，但絡合物呈稀糊狀，傾倒上清液時常會丟失部分絡合物，而且絡合物內殘存較多的利凡諾的水溶液。解離溫度要維持在40左右，是解離反應的最適溫度。解離液的pH值在1.281.45之間，解離效果良好。絡合物中加入解離液并攪拌均勻后，將解離后混合溶液pH值控制在6.0左右較理想。第三十四張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月以解離后解離混合溶液

25、pH值決定加入解離液的體積。解離后解離混合液的pH值高于6.5時，表明加入的解離液少了，有部分絡合物未被解離開；低于5.85，表明加入的解離液多了，解離過度。這兩種情況下，解離效果均不佳。在沉淀中加約二分之一血漿體積的滅菌蒸餾水解離所得到的絡合物沉淀，將解離混合物溶液用0.5mol/L HCl調節pH至5.5-6.0，加NaCl至0.15%0.2%，充分攪拌、40過夜解離（8-10h）。第三十五張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月去雜蛋白：白蛋白具有生物活性，凡是使蛋白質變性的溫度都會使白蛋白變性。65條件下變性1h，離心分離出上清液。熱處理：在600.5條件下處理10h，滅活病毒。 檢

26、驗方法：凍干品白色疏松物體。白蛋白含量占95%以上，水分1%，水溶后pH為6.6-7.2，硫酸銨殘量0.01%，細菌學和熱原質檢測合格。 白蛋白含量占95%以上，水分1%，水溶后pH為6.6-7.2，硫酸銨殘量0.01%，細菌學和熱原質檢測合格。 第三十六張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月二、絨膜促性激素（HCG）的制備（1）HCG的性質（character of HCG） HCG(human chorionic gonadotrophin)即人絨毛膜促性腺激素，是由胎盤的滋養層合體細胞分泌的一種糖蛋白，它是由和二聚體的糖蛋白組成。易溶于水，pI為3.2-3.3。婦女妊娠45-70天，

27、尿中HCG含量可達30000-50000IU/24h。 治療女性不育癥，神經性皮炎。男性性功能過低癥和隱睪癥，子宮出血和習慣性流產。臨床用途：第三十七張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月孕婦尿粗制尿：苯甲酸：乙醇/1：0.075：5）用HCl調pH 4-5HCG(粗品）提取NaAC pH4.8提取液透析水，5以下透析內液吸附（CM SepharoseCI-6B）羧甲基瓊脂糖凝膠吸附后交換劑洗滌，峰NaAC,pH4.8,pH5.9洗滌后交換劑洗脫NaAC,pH8.5洗脫液冷凍干燥 30HCG精品 溶解蒸餾水，10以下HCG溶液透析pH6.8, 5以下透析內液吸附羥基磷灰石，pH6.8吸附物

28、解吸0.5mmol/L,1.0mmol/L磷酸鹽緩沖液（PBS),pH6.8解吸液干燥30HCG純品（2） HCG生產工藝路線攪拌1h靜置2-3h加10倍量的41/15 mol/LpH8.5、0.2mol/L的醋酸鹽緩沖液洗脫，得到的第3峰即為HCG。 吸附物在攪拌下加入95%乙醇至苯甲酸全部溶解有絮狀沉淀產生醋酸鹽吸附粗品苯甲酸乙醇飽和液第三十八張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月孕婦尿，用HCl調節PH=4-5，加入苯甲酸-乙醇飽和液（孕婦尿：苯甲酸乙醇飽和液：乙醇 =1：0.075：5），攪拌1小時，靜置2-3小時。上清液1+上清液2合并，在5以下，用蒸餾水進行透析。取透析內液進行

29、離子交換層析。先將CM-Sepharose柱用0.01mol/L的醋酸鹽緩沖液進行平衡，將樣品加到層析柱上。HCG粗品中加入10倍量的4、0.067mol/L、PH=4.8的醋酸鹽緩沖液，攪拌提取4小時，離心，取上清液1。離心后的沉淀物再用10倍量的4、0.067mol/L、PH=4.8的醋酸鹽緩沖液提取，取上清液2。過濾，棄濾液，得沉淀吸附物。攪拌下加入95%乙醇，直到苯甲酸全部溶解為止，即有絮狀沉淀物產生。靜置過夜，離心，沉淀物用95%的乙醇和丙酮洗滌，干燥，得HCG粗品。先用0.01mol/L、PH=4.8的醋酸鹽緩沖液洗出洗脫峰-1再用0.01mol/L、PH=5.9的磷酸鹽緩沖液沖出

30、洗脫峰-2再用0.2mol/L、PH=8.5的醋酸鹽緩沖液沖出洗脫峰-3從洗脫峰-3上得到的就是HCG。-30以下冷凍干燥，得HCG精品HCG精品在10以下的蒸餾水中溶解，溶解液用0.5mol/L、PH=6.8的磷酸鹽緩沖液進行透析。透析內液進行羥基磷灰石柱層析。步驟：（1）安裝羥基磷灰石柱層析柱。（2）用0.5mol/L、PH=6.8的磷酸鹽緩沖液平衡。（3）樣品上柱先用0.5mol/L、PH=6.8的磷酸鹽緩沖液洗脫，得峰-1再用1.0mol/L、PH=6.8的磷酸鹽緩沖液洗脫，得峰-2從洗脫峰-2上得到的就是HCG純品。-30以下冷凍干燥，得HCG產品。第三十九張，PPT共九十六頁，創作

31、于2022年6月（3）工藝要點吸附粗品：HCl調孕婦尿至pH4-5，加苯甲酸乙醇飽和液（孕婦尿：苯甲酸乙醇飽和液：乙醇 = 1:0.075:5）攪拌1h靜置2-3h，過濾，棄濾液，得吸附物。在攪拌下加入95%乙醇，至苯甲酸全部溶解有絮狀沉淀產生，靜置過夜，離心，沉淀用95%乙醇和丙酮洗滌，干燥得粗制品。 提取：加10倍量的41/15 mol/L、pH4.8醋酸鹽緩沖液，攪拌4h，離心，取上清液。沉淀再提取2h。合并兩次提取液，棄去沉淀。第四十張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月離子交換層析：CM-Sepharose柱（離子交換柱）用0.01mol/L的醋酸鹽緩沖液平衡后樣品上柱。依次用p

32、H4.8、0.01mol/L的醋酸鹽緩沖液和pH5.9、0.01mol/L的磷酸鹽緩沖液洗滌出兩個峰（雜質）。再用pH8.5、0.2mol/L的醋酸鹽緩沖液洗脫，得到的第3峰即為HCG。羥基磷灰石柱層析：柱用pH6.8、0.5mmol/L磷酸鹽緩沖液平衡。樣品用pH6.8、0.5mmol/L的磷酸鹽緩沖液進行層析上柱。洗脫先用pH6.8、0.5mmol/L再用pH6.8 1.0mmol/L的磷酸鹽緩沖液。得到I、II活性峰。然后冷凍干燥。HCG純品的比活性為10,000-12,000IU/mg蛋白質。羥基磷灰石：又稱羥磷灰石，Ca5(PO4)3(OH)） 其中OH-基能被氟化物、氯化物和碳酸根

33、離子代替，生成氟基磷灰石或氯基磷灰石,而鈣離子可以被多種金屬離子通過發生離子交換反應代替，形成對應金屬離子的M磷灰石（M代表取代鈣離子的金屬離子）。在水相溶劑中不溶，可用做蛋白質純化的吸附劑。第四十一張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月寫成（Ca10(PO4)6(OH)2）的形式以突出它是由兩部分組成的：羥基與磷灰石。羥磷灰石是人體骨骼組織的主要無機組成成分。植入體內后，鈣和磷會游離出材料表面被身體組織吸收，并生長出新的組織。有研究證明羥磷灰石的晶粒越細，生物活性越高。牙齒表面的琺瑯質的主要成份亦是羥磷灰石。第四十二張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月三、動物來源生物制品制備的實例

34、 胰島素廣泛存在于人和動物的胰臟中，正常人的胰臟約含有200萬個胰島，胰島由-、-和-三種細胞組成，其中-細胞制造胰島素，-細胞制造胰高血糖素和胰抗脂肝素，-細胞制造生長激素抑制因子。1、胰島素（insulin）的制備 胰島素在-細胞中開始時是以活性很弱的前體胰島素原存在的，進而分解為胰島素進入血液循環。顯微鏡下的胰島 - 細胞第四十三張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月促進合成代謝第四十四張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月胰島素的性質： 胰島素由由二條鏈、51個氨基酸組成，A鏈21個氨基酸、B鏈30個氨基酸。胰島素是所有蛋白質中研究最清楚的一個蛋白。 不同種屬動物的胰島素分子結

35、構大致相同，主要差別在A鏈二硫橋中間的第8、9和10位上的三個氨基酸及B鏈C末端人的是蘇氨酸，豬的是丙氨酸,抗原性比其他來源的胰島素要低。 B鏈接肽 A21B30第四十五張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 牛胰島素的分子量為5733，豬為5764，人為5784。 胰島素的等電點為5.30-5.35。 胰島素在pH4.56.5范圍內幾乎不溶于水，易溶于稀酸或稀堿溶液；在80%以下乙醇或丙酮中溶解；在90%以上乙醇或80%以上丙酮中難溶；在乙醚中不溶。在高濃度鋅的溶液中，pH68時胰島素溶解度急劇下降 。 第四十六張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月（2）工藝路線豬胰臟提取3h86%

36、-88%乙醇， 5%草酸，提取液堿化氨水，pH8-8.4堿化液酸化硫酸，pH3.6-3.8,5 酸化液濃縮30 以下，減壓濃縮至濃縮液去脂速熱速冷去脂溶液鹽析NaCl,pH2-2.5鹽析物蒸餾水、丙酮、氨水（pH4.24.3）去除酸性蛋白濾液鋅沉淀氨水，Zn（Ac）2，pH6.0沉淀除堿性蛋白，結晶Zn（Ac）2，丙酮、氨水，pH8.0，5以下，檸檬酸,用氨水調pH6.0,補加丙酮，結晶洗滌，干燥水、丙酮、乙醚胰島素精品豬胰島素生產的工藝路線 沉淀10-15比重為1.04-1.06離心去除酸性質白沉淀4放置過夜；收集沉淀。 ，6.5%2%放置3-4d慢速攪拌3-5h使結晶析出結晶完全3.6%醋

37、酸鋅溶液20%第四十七張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月工藝流程圖示取上清液進行鋅沉淀上清液用氨水調節PH=6.2-6.4加入3.6%的醋酸鋅溶液，加入量為溶液量的20%再用氨水調節PH=6.04下，放置過夜收集沉淀，用冷丙酮洗滌洗滌后的沉淀物進行干燥，得胰島素粗品。鹽析物除酸性蛋白操作鹽析物加入7倍量的蒸餾水進行溶解再加入3倍量的冷丙酮，用氨水調節PH=4.2-4.3補加丙酮。使得丙酮：水=3：7攪拌后過夜，離心，除去酸性蛋白質沉淀濃縮液迅速升溫，然后迅速降溫，除去脂肪。去脂液用NaCl溶液進行鹽析，鹽析外液PH控制在PH=2.0-2.5之間。提取液用PH=8.0-8.4的氨水堿化4

38、小時，除去沉淀。堿化液用PH=3.6-3.8的硫酸，在5時酸化4小時，除去沉淀。酸化液，在30下進行減壓濃縮至比重為1.04-1.06。豬胰臟絞成碎末，加入2.3-2.6倍的86%-88%的乙醇+5%的草酸，10-15之間提取3小時。胰島素粗品除堿性蛋白質，每克粗品加入2%的檸檬酸溶液50ml+6.5%的醋酸鋅溶液2ml+丙酮16ml然后再用冰水稀釋至100ml，使樣品充分溶解。冷卻至5以下，用氨水調節PH=8.0，過濾，除去堿性蛋白質沉淀。濾液進行結晶操作濾液用10%的檸檬酸溶液調節PH=6.0補加丙酮，使得溶液中的丙酮含量達到16%慢速攪拌3-5小時，使結晶析出再在5左右放置34天，使結晶

39、完全析出收集結晶，用丙酮、乙醚反復脫水，真空干燥，得結晶胰島素純品。第四十八張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月（3）工藝要點提取：絞碎胰臟，加2.3-2.6倍的86%-88%乙醇和5%的草酸，提取3h。濃縮：30減壓濃縮至比重為1.04-1.06為止。除酸性蛋白：加入7倍量的蒸餾水溶解，再加3倍量冷丙酮，用氨水調pH至4.2-4.3，補加丙酮，離心去除酸性質白沉淀。 鋅沉淀：用氨水調pH為6.2-6.4，加入3.6%醋酸鋅溶液（20%濃度），再用氨水調pH至6.0，4放置過夜；收集沉淀。 除堿性蛋白、結晶：每克加冰冷的2%檸檬酸溶液50mL，6.5%醋酸鋅溶液2mL，丙酮16mL，用冰

40、水稀釋至100mL，使充分溶解；冷至5以下，用氨水調至pH至8.0，過濾；濾液用10%檸檬酸溶液調pH6.0，補加丙酮，慢速攪拌3-5h使結晶析出；再轉入5左右放置3-4d，使結晶完全；收集結晶，用丙酮、乙醚脫水后，真空干燥，即得結晶胰島素。第四十九張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月3、注解（1）離體后，蛋白水解酶類能分解胰島素，使之失活。因此，要立即深凍，先在-30以下急凍后轉入-20保存備用。如用液氮或干冰速凍，效果更好。在胰臟中，胰尾部分胰島素含量較高，如單獨使用可提高收率.（2）胰島素結構修飾 ，可對胰島素分子進行修飾和改造，以改變某些性質，如提高降血糖能力、延長體內半衰期、抗

41、熱變性、抗蛋白水解酶的降解等。 （3）酶促半合成人胰島素 。經胰蛋白酶的轉酰胺作用，將豬胰島素轉化為人胰島素B30。再用離子交換層析純化，可得到高純度人胰島素。 （4）重組DNA技術制造人胰島素，人工合成的人胰島素克隆到大腸桿菌中生產人胰島素。 第五十張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 蛋白質工程技術改造的速效胰島素機理是 （ D ） A. 將豬胰島素B30位改造為丙氨酸，使之和人胰島素序 列一致 B. 將A21位替換成甘氨酸，B 鏈末端增加兩個精氨酸，使之在pH4溶液中可溶 C. 將B29位賴氨酸用長鏈脂肪酸修飾，改變其皮下擴散和吸收速度 D. 將人胰島素B28位與B29位氨基酸互換

42、，使之不易形成六聚體第五十一張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月第三節 基因工程法生產多肽和蛋白質類藥物一、生產用微生物的來源及發酵特性。1.大腸桿菌宿主菌特性優點：大腸桿菌培養方便、操作簡單、成本低廉。缺點： 在通常情況下，細菌的RNA聚合酶不能識別真核的啟動子；許多真核基因的蛋白質產物需要經過翻譯后的加工修飾，如正確的折疊和組裝，而細菌中通常并沒有這樣的修飾機制，從而可能導致真核基因在大腸桿菌中的翻譯產物無法產生有活性的蛋白，以包涵體形式存在需要分離純化后將肽鏈散開后重新進行折疊；再有，外源真核基因所表達的蛋白質分子往往能夠被細菌的蛋白酶識別，并被當做“異已分子”降解掉。第五十二張，

43、PPT共九十六頁，創作于2022年6月大腸桿菌中，常用表達調控方式有溫度型啟動子和乳糖操縱子型啟動子。溫度型啟動子來源于噬菌體，受cI阻礙蛋白抑制。cI蛋白由CIts857基因（857bp）編碼，該基因的表達與溫度有關。當溫度處于低溫（一般37以下）時，該基因能活躍的表達出cI蛋白，抑制住溫度型啟動子啟動的基因的表達。一旦溫度升高到42 ，該基因表達關閉，不合成cI蛋白，解除溫度型啟動子啟動的基因的表達，從而啟動位于其下游的外源基因的表達。國內重組干擾素工程菌正式利用此原理進行表達控制。 一般，將細胞的生長和外源基因的表達分成兩個階段，是表達產物不會影響細胞的生長，當宿主細胞的數量達到飽和時，

44、在進行基因產物的誘導合成，以減低宿主細胞的代謝負荷。第五十三張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月乳糖操縱子型啟動子必須經過乳糖誘導才能啟動。當達到所需工程菌密度后，向培養基中加入乳糖或乳糖類似物，對其進行誘導，就可開啟外源基因的表達。注意：加入乳糖或乳糖類似物，對其進行誘導時培養基中不能含有葡萄糖，葡萄糖的存在有抑制作用。國內很多以大腸桿菌為宿主菌的工程菌，均采用此法進行外源基因表達控制。第五十四張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月2.酵母宿主菌特性 酵母宿主菌常用巴斯德畢赤酵母，也稱甲醇酵母。其可利用甲醇為唯一碳源進行生長代謝，因為該酵母細胞內存在甲醇氧化酶基因AOX1，該基因屬

45、于誘導型，其啟動子只有在以甲醇為唯一碳源前提下，才能正確表達甲醇氧化酶基因AOX1并翻譯為醇氧化酶。 將需要表達的外源基因置于含有AOX1啟動子的載體上，作為控制。 酵母可在一般培養基是上生長，當到一定密度后，其他碳源耗盡，加入甲醇，酵母可表達外源基因，合成所需的蛋白藥物成分巴斯德畢赤酵母第五十五張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 Pichia.pastoris(巴斯德畢赤酵母)酵母菌體內無天然質粒，所以表達載體需與宿主染色體發生同源重組，將外源基因表達框架整合于染色體中以實現外源基因的表達。包括啟動子、外源基因克隆位點、終止序列、篩選標記等。表達載體都是穿梭質粒，先在大腸桿菌復制擴增

46、，然后被導入宿主酵母細胞。為使產物分泌胞外，表達載體還需帶有信號肽序列。 染色體重組第五十六張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 甲醇酵母細胞表達的蛋白質藥物，與人體的蛋白質相近，有利于藥物使用后的免疫原性問題。這主要是因為 - 甲醇酵母存在類似于人體細胞那樣的蛋白質修飾系統，例如，能對蛋白質藥物進行N-和O-糖基化修飾，能主動切除原核細胞表達蛋白質所特有而真核生物不具有的甲硫氨酸。第五十七張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月（二）干擾素(interferon, IFN) 干擾素（IFN）是由病毒和其他種類的干擾素誘導劑，刺激網狀內皮系統（人體免疫系統的一種）、巨噬細胞、淋巴細胞以

47、及體細胞所產生的一種糖蛋白。這種蛋白具有多種生物活性，包括抗增殖、免疫調節、抗病毒和誘導分化作用。 干擾素（IFN）是一種廣譜抗病毒劑，并不直接殺傷或抑制病毒，而主要是通過細胞表面受體作用使細胞產生抗病毒蛋白，從而抑制乙肝病毒的復制；同時還可增強自然殺傷細胞（NK細胞natural killer cell，NK ）、巨噬細胞和T淋巴細胞的活力，從而起到免疫調節作用，并增強抗病毒能力。第五十八張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月第五十九張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月型干擾素（IFN）來源于白細胞，也有部分淋巴細胞能合成，簡寫為IFN-型干擾素（IFN）來源于成纖維細胞及部分類淋

48、巴細胞，簡寫為IFN-型干擾素（IFN）來源于T細胞，簡寫為IFN- 根據干擾素的細微結構還可以對其分亞類，例如IFN-可再分為IFN-b，IFN-a，IFN-b等。 干擾素（IFN）是一組具有多種功能的活性蛋白質（主要是糖蛋白），是一種由單核細胞和淋巴細胞產生的細胞因子。它們在同種細胞上具有廣譜的抗病毒、影響細胞生長，以及分化、調節免疫功能等多種生物活性。有型、 型和型及許多亞型。第六十張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月作用與用途 由于干擾素的抗病毒作用，抗細胞分裂及免疫調節作用，可用于：（1）用于病毒性疾病、普通感冒，皰疹性角膜炎，帶狀皰疹， 水痘、慢性活動性乙型肝炎。（2）用于惡

49、性腫瘤、成骨肉瘤，乳腺癌，多發性骨髓瘤， 黑色素瘤、淋巴瘤、白血病等。（3）用于由于病毒引起 的良性腫瘤，可控制 疾病發展。第六十一張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月2.生產工藝 干擾素生產的傳統方法是- 對能誘導產生干擾素的細胞進行培養，例如人白細胞、成纖維細胞、T淋巴細胞等，然后通過誘導劑進行誘導，然后進行分離除雜，獲得干擾素產品。 這方法由于要進行人的細胞培養，操作起來比較麻煩、產量低、成本高，因此，逐漸被現代的基因工程菌發酵所代替。第六十二張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月誘導產生干擾素生產工藝人白細胞啟動誘生100/ml人干擾素37，12h啟動白細胞正式誘生仙臺病毒3

50、7，12h白細胞培養物離心分離2500rpm粗制干擾素KSCN處理；HClpH3.5沉淀1乙醇除雜5 上清液1二次酸除雜蛋白；HClpH5.55.8上清液2沉淀分離；NaOHpH8.0沉淀2KSCN處理；PBS，pH5.2上清液3酸沉淀；HClpH3.0沉淀3溶解PBS，NaOHpH7.07.5溶解液透析透析液干擾素PBS（Na2HPO4-12H2O）磷酸鹽緩沖液 第六十三張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月工藝過程：1）分離灰黃層: 取獻血者血液（每份400ml）采入含抗凝血劑的塑料袋內，離心后分出血漿，小心吸取黃灰層，每份血可吸13-15ml，約為血中細胞的40-50，放置4冰箱過夜

51、。第六十四張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月2）氯化銨處理: 每份灰黃層加入30ml緩沖鹽水，在加入總體積9倍量的0.83的氯化銨溶液，混勻，4放置10min。然后離心20min，收集沉淀細胞，做成懸浮液，再用氯化銨處理一次，融解殘存的紅細胞。取沉淀的白細胞并懸浮于培養液中，置于冰浴，取樣作活細胞計數，用預溫培養液稀釋成107個/ml。培養液的基礎成分為Eagles培養基3）起動誘生: 取稀釋的細胞懸浮液加入白細胞干擾素，使其最后濃度為100/ml, 置37 水浴攪拌培養。4）正式誘生: 起動后的白細胞加入仙臺病毒（在10天年齡雞胚中培養48-72小時，收獲尿囊液），使其最后濃度為10

52、0-150血凝單位/ml，在37 攪拌培養過夜。5）收獲: 次日將培養物離心30min，吸取上清液即得粗制干擾素。第六十五張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 將粗制人白細胞干擾素加入硫氰化鉀0.5mol/L，用2mol/LHCl調pH=3.5，離心去上清液，得沉淀1。 沉淀1加入原體積1/5的冷乙醇（94%），離心去沉淀得上清液1。上清液1用HCl調pH=5.5，離心去沉淀，再HCl調pH=5.8，離心得上清液2和沉淀2。 沉淀2中加入原體積1/50的甘氨酸-HCl緩沖溶液（pH=2）溶解，檢測，得IFN1。上清液2用HCl調pH=8.0，用HCl調pH=5.5，得沉淀3， 沉淀3中加

53、入原體積1/50的0.1mol/L的PBS， 用0.5mol/L硫氰化鉀（pH=8）溶解，pH降至5.2，離心得上清液3和沉淀4.6）純化:將粗制人白細胞干擾素加入硫氰化鉀處理等。Na2HPO4-12H2O第六十六張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 沉淀4加入原體積1/25000，pH=8的0.1mol/L的PBS溶解，調pH=7-7.5，對PBS（pH=7.2）透析，過夜，離心收集上清液，檢測，得IFNB，上清液3用HCl調pH=3，離心的沉淀5，沉淀5中加入原體積1/5000，pH=8的0.1mol/L的PBS溶解，用NaOH調pH=7-7.5，對PBS（pH=7.2）透析，過夜，

54、離心收集上清液，檢測，得IFN-A。每份備灰黃層約能制備100萬單價的純化干擾素。 此法特點是一次純化量大，回收率高于60%，經濟，方便，易于普及， 效價克達到1.2 108 U/ml，比活力為2.2 106 U/mg（蛋白）。 IFN-A中干擾素含量占回首干擾素82%，比活力也比較高， IFN1的比活力較低（5 104 U/mg（蛋白），一般可作為外用滴鼻劑活滴眼劑。第六十七張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月基因工程干擾素的生產 1973年Cohen講兩種不同的DNA分子體外進行重組，并用大腸菌進行表達，是大量、廉價制備單組分干擾素成為可能。 1980年和1982年利用基因工程成功的

55、獲得IFN- IFN-， 和 IFN- 的cDNA，標志著第二代干擾素的誕生。 1987年，三種干擾素開始 大量工業化生產，并進入市場。第六十八張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 干擾素的基因文庫的構建一般是用誘導劑對可以產生干擾素的腫瘤細胞菌株進行誘導，從中取出mRNA，克隆及基因文庫的構建 通過相應的引物對干擾素的mRNA進行逆轉錄-PCR擴增，將其與一定的質粒相連接后用合適的宿主菌株進行培養，擴增即可。 以從Namalva細胞中克隆IFN- IFN-為例。第六十九張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月異硫氰酸胍（GITC）酚法提取RNA的原理如下： GITC（蛋白質變性劑）與

56、巰基乙醇共同作用抑制RNase(RNA水解酶)的活性； GIT與 十二烷基肌氨酸鈉 （Sarcosyl）作用使蛋白質變性，從而釋放RNA；酸性條件下DNA極少發生解離，同蛋白質一起變性被離心下來，RNA則溶于上清中。 將Namalva細胞用Senda病毒誘導后，用酚法提取mRNA 許多公司有現成的總RNA提取試劑盒,可快速有效地提取到高質量的總RNA。第七十張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 分離的總RNA可利用mRNA 3末端含有多聚(A)+ 的特點,當RNA流經oligo (dU)纖維素柱（U重復寡核苷酸 就是只有胸腺嘧啶組成的核苷酸鏈 ）時,在高鹽緩沖液作用下,mRNA被特異的吸

57、附在oligo(dU)纖維素上,然后逐漸降低鹽濃度洗脫,在低鹽溶液或蒸餾水中,mRNA被洗下。經過兩次oligo(dU)纖維素柱,可得到較純的mRNA。純化的mRNA在70%乙醇中-70可保存一年以上。 -屬于親和層析技術。因為Oligo dU與mRNA的PolyA尾巴可以發生特異性結合，利用二者的親和力可以分離mRNA。 第七十一張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月流經oligo (dU)纖維素柱純化及5%-20%(W/V)蔗糖密度梯度離心25000rpm，20hr后取6-18s的組分。用逆轉錄酶合成cDNA后，用DNA聚合酶合成DNA。用核酸酶S1切成平頭末端后，用5%-20%(W/

58、V)蔗糖密度梯度離心進行純化，取大于600bp的組分。合成引物5-CCTTCTGGAACTG-3,該序列是IFN- IFN-最長的不間斷保守序列，用其作引物克同時釣出IFN- IFN-。在T4激酶的作用下，用 -32P-ATP對其進行標記，并用SephadexG-25進行純化，可是得到標記后的cDNA。第七十二張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月將0.5g平頭末端DNA用末端轉移酶加上15個dC，并將2g質粒pBB322在Pst位點線性化，用末端轉移酶接上15個dG，在將兩則相連接，利用這種方法可產生Pst位點，利于從載體上再次切下cDNA。將產生的質粒轉化大腸桿菌HB101后，用微量板

59、培養。微量板培養第七十三張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 將微量板上的菌落轉移到纖維膜上，但菌落直徑長到2mm后，與事先分離的末端標記的cDNA37雜交2d。然后用50%甲酰胺，0.2SSC（1SSC為0.15mol/L NaCl, 0.15mol/L 檸檬酸鈉）室溫下洗膜3hr。 在上述雜交液中加入50g/ml poly(U), 10g/ml poly( I): poly( C) 進行雜交，用50%甲酰胺，1SSC洗脫后在室溫干燥，并于-70曝光，檢測細胞中質粒與cDNA雜交情況。第七十四張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月備注： 沉降系數（sedimentation coe

60、fficient）用離心法時，大分子沉降速度的量度，等于每單位離心場的速度。 或s=v/2r。s是沉降系數，是離心轉子的角速度（弧度/秒），r是到旋轉中心的距離，v是沉降速度。 沉降系數以每單位重力的沉降時間表示，并且通常為120010的-13次方秒范圍，10的-13次方這個因子叫做沉降單位s，即1s=10-13秒，如血紅蛋白的沉降系數約為410的-13次方秒或4s。大多數蛋白質和核酸的沉降系數在4s和40s之間，核糖體及其亞基在30s和80s之間，多核糖體在100s以上。第七十五張，PPT共九十六頁，創作于2022年6月 目前我國臨床上使用的干擾素品種有IFN-b，IFN-a，IFN-b等，