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文檔簡(jiǎn)介
1、1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?了解了解Auxin和和ABA的生理效應(yīng)的生理效應(yīng) 了解不同器官對(duì)植物激素敏感性的差異了解不同器官對(duì)植物激素敏感性的差異 Auxin生理效應(yīng)的特異性生理效應(yīng)的特異性Auxin及人工合成的類(lèi)似物質(zhì)如萘乙酸及人工合成的類(lèi)似物質(zhì)如萘乙酸(NAA)等對(duì)植物生長(zhǎng)等對(duì)植物生長(zhǎng)具有調(diào)節(jié)作用。具有調(diào)節(jié)作用。 1) Auxin的劑量效應(yīng)的劑量效應(yīng): 不同濃度的不同濃度的Auxin對(duì)植物生長(zhǎng)的效應(yīng)不對(duì)植物生長(zhǎng)的效應(yīng)不同。一般來(lái)說(shuō),同。一般來(lái)說(shuō),低濃度的低濃度的Auxin促進(jìn)生長(zhǎng),高濃度時(shí)則抑制促進(jìn)生長(zhǎng),高濃度時(shí)則抑制生長(zhǎng)。生長(zhǎng)。 2) Auxin的器官效應(yīng)的器官效應(yīng): 不同植物器官對(duì)不同植物
2、器官對(duì)Auxin的反應(yīng)不同,通的反應(yīng)不同,通常常根比芽、莖對(duì)根比芽、莖對(duì)Auxin更更敏感。敏感。 ABA抑制生長(zhǎng)和種子萌發(fā)。抑制生長(zhǎng)和種子萌發(fā)。2. 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 不同濃度的生長(zhǎng)素對(duì)根部的影響不同濃度的生長(zhǎng)素對(duì)根部的影響10-11 10-9 10-7 10-5 10-3 10-1 Auxin濃度濃度(mol/L)不同營(yíng)養(yǎng)器官對(duì)不同濃度不同營(yíng)養(yǎng)器官對(duì)不同濃度IAA的反應(yīng)的反應(yīng)10-4根莖芽10-1010-8ABA對(duì)種子萌發(fā)的抑制作用對(duì)種子萌發(fā)的抑制作用ABA對(duì)氣孔的影響對(duì)氣孔的影響生長(zhǎng)素實(shí)驗(yàn):生長(zhǎng)素實(shí)驗(yàn):材料:材料:小麥種子小麥種子儀器:儀器:溫箱、培養(yǎng)皿、移液管、直尺、濾紙、鑷子、鉛筆溫
3、箱、培養(yǎng)皿、移液管、直尺、濾紙、鑷子、鉛筆藥品:藥品:10 mg/L NAA,0.1%升汞升汞ABAABA實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn):材料:材料:油菜種子油菜種子儀器:儀器:培養(yǎng)皿、濾紙、鑷子、移液管、鉛筆、燒杯培養(yǎng)皿、濾紙、鑷子、移液管、鉛筆、燒杯藥品:藥品:ABA 母液(母液( 0.1 mM ABA )、)、 0.1%升汞升汞3. 材料、儀器設(shè)備與試劑材料、儀器設(shè)備與試劑4. 實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟NAANAA實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1)配置濃度梯度:配置濃度梯度:取潔凈大皿取潔凈大皿5套,編號(hào)。在套,編號(hào)。在1號(hào)皿中加入號(hào)皿中加入10 mg/L萘乙酸(萘乙酸(NAA) 1ml,加,加9 ml蒸餾水混勻后即成為蒸餾水混勻后即成
4、為1 mg/L 萘乙萘乙酸溶液。然后從其中吸取酸溶液。然后從其中吸取1 ml放入放入2號(hào)皿中,加號(hào)皿中,加9 ml蒸餾水混勻蒸餾水混勻后即成為后即成為0.1 mg/L 萘乙酸溶液。如此依次稀釋到萘乙酸溶液。如此依次稀釋到4號(hào)皿(最后號(hào)皿(最后從從第第4號(hào)培養(yǎng)皿中取出號(hào)培養(yǎng)皿中取出1ml棄去棄去),第),第5號(hào)皿則加入號(hào)皿則加入9ml蒸餾水作對(duì)蒸餾水作對(duì)照。照。2)排種子:排種子:在各皿中放入一張與皿底大小一致的濾紙,選取已萌在各皿中放入一張與皿底大小一致的濾紙,選取已萌動(dòng)的小麥種子動(dòng)的小麥種子10粒,用鑷子將其整齊地排在皿直徑上(腹溝朝粒,用鑷子將其整齊地排在皿直徑上(腹溝朝下),蓋上皿蓋后,
5、放在下),蓋上皿蓋后,放在25的溫箱中暗培養(yǎng)的溫箱中暗培養(yǎng)2d。3) 測(cè)量:測(cè)量:小麥幼芽長(zhǎng)度,幼根數(shù)目及最長(zhǎng)根長(zhǎng)。小麥幼芽長(zhǎng)度,幼根數(shù)目及最長(zhǎng)根長(zhǎng)。ABAABA實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1)配置濃度梯度:配置濃度梯度:取潔凈小皿取潔凈小皿5套,編號(hào)。在套,編號(hào)。在1號(hào)培養(yǎng)皿中加入號(hào)培養(yǎng)皿中加入ABA母液(母液(0.1 mM)2 ml,然后從其中吸取,然后從其中吸取0.2 ml放入放入2號(hào)培號(hào)培養(yǎng)皿中,加養(yǎng)皿中,加1.8 ml蒸餾水混勻后即成為蒸餾水混勻后即成為0.01 mM 。如此依次。如此依次稀釋到稀釋到4號(hào)皿(最后從第號(hào)皿(最后從第4號(hào)皿中取號(hào)皿中取0.2 ml棄去),第棄去),第5號(hào)皿中號(hào)皿中則加入則加
6、入1.8 ml蒸餾水作對(duì)照。蒸餾水作對(duì)照。2)排種子:排種子:在各皿中放入一張與皿底大小一致的濾紙,選取油在各皿中放入一張與皿底大小一致的濾紙,選取油菜籽菜籽20粒,放入皿中后用鑷子將種子分布均勻,蓋上皿蓋后,粒,放入皿中后用鑷子將種子分布均勻,蓋上皿蓋后,放在放在25的溫箱中暗培養(yǎng)的溫箱中暗培養(yǎng)2d。3) 統(tǒng)計(jì):統(tǒng)計(jì):發(fā)芽率。發(fā)芽率。NAA實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn):1)配置濃度梯度:配置濃度梯度:取潔凈大皿取潔凈大皿5套,編號(hào)。在套,編號(hào)。在1號(hào)皿中加入號(hào)皿中加入10 mg/L萘乙酸(萘乙酸(NAA) 1ml,加,加9 ml蒸餾水混勻后即成為蒸餾水混勻后即成為1 mg/L 萘乙酸溶液。然后從其中吸取萘乙酸溶
7、液。然后從其中吸取1 ml放入放入2號(hào)皿中,加號(hào)皿中,加9 ml蒸餾水混勻后即成為蒸餾水混勻后即成為0.1 mg/L 萘乙酸溶液。如此依次稀釋到萘乙酸溶液。如此依次稀釋到4號(hào)號(hào)皿(最后從第皿(最后從第4號(hào)培養(yǎng)皿中取出號(hào)培養(yǎng)皿中取出1ml棄去),第棄去),第5號(hào)皿則加入號(hào)皿則加入9ml蒸餾水作對(duì)照。蒸餾水作對(duì)照。2)排種子:排種子:在各皿中放入一張與皿底大小一致的濾紙,選取已萌動(dòng)的小麥種子在各皿中放入一張與皿底大小一致的濾紙,選取已萌動(dòng)的小麥種子10粒,用鑷子將其整齊地排在皿直徑上(腹溝朝下),蓋上皿蓋后,放在粒,用鑷子將其整齊地排在皿直徑上(腹溝朝下),蓋上皿蓋后,放在22的的溫箱中暗培養(yǎng)溫箱
8、中暗培養(yǎng)2d。3) 測(cè)量:測(cè)量:小麥幼芽長(zhǎng)度,幼根數(shù)目及最長(zhǎng)根長(zhǎng)。小麥幼芽長(zhǎng)度,幼根數(shù)目及最長(zhǎng)根長(zhǎng)。ABA實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn):1)配置濃度梯度:配置濃度梯度:取潔凈小皿取潔凈小皿5套,編號(hào)。在套,編號(hào)。在1號(hào)培養(yǎng)皿中加入號(hào)培養(yǎng)皿中加入ABA母液(母液(0.1 mM)2 ml,然后從其中吸取,然后從其中吸取0.2 ml放入放入2號(hào)培養(yǎng)皿中,加號(hào)培養(yǎng)皿中,加1.8 ml蒸餾水混勻后即成為蒸餾水混勻后即成為0.01 mM 。如此依次稀釋到。如此依次稀釋到4號(hào)皿(最后從第號(hào)皿(最后從第4號(hào)皿中取號(hào)皿中取0.2 ml棄去),第棄去),第5號(hào)皿號(hào)皿中則加入中則加入1.8 ml蒸餾水作對(duì)照。蒸餾水作對(duì)照。2)排種子:
9、排種子:在各皿中放入一張與皿底大小一致的濾紙,選取油菜籽在各皿中放入一張與皿底大小一致的濾紙,選取油菜籽20粒,放入皿粒,放入皿中后用鑷子種子分布均勻,蓋上皿蓋后,放在中后用鑷子種子分布均勻,蓋上皿蓋后,放在22的溫箱中暗培養(yǎng)的溫箱中暗培養(yǎng)2d。3) 統(tǒng)計(jì):發(fā)芽率統(tǒng)計(jì):發(fā)芽率。分析分析: 1)NAA的濃度效應(yīng)的濃度效應(yīng) 2)不同器官對(duì))不同器官對(duì)NAA的敏感性的敏感性培養(yǎng)培養(yǎng)2d后后NAA濃度濃度( mg/L ) 調(diào)查調(diào)查10.10.010.0010(CK)平均根數(shù)平均根數(shù) (cm)平均最長(zhǎng)根長(zhǎng)平均最長(zhǎng)根長(zhǎng) (cm)平均芽長(zhǎng)平均芽長(zhǎng) (cm)幼根增或減幼根增或減%100%幼芽增或減幼芽增或減% 100% 5. 結(jié)果與分析結(jié)果與分析NAA實(shí)驗(yàn)(實(shí)驗(yàn)(2d后)后)1)統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率:)統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率:種子見(jiàn)綠或見(jiàn)白,胚芽(根)種子見(jiàn)綠或見(jiàn)白,胚芽(根)種子半徑。種子半徑。2)作圖:)作圖:以以ABA濃度濃度負(fù)對(duì)數(shù)負(fù)對(duì)數(shù)為橫座標(biāo),以相對(duì)發(fā)芽率(設(shè)為橫座標(biāo),以相對(duì)發(fā)芽率(設(shè)對(duì)照發(fā)芽率為對(duì)照發(fā)芽率為100%)為縱座標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),分析不同)為縱座標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),分析不同濃度的脫落酸對(duì)種子發(fā)芽率的影響。濃度的脫落酸對(duì)種子發(fā)芽率的影響。ABA實(shí)驗(yàn)(實(shí)驗(yàn)(2d后)后) 潔凈的培養(yǎng)皿潔凈的培養(yǎng)皿 選用活力一致的種子選用活力一致的種子 制作濃度梯度時(shí),搖勻后
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