1、抗生素類藥物的分析1 概述2 -內酰胺類抗生素3 氨基糖苷類抗生素4 四環素類抗生素5 大環類酯類抗生素藥物分析抗生素優秀原料及制劑（原料）(*/1967）青霉素類36（ 13）10.31.83頭孢菌素類44（ 16）12.62.24氨基糖苷類38（14）10.91.93四環素類18（ 6）5.20.92大環內酯類43 （11）12.42.19其他（）169（ 61）48.68.59總計（）348（124）17.69中國藥典（2005年版二部）收載抗生素類藥物藥物分析抗生素優秀1 概述抗生素？抗菌藥物？抗微生物藥物？一、概念藥物分析抗生素優秀二、分類按抗菌譜分按化學結構分按作用機制分綜合分類藥

2、物分析抗生素優秀三、常規分析項目（一）性狀（二）鑒別試驗 理化方法、生物學方法。（三）檢查 影響產品穩定性的指標 控制雜質的指標 與臨床安全性密切相關的指標（四）效價測定（抗生素有效成分含量） 微生物檢定法、理化方法藥物分析抗生素優秀效價測定方法微生物檢定法以抗生素對微生物的抑制或殺傷程度為指標來衡量抗生素效價理化方法根據抗生素的分子結構特點，利用其特有的化學或物理化學性質進行測定特點適用于提純的、化學結構已明確的抗生素。操作簡便、省時、方法準確、一定專屬性特點靈敏度高；測定原理與臨床應用的要求一致；適用范圍廣. 操作步驟繁多，測定時間長,誤差較大.藥物分析抗生素優秀2 -內酰胺類抗生素-內酰

3、胺抗生素的發現 Alexander Fleming 發現接種青霉菌的培養物可產生抑制金黃色葡萄球菌生長的物質，1929年，他在英國圣瑪麗醫院宣讀一篇論文，引入“青霉素”(Penicilin)名稱并論述該物質具有非常明確的抗菌活性。1941年臨床證實青霉素對多種細菌感染有效。 Fleming 發現青霉素頭孢菌素C是Abraham于1948年發現。藥物分析抗生素優秀化學結構與性質鑒別試驗化學法、光譜法、色譜法特殊雜質檢查聚合物、有關物質和異構體、吸收度含量測定碘量法；硝酸汞電位滴定法；可見-紫外分光光度法；HPLC法基本內容藥物分析抗生素優秀一、化學結構與性質（一）典型藥物的結構1. 青霉素族和頭

4、孢菌素族基本結構 青霉素族 頭孢菌素族 藥物分析抗生素優秀青霉素Penicilins頭孢菌素Cephalosporins(1) 強酸性(2)旋光性(3) UV吸收(3) 如有共軛系統則有UV吸收，否則沒有（4） -內酰胺環的不穩定性2. 青霉素類和頭孢菌素類理化性質藥物分析抗生素優秀-內酰胺環的不穩定性見P313青霉素降解反應（分解、分子重排） 強酸性 中強酸、弱酸 堿性或青霉素酶完全水解 （pH=2）（pH=4） 分子 重排 D-青霉胺 青霉酸 青霉烯酸 青霉噻唑酸 青霉醛 二氧化碳 脫羧青霉噻唑酸 D-青霉胺 青霉醛 金屬離子(鉛、銅、汞、銀); 催化作用 藥物分析抗生素優秀 鑒別試驗沉淀

5、反應A. 在稀鹽酸中生成白色沉淀B. 重氮化-偶合反應或與三硝基苯酚 反應(結晶析出) 光譜法UV、IR、NMR色譜法TLC 、HPLC呈色反應 1.羥肟酸鐵反應a.茚三酮反應 b.裴林試劑反應a.重氮苯磺酸 b.變色酸-硫酸c.H2SO4-HNO3 d.銅鹽2.類似肽鍵反應3.其它呈色反應焰色反應(鈉、鉀鹽)二、鑒別試驗藥物分析抗生素優秀分光光度法 紅外吸收光譜法*-內酰胺類抗生素共有特征峰-內酰胺羰基伸縮振動：1750 1800 cm-1仲酰胺氨基、羰基伸縮振動：3300 cm-1 ，1525 cm-1 ，1680 cm-1 羧酸離子的伸縮振動：1600 cm-1，1410 cm-1供試品

6、的紅外吸收光譜 標準對照品圖譜紫外分光光度法 max和水解產物的max藥物分析抗生素優秀呈色反應H+FeNH4（SO4）21.羥肟酸鐵反應藥物分析抗生素優秀a.茚三酮反應 b.裴林試劑反應2.類似肽鍵反應(-CONH-, -氨基酸結構）呈色反應a.重氮苯磺酸(-C6H5-OH) b.變色酸-硫酸 c.H2SO4-HNO3 d.銅鹽3.其它呈色反應藥物分析抗生素優秀沉淀反應鹽(無機鹽、有機胺鹽性質)1.在稀鹽酸中產生沉淀的反應 青霉素鉀(鈉)鹽水溶液 稀鹽酸2滴 白色沉淀 (溶于過量鹽酸、乙醚、醋酸戊酯、乙醇、氯仿)2.有機胺鹽的特殊反應(1)重氮化-偶合反應 普魯卡因青霉素 紅色沉淀(2)與三

7、硝基苯酚的反應 芐星青霉素 + 苦味酸 結晶 重結晶測熔點 （二芐基乙二胺 + 青霉素） （二芐基乙二胺苦味酸鹽）藥物分析抗生素優秀色譜法1. 薄層色譜法 青霉素、頭孢菌素 TLC 鑒別 結果判定：供試品所顯主斑點的顏色和位置應與對照品的主斑點相同2. 高效液相色譜法 在相同實驗條件下，用高效液相色譜法分別測定供試品和對照品的色譜圖，其主峰的保留時間應一致。藥物分析抗生素優秀三、特殊雜質檢查1. 聚合物2.有關物質和異構體3. 吸光度4.有機溶劑5.結晶性藥物分析抗生素優秀1. 聚合物Ch.p2005：青霉素V鉀、青霉素鈉、青霉素鉀、頭孢他啶、頭孢拉啶、頭孢曲松鈉、頭孢呋辛鈉、頭孢哌酮鈉、頭孢

8、唑林鈉、頭孢噻肟鈉等主成分自身對照面積歸一化法限量法自身對照外標法原理：分子排阻色譜方法：藥物分析抗生素優秀色譜法：通過與主成分(或標準雜質)峰面積比較（HPLC法）或斑點顏色深淺（TLC法）來控制雜質的量檢查方法：2.有關物質和異構體藥物分析抗生素優秀2.有關物質和異構體*頭孢呋辛酯 異構體異構體A、異構體B、反式異構體、頭孢呋辛酯3-異構體*頭孢氨芐有關物質-苯甘氨酸、7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（7- ADCA）藥物分析抗生素優秀頭孢呋辛鈉頭孢呋辛酯藥物分析抗生素優秀7-ADCA 苯甘氨酸 頭孢氨芐 cefalexin藥物分析抗生素優秀色譜條件：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以水-0.01

9、mol/L醋酸鈉溶液（用冰醋酸調節pH值至5.0）-甲醇（21:55:24）為流動相；檢測波長為220nm 藥物分析抗生素優秀藥物分析抗生素優秀測定一定波長處雜質吸收度來控制雜質量3. 吸光度4.有機溶劑氨芐西林納二氯甲烷（GC法）頭孢哌酮鈉丙酮（GC法）頭孢硫脒殘留溶劑（GC法）頭孢他啶砒啶（HPLC法）藥物分析抗生素優秀第一法（偏光顯微鏡法）第二法（X射線粉末衍射法）5.結晶性藥物分析抗生素優秀三、含量測定 Ch.p2005：青霉胺及其制劑：汞量法其它所有-內酰胺類抗生素含量測定均采用HPLC法微生物法Ch.p2005：磺芐西林鈉及其制劑理化方法藥物分析抗生素優秀 含量=?(1)碘量法青霉

10、素或頭孢菌素 分子不消耗碘,其降解產物消耗碘A. OH-水解B. pH4.5. 溫度在24260C(3)UV-Vis法A.硫醇汞鹽法B.酸水解法C.羥肟酸比色法 (與羥胺作用,在稀酸或中性溶液中加Fe3+)生成紅色絡合物,測A(4) HPLC法(2)電位滴定法（汞量法）(青霉素類化合物的堿性水解產物可與Cu2+ 或Hg2+形成穩定的絡合物) 。Hg(NO3)2 滴定劑藥物分析抗生素優秀（一）碘量法原理青霉素青霉噻唑二鈉第1步第2步青霉噻唑二鈉藥物分析抗生素優秀碘量法 討論(1)操作應嚴格遵守規定條件 影響因素多 水解條件; 反應溫度; 緩沖液濃度; 放置時間; 加碘量; 氧化時間(2)與碘作用溫度和放置時間 室溫不經水解的青霉素分子與碘不起作用, 在38C時能消耗碘 溫度不可過高, 否則空白試驗失去意義.(3)淀粉指示劑加入時間(4)空白試驗目的: 消除供試品中可能存在的降解產物及其它能消耗碘的雜質的干擾.藥物分析抗生素優秀硝酸汞電位滴定法青霉素 堿性條件 水解 青霉噻唑酸 水解 青霉胺 硝酸汞 定量反應 青霉素: 硝酸汞=1:1 （第二個突躍）優點：不需青霉素標準品作對照應用