1、綠葉中色素的提取與分離綠葉中色素的提取與分離學科教學（生物）王瓊瓊實驗實驗一、實驗目的一、實驗目的 提取與分離綠葉中的色素提取與分離綠葉中的色素 探究色素的種類、顏色及特點探究色素的種類、顏色及特點 探究實驗結果和操作的驗證、優化方案探究實驗結果和操作的驗證、優化方案 培養嚴謹的科學態度和團結合作的精神培養嚴謹的科學態度和團結合作的精神二、實驗原理二、實驗原理 提取原理提取原理：綠葉中的色素等是脂溶性有機分子，能夠溶解于無水乙醇等有機溶劑中（相似相溶原理） 分離原理分離原理：不同的色素在層析液中溶解度不同，隨層析液在濾紙上擴散的速度不同，溶解度高的擴散快，反之則慢，分離后形成條帶（紙層析法）三

2、、實驗材料用具三、實驗材料用具 取材取材：新鮮的顏色較深的綠葉（冬青葉、樟葉或松葉等，易取材、色素含量多、含水量少） 用具用具：干燥的定性濾紙，天平，量筒（10ml），吸管，剪刀，鑷子，研缽，尼龍布，玻璃漏斗，試管，試管架，棉塞，藥匙，毛細吸管，棉線，鋼尺，鉛筆，研磨過濾器，軟木塞，粉筆，壓板 藥品藥品：無水乙醇，二氧化硅，碳酸鈣，層析液（石油醚：丙酮：苯=20:2:1或93#汽油）四、實驗步驟四、實驗步驟1.實驗前準備實驗前準備：擺放試驗臺改裝研杵：將定性濾紙中心挖孔到剛好可以套在研杵上，可減少研磨液的揮發準備過濾漏斗：將單層尼龍布填放漏斗底部，并將漏斗放入試管中，備用制備濾紙條：將干燥的定

3、性濾紙剪成略小于試管長與直徑的濾紙條，在距一端1cm處用鉛筆鋼尺畫細橫線并減去兩角，備用；全班同學按六到五人分組，每兩個同學一個小組2.提取綠葉中的色素提取綠葉中的色素 取材：每組取新鮮了綠葉三份，每份5g，去除梗和較大葉脈，盡量剪碎，放入研缽 研磨：研缽放置在背光處，向研缽中分別放入少量二氧化硅+碳酸鈣+無水乙醇、二氧化硅+無水乙醇、二氧化硅+碳酸鈣+水，研磨充分至糊狀（對比，觀察記錄） 過濾：將研磨液迅速倒入事先準備好的漏斗中，過濾后及時用棉塞塞嚴試管口思考與探究：為什么要選擇背光處進行研磨？對比小組中不同添加情況的結果，試說明原因。你還能想出什么辦法來改善提取的步驟？直接用壓板把綠葉汁壓

4、濾紙條上可以嗎？3.畫濾液細線畫濾液細線 每組同學用毛細吸管吸取少量正常添加的濾液，沿鉛筆線均勻畫直線，待濾液干后，重復一兩次。思考與探究：哪些方法可以加快濾液干燥速度？濾液細線不均勻或不整齊對結果有影響嗎？用毛細吸管等玻璃器材存在一定的安全隱患，你還能想到用什么方法使濾液細線畫的均勻細直？壓板直接壓上去是否能達到均勻整齊的效果？4.分離綠葉中的色素分離綠葉中的色素 將適量的層析液倒入試管中，將濾紙條有濾液細線的一端朝下插入層析液中，掌握好濾液細線與層析液的距離，塞緊試管口。思考與探究：各組代表上臺展示驗結果，并思考產生不同現象的原因可能是什么?濾液細線能觸及層析液嗎？怎樣確定濾紙條上的顏色就

5、是從綠葉中提取的呢？把試管分別放在陽光下和暗處層析，結果會一樣嗎？該過程可能有哪些情況會影響層析結果？如何避免和改進？如果直接用粉筆來代替濾紙條能達到實驗效果嗎？5.觀察與記錄觀察與記錄 觀察濾紙條上有幾條色素帶，以及每條色素帶的顏色，排序情況，寬窄情況，并分析討論為什么會出現這樣的分布情況。6.整理與清潔整理與清潔 清潔實驗用具 整理實驗臺 及時用肥皂洗手五、自我監控表五、自我監控表 監控點監控點 考慮的問題考慮的問題結果記錄結果記錄提取色素稱量、剪碎葉的材料還可以用其他植物來代替嗎？為什么要剪碎呢？研磨藥品加入藥品的作用？量怎么控制?時間時間長短有沒有影響？狀態研磨到什么程度和狀態？過濾尼

6、龍布尼龍布作用、注意事項？和濾紙的比較棉塞棉塞的作用？濾液顏色顏色對比畫濾液線畫線線條整齊均勻與否有沒有影響？干燥是否干燥有影響嗎？怎樣加快干燥速度？毛細吸管可以換其他方式畫線嗎？分離色素倒層析液量的控制放濾紙條高度的控制、怎么更有效地避免不良影響？六、歸納總結六、歸納總結實驗注意事項總結實驗注意事項總結：1.材料應選擇濃綠、水分少、易獲得的新鮮葉2.研磨要快，收集濾液后和層析時都要及時用棉塞塞住，盡量減少有機溶劑的揮發3.濾液細線盡量細直、均勻4.每次畫線前搖勻濾液5.濾液細線一定不要淹沒層析液，以免溶解6.注意保持通風、盡量避光，安全、規范操作實驗結果分析總結實驗結果分析總結：色素含量色素含量溶解度溶解度擴散速度擴散速度最少最高最快較少較高較快最多較低較慢較多最低最慢七、課堂反饋七、課堂反饋葉綠體中的色素能夠在濾紙條上分離的原因是。研磨中加入二氧化硅和碳酸鈣的目的分別是、。紙層析法的步驟是制備濾紙條、觀察色素帶。為什么濾液細線越細直均勻越好？為什么層析液不能沒及濾紙條的濾液細線？葉各種色素在濾紙上