1、一一 實驗目的實驗目的（Experimental Objectives）：）： 1掌握競爭性抑制作用的概念和特點。 2了解影響酶活性的其它因素。 3分析實驗現象。 二、實驗原理(Experimental Principles)： 影響酶活性的因素： 溫度 pH值 激活劑 抑制劑 不可逆性抑制作用 競爭性抑制作用 反競爭性抑制作用非競爭行抑制作用競爭性抑制作用競爭性抑制作用 抑制劑抑制劑(I)(I)與底物與底物(S)(S)的的結構相似結構相似，能與底，能與底物物競爭競爭酶的酶的活性中心活性中心，從而阻礙酶底物復，從而阻礙酶底物復合物的形成，使合物的形成，使酶酶的的活性降低活性降低。這種抑制。這種

2、抑制作用稱為競爭性抑制作用。作用稱為競爭性抑制作用。 反應模式反應模式+SI：高濃度的底物可解除抑制競爭性抑制作用特點競爭性抑制作用特點1、I I結構常與結構常與S S結構類似結構類似2、I/SI/S與酶的與酶的結合部位相同結合部位相同: :酶的活性中心酶的活性中心3、SS可以可以降低降低甚至消除甚至消除抑制抑制作用作用4、( (表觀）表觀）KmKm值增大，值增大，VmVm值不變值不變抑制劑抑制劑 1/V1/V 1/S1/S 無無氧氧 丙二酸丙二酸與琥珀酸競爭琥珀酸脫氫酶與琥珀酸競爭琥珀酸脫氫酶琥珀酸琥珀酸琥珀酸脫氫酶琥珀酸脫氫酶FADFADH2延胡索酸延胡索酸甲烯藍（甲烯藍（MBMB）甲烯白

3、（甲烯白（MBHMBH2 2）+FAD+FADCOOH CH2 CH2COOH COOH COOH CH2 丙二酸丙二酸三三、實驗材料、主要儀器和試劑實驗材料、主要儀器和試劑（Equipments , Materials and Agents） （一）主要儀器：離心機、恒溫水箱。 （二）主要試劑： 10.2mol/L 琥珀酸 20.02mol/L 琥珀酸 30.2mol/L 丙二酸 40.02mol/L 丙二酸 上述四中溶液調節pH值為7.4。 50.02%甲烯藍 61/15mol/L的Na2 HPO4 四、操作步驟四、操作步驟（Operating Procedure） 1 酶的提取液的制備：

4、將兔子處死，取出肝臟，切成碎片后，放入乳缽中，每組取8g左右，加入1/15mol/L的Na2 HPO4溶液5ml研成糊狀后，再加入5ml1/15mol/L的Na2 HPO4溶液，混勻后，倒入離心管中，2000轉/分鐘離心4分鐘，取上清液轉入其它試管備用。 2、取試管5支，按照下列表格操作： 3、各管混勻后，沿試管的內壁加入石蠟油（隔絕空氣），放置到37水浴中保溫，觀察各管甲烯藍的褪色情況，并記錄褪色的所需要的時間，解釋其現象。 五五、結果與分析結果與分析：（Results and Analysis ） 根據實驗的現象，觀察得到的結果，并解釋其相關的實驗現象。為什么滴石蠟油？六六、思考題思考題：(Questions) 什么叫酶的競爭性抑制作用？舉例說明在醫學上的