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文檔簡(jiǎn)介
1、高錳酸鉀法測(cè)飲料中的總糖1一、原理還原糖在堿性溶液中使銅鹽還原成氧化亞銅,在酸性條件下,氧化亞銅能使硫酸鐵還原為硫酸亞鐵,再用KMnO4溶液滴定硫酸亞鐵,即可標(biāo)出還原糖的量。本法為國(guó)標(biāo)GB5009.7-85方法,適用于所有食品中還原糖的測(cè)定及通過(guò)酸水解或酶水解轉(zhuǎn)化為還原糖的非還原性糖類物質(zhì)的測(cè)定。準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性均優(yōu)于直接滴定法 2二、試劑1、堿性酒石酸銅甲液:稱取15克硫酸銅(CuSO4.5H20)及0.05克次甲基藍(lán),溶于水中并稀釋至1000毫升。 2、堿性酒石酸銅乙液:稱取50克酒石酸鉀鈉及75克氫氧化鈉,溶于水中,再加入4克亞鐵氰化鉀,完全溶解后,用水稀釋至1000毫升,貯于橡膠塞玻璃瓶
2、內(nèi)。 3、鹽酸4.20%的氫氧化鈉溶液。5.甲基紅指示劑。6.5%的硫酸鐵溶液。3三、操作1.樣品處理處理CO2:吸樣液50ml,水浴加熱于100ml容量瓶,加水至刻度定容可測(cè)還原糖及蔗糖。 42.樣品測(cè)定取50ml處理的樣液于400ml燒杯加A、B液各25ml加熱在4min左右沸騰再煮2min趁熱抽濾用60水洗燒杯和沉淀直到洗液不成堿性將抽濾的紙(或者石棉)及Cu2O轉(zhuǎn)入原來(lái)燒杯用25ml硫酸鐵溶液沖洗古氏坩堝使沖洗液全部洗入原燒杯中加水25ml使Cu2O溶解用0.1N KMnO4標(biāo)液滴定至微紅色,同時(shí)用50ml水按上述方法做空白實(shí)驗(yàn)。 5四、注意事項(xiàng):(1)煮沸后的溶液顯紅色不顯蘭色,則表
3、示糖量高,可減少取樣體積。(2) 在洗滌Cu2O的整個(gè)過(guò)程中應(yīng)使沉淀上層保持一層水層,以隔絕空氣,避免Cu2O被空氣中的氧所氧化。(3)嚴(yán)格控制在4分鐘內(nèi)煮沸(4)此法適用于各類食品中還原糖的測(cè)定,有色樣液不受限制,準(zhǔn)確度高,重現(xiàn)性好。準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性都優(yōu)于直接滴定法,但操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí),需使用特制的高錳酸鉀法糖類檢索表。6(5)此法以測(cè)定反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的定量的亞鐵離子為計(jì)算依據(jù),因此在樣品處理時(shí),不能用乙酸鋅和亞鐵氰化鉀作誒澄清劑,以免引入亞鐵離子。(6)當(dāng)樣品中的還原糖有雙糖時(shí),由于這些雙糖的分子中僅有一個(gè)還原基,測(cè)定結(jié)果將偏低。7五、計(jì)算1.樣品中還原糖質(zhì)量相當(dāng)于氧化亞銅的質(zhì)量:m=(V-V
4、0)C2.5143.08/10001000-(1)式中m為樣品還原糖相當(dāng)于氧化亞銅的質(zhì)量(mg)V為滴定樣品時(shí),消耗的高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(ml)V0為滴定空白時(shí),消耗的高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(ml)C為高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mol/L)143.08為氧化銅的摩爾質(zhì)量(g/mol)8根據(jù)(1)式中計(jì)算所得氧化亞銅質(zhì)量,由下列(2)(3 )(4)(5)式回歸方程可分別得出氧化亞銅相當(dāng)于還原糖的質(zhì)量(mg)m1=0.4388x-0.4805-(2)m2=0.4865x-0.7268- (3)m3=0.6856x-0.3087-(4)m4=0.4545x-0.0327- (5)式中m1為氧化亞銅質(zhì)量相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量( mg )式中m2為氧化亞銅質(zhì)量相當(dāng)于果糖的質(zhì)量( mg )式中m3為氧化亞銅質(zhì)量相當(dāng)于乳糖的質(zhì)量( mg )式中m4為氧化亞銅質(zhì)量相當(dāng)于轉(zhuǎn)化糖的質(zhì)量( mg )92.還原糖: miX=m(V2/V1)1000 100%式中X為還原糖含量(%)mi為m1或 m2或m3或
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