1、專題十四發酵工程皎 內容標準及活動要求1.進行微生物的分離和培養。2.測定某種微生物的數量。3.研究培養基對微生物的選擇作用。4.探討微生物的利用。5.掌握運用發酵技術制作食品的基本方法。6.活動：(1)用大腸桿菌為材料進行平面培養，分離菌落。(2)分離土壤中分解尿素的細菌，并進行計數。(3)利用酵母菌、醋酸菌分別制作果酒和果醋。(4)利用乳酸菌發酵制作酸奶或泡菜。-一覽縱橫研必備門城素作力唯一氯培養基泳的加出培范U密點送排解聚：提的制奇球星 當對邯第段看 I消毒和火熱兒錄尊水，礎ac氨斑.無孔襦mar擊乩府疔杭君祥桿除南平枳狀和 顯注鉞比耀Hit狀生*技求實戰計算稱十筋化L理理 冽華版T鑄腫

2、埼養殺”. a ) ) £ ibi*1R:寫出事生:5物計收處;1式做內襁制解母前包號制作的"物而酸菌M鵬孔酸熊?疏漏診斷1 .微生物利用的相關判斷(1)某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理，接種后的培養皿需放在光照培 養箱中培養(X)(2)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法(V)(3)在瓊脂固體培養基上長出的單個菌落含有多種細菌(X )(4)在檢測土壤中細菌總數的實驗操作中，確定對照組無菌后，選擇菌落數在300以上的實驗組平板進行計數(X)(5)培養微生物的培養基分裝到培養皿后進行滅菌(X )2 .傳統發酵技術的相關判斷(6)

3、醋酸菌在無氧條件下利用乙醇產生醋酸(X )(7)酵母菌在無氧條件下利用葡萄汁產生酒精(V)(8)泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸發酵(V)?長句沖關1 .概述性知識(1)無菌操作技術包括消毒和滅菌，消毒包括煮沸消毒、巴氏消毒、化學藥劑消毒和紫 外線消毒等；滅菌包括灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。(2)灼燒接種環，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。2 .程序性誘問(3)如果用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中分解尿素的細菌數，統計的菌落數往往比活菌實際數目低，原因是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上看到的只是一個菌落。(4)制作泡菜時，為了縮短制作時間，有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡

4、菜液,分析其原因是加入陳泡菜液的作用是增加乳酸菌數量，加速乳酸的產生。微專題1微生物的培養、分離與計數 學生用書P68IH知識整臺融合案通i .微生物培養中的無菌操作技術工種消;毒巴氏消毒法化節藥劑消亦法灼燒火電接種環、接釉制等金網器昂方法產熱火菌一主要料對玻璃雷而等高壓泰汽滅菌一一主要斜對培養基等3 .培養基制備與微生物純化技術過程計算一原盛些化+天常-唯板:平板力通過接種環在瓊曲周體培養基表面連續則攏的操作,將聚集的菌料方祛培峰劃線法逐生福群分放期培養基的表面不宜計數一格釋排布,.將放油進行系列的排度柿軒，第后將區分別維布颯計固體培養基的表面.聚集在一起的津生物符被分他成單.個細胞從而同培

5、養 邛我而形成魏個用蕃、適宜計數4 .篩選目的微生物的原理與實例(1)原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養、溫度、pH等)，同時抑制或阻止其他微生物的生長。因此，可以通過配制選擇培養基、控制培養條件等選擇目的微 生物。(2)實例實分拜以素 例的章威產匚以"尿武”為唯一稅源的培養基 程射,上述培養基中加入橘紅揩水劑.指 "小劑變紅則該細菌能分解尿案 讓義每克樣咕中的株數XCFVjxM通高考真題便驗探究1. (2019 高考北京卷)篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養基。接種培養 后，若細菌能分解淀粉，培養平板經稀碘液處理，會出現以菌落為中心的透明圈 實驗結果

6、見下表。遴叨圈菌種菌落直徑：Cmm)透明圈直徑：H(mm)H/C細菌I5.111.22.2細菌n8.113.01.6有關本實驗的敘述，錯誤的是()A.培養基除淀粉外還含有氮源等其他營養物質B.篩選分解淀粉的細菌時，菌液應稀釋后涂布C.以上兩種細菌均不能將淀粉酶分泌至細胞外D. H/C值反映了兩種細菌分解淀粉能力的差異解析：選G微生物培養基含有四類營養物質：水、無機鹽、碳源、氮源，A項正確；常用稀釋涂布平板法篩選淀粉分解菌，涂布前需將菌液稀釋，B項正確；由題圖可知，細菌I和H形成的菌落周圍都出現了透明圈，說明兩種細菌都能將淀粉酶分泌至細胞外，C項錯誤；淀粉分解菌可分解淀粉，導致菌落周圍的淀粉被分

7、解，不能與碘液反應生成藍 色，故而出現透明圈，透明圈直徑與菌落直徑的比值越大，說明細菌分解淀粉的能力越 強，D項正確。2) (2019 高考全國卷I )已知一種有機物 X(僅含有C H兩種元素)不易降解，會造成 環境污染。某小組用三種培養基篩選土壤中能高效降解X的細菌(目標菌)。I號培養基：在牛肉膏蛋白月東培養基中加入X(5 g/L)。n號培養基：氯化鈉(5 g/L),硝酸俊(3 g/L),其他無機鹽(適量)，X(15 g/L)。出號培養基：氯化鈉(5 g/L),硝酸俊(3 g/L),其他無機鹽(適量)，X(45 g/L)。 回答下列問題。(1)在I號培養基中，為微生物提供氮源的是 。 n、出

8、號培養基中為微生物提 供碳源的有機物是 。(2)若將土壤懸浮液接種在n號液體培養基中，培養一段時間后，不能降解X的細菌比例會 , 其原因是3) ) n號培養基加入瓊脂后可以制成固體培養基，若要以該固體培養基培養目標菌并對菌落進行計數，接種時，應采用的方法是 。(4)假設從出號培養基中得到了能高效降解X的細菌，且該菌能將 X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供 和 。解析：(1)在i號牛肉膏蛋白月東培養基中，牛肉膏、蛋白月東為微生物提供了氮源，而n號、出號培養基中除 X外的其他物質均不含碳，所以能為微生物提供碳源的有機物是X。(2)因為n號培養基中的碳源只有X,相當于是選擇培養

9、基，只有能降解X的細菌才能增殖，而不能降解X 的細菌因缺乏碳源不能增殖。(3) 要對菌落進行計數，應采用稀釋涂布平板法進行接種。(4) 在有氧條件下，丙酮酸參與細菌的有氧呼吸，可以為該菌的生長提供能量和合成其他物質的原料。答案： (1) 牛肉膏、蛋白胨X(2) 下降不能降解X 的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解 X 的細菌能夠增殖(3) 稀釋涂布平板法(4) 能量合成其他物質的原料3. (2019 高考全國卷出)回答下列與細菌培養相關的問題。(1) 在細菌培養時，培養基中能同時提供碳源、氮源的成分是( 填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3” ) 。通常，制備培養基時要根據所培養細菌的不同來調節

10、培養基的pH，其原因是硝化細菌在沒有碳源的培養基上 ( 填“能夠”或“不能” ) 生長，原因是(2) 用平板培養細菌時一般需要將平板( 填“倒置”或“正置” ) 。(3) 單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通常可根據菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區分不同種的微生物，原因是(4) 有些使用后的培養基在丟棄前需要經過處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。解析： (1) 細菌培養時常用牛肉膏蛋白胨培養基，牛肉膏能提供碳源、氮源、磷酸鹽、維生素，蛋白胨能提供碳源、氮源、維生素，而葡萄糖不能提供氮源，NaNO3 不能提供碳源。不同細菌生長繁殖所需要的最適pH是不同的，應該根據培養細菌的不同來

11、調節培養基的pH。硝化細菌是化能自養型細菌，可以利用空氣中的CO作為碳源，因此硝化細菌在沒有碳源的培養基上能夠生長。 (2) 在平板培養基上培養細菌時，一般需將平板倒置，這樣可以防止皿蓋上的水珠落入培養基。 (3) 不同種類的細菌所形成的菌落，在大小、形狀、光澤度、顏色、硬度、透明度等方面具有一定的特征，不同種細菌在一定培養條件下表現出各自穩定的菌落特征，可以作為菌種鑒定的重要依據。 (4) 使用后的培養基在丟棄前需進行滅菌處理，以免污染環境。答案：（1）蛋白臍不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細菌可以利用空氣中的CO作為碳源（2）倒置（3）在一定的培養條件下，不同種微生物表現出各自穩

12、定的菌落特征（4）滅菌 . - i11r-本部分屬于高考的高頻考點，考查內容主要體現在微生物培養的無菌技術，微生物篩 選、分離、計數及菌種保藏技術等方面，其中對微生物篩選方案制定的考查較多。畫題組模揪素養提升1. （2019 濟寧模擬）下表表示某培育基的配方，下列敘述正確的是（）成分蛋白月東葡萄糖K2HPO伊紅美籃蒸儲水含量10 g10 g2 g0.4 g0.065 g1 000 mLA.從用途看，該培養基屬于選擇培養基B.培養基中屬于碳源的物質主要是葡萄糖，屬于氮源的物質是蛋白月東C.該培養基沒有提供生長因子的物質D.該培養基調節到合適的 pH后就可以接種菌種使用解析：選 R從用途看，該培養

13、基中有伊紅和美藍，屬于鑒別培養基，A錯誤；微生物的營養物質主要包括氮源、碳源、水和無機鹽等，培養基中屬于碳源的物質主要是葡萄糖，屬于氮源的物質是蛋白月東，B正確；生長因子主要包括維生素、氨基酸等，表格中的蛋白陳可以提供生長因子，C錯誤；該培養基調節到合適的 pH經滅菌后才可以接種使用，D錯誤。2.下圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序為1、2、3、4、5。下列相關敘述正確的是（）A.在1、2、3、4、5區域中劃線前都要對接種環灼燒滅菌，灼燒滅菌后立即進行劃線B. 1和5劃線可以如圖所示，也可以相連在一起C.在劃線操作結束后，要對接種環灼燒滅菌D.在5區域中才可以得到單細胞菌落解析：選 Co接種

14、前要灼燒接種環，殺滅接種環上的殘留菌，待冷卻后再進行劃線，A錯誤；劃線時注意不要將最后一區即5區的劃線與第一區即1區相連，B錯誤；在劃線操作結束時，要對接種環灼燒滅菌，以防止污染環境， C正確；5區域是最后一個區域，有可能 在5區域獲得所需要的菌落，在 4區域或其他區域也有可能得到所需要的菌落，D錯誤。3 .（不定項）（2020 山東省高三等級考模擬 ）生長圖形法是一種測定微生物營養需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類，研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生 長因子但含有其他必需營養物質的培養基混合后倒成平板，然后在平板上劃分數區，將 甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區域，培養結果

15、如圖所示，下列說法正確的是 （）A.倒成平板后直接培養可判斷有無污染B.倒成平板后需要進行滅菌處理C.圖示結果表明該菌需要生長因子乙或丙D.生長圖形法還可用于某些菌種的篩選答案：AD4 .（不定項）漆酶屬于木質素降解酶類，在環境修復、農業生產等領域有著廣泛用途。卜圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程，下列相關敘述正確的是（）樣品 樣乩懸泄 漆布則線 腰特A.生活污水中含有大量微生物，是分離產漆酶菌株的首選樣品B.選擇培養基中需要加入漆酶的底物，通過菌落特征挑出產漆酶的菌落C.在涂布平板上長出的菌落，再通過劃線進一步純化D.斜面培養基中含有大量營養物質，可在常溫下長期保存菌株解析：選BG漆酶降解木

16、質素，則漆酶菌株多存在于木質素豐富的場所，生活污水中含有大量微生物，但不一定含有產漆酶的菌株，A錯誤；產漆酶菌株可降解木質素，在選擇培養基中加入木質素可篩選產漆酶的菌株，篩選時可通過菌落特征挑出產漆酶的菌落，D錯誤。正確；在涂布平板上長出的菌落，再通過劃線進一步純化，C正確；斜面培養基中含有大量營養物質，可在低溫下長期保存菌株,5 .據圖回答下列問題：（1）生牛奶在飲用前一般要經過（填具體方法）處理，以保證人體健康。（2）培養微生物時必須進行無菌操作，實驗前所需的各種器材如培養皿等常用法滅菌。（3）牛奶是微生物生長的良好培養基，為檢測消毒前后牛奶中細菌含量的變化情況，依圖甲所示操作：用無菌吸管

17、從錐形瓶中吸取1 mL生牛奶稀釋液移至盛有 9 mL無菌水的試管中，混合均勻，如此再重復2次后，得到的溶液稀釋度為 。（4）配制的培養基在接種之前需進行無菌檢測，具體做法是 。（5）圖乙中統計的菌落數比實際活菌數 ,原因（6）從培養基的作用來看，圖丙所示的培養基稱為 ,能起到分離微生物作用的原因是解析：（1）牛奶常用巴氏消毒法進行消毒處理。（2）培養微生物過程中，吸管、培養皿等玻璃器皿常用干熱滅菌法進行滅菌。（3）由題圖可知，從錐形瓶中吸取1 mL生牛奶稀釋液移至盛有9 mL無菌水的試管中，稀釋了 10倍，又重復了 2次，因此得到的溶液稀釋度為 103。（4）對配制的培養基在接種之前進行無菌檢

18、測的常用方法是將未接種的培養基置于適 宜條件下一段時間，如果沒有形成菌落說明滅菌徹底，反之，有菌落生長則說明滅菌不徹 底。（5）圖乙是通過稀釋涂布平板法接種得到的菌落，由于兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此統計的菌落數比實際活菌數要少。（6）圖丙用的是含尿素的培養基，只有能分解尿素的微生物才能生長，其他微生物因不能利用尿素而不能生長， 因此含尿素的培養基屬于選擇培養基。答案：（1）巴氏消毒法（2）干熱滅菌（3）10 3 （4）將未接種的培養基置于適宜條件下一段時間，若沒有菌落形成，則未被污染（5）少 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落（6）選擇培養基

19、 這種培養基允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長6 .塑料袋的自然分解需要 20至1 000年不等，由此造成的“白色污染”早已成為地球 公害。加拿大一名叫丹尼爾伯德的高中生從土壤中找到了一類假單胞桿菌，能將聚乙烯 塑料的降解過程縮短至 3個月，而且分解產物只有水和二氧化碳，伯德也因此被譽為“塑 料袋的克星”。下圖是伯德尋找聚乙烯降解菌的大致過程。請回答下列問題：告1G=>C => =>土壤森浮度【9培養基 II號培養基（1）為避免雜菌污染培養物和環境，用于微生物培養的培養基接種前和完成實驗后都要 進行;接種時要在 旁操作。（2）圖中的“土壤樣品”最可能取

20、自 。 “”過程表示對土壤懸浮液進行一 系歹U的 ?目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，從而能在I號培養基表面形成單個（3）1號培養基采用的接種方法為 。I號培養基屬于 培養基，其作用是使目的菌能“脫穎而出”，為證明I號培養基的作用，常用方法是 （4）使用n號培養基的目的是使目的菌數目增多，培養基中必須包含水、無機鹽、 等基本營養成分。從物理性質來看，n號培養基中不能添加 。解析：（1）為避免雜菌污染培養物和環境，需將培養基在接種前和完成實驗后進行高壓蒸汽滅菌。接種時，為避免周圍空氣中的雜菌污染，操作需在酒精燈火焰旁進行。（2）據題可知，要尋找的目的菌是聚乙烯降解菌，聚乙烯塑料袋在垃圾場

21、中較多，因此圖中的土壤 樣品最可能來自垃圾場或其他塑料袋較多的地方。圖中“”過程表示對土壤懸浮液進行一系列的濃度梯度稀釋，使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，接種到培養基上后能夠形成單個的菌落。（3） I號培養基上菌落比較分散，因此采用的接種方法是稀釋涂布平板法。I號培養基是用來篩選聚乙烯降解菌的，屬于選擇培養基。要證明選擇培養基的作用，常用的方法是將同種菌種接種到牛肉膏蛋白月東培養基上進行比較。（4）使用n號培養基是為了增加目的菌的數量，培養基中必須含水、無機鹽、氮源和碳源等基本營養成分。增加目的菌的數量需用液體培養基，因此該培養基中不能添加凝固劑（瓊脂）。答案：（1）（高壓蒸汽）滅菌酒精燈

22、火焰（2）垃圾場（答案合理即可）濃度梯度稀釋菌落（3）稀釋涂布平板法 選擇 把相同菌種接種到牛肉膏蛋白月東培養基中，并在相同且適宜的條件下培養，比較兩培上的菌落數(4)碳源、氮源 凝固劑(或瓊脂)團晅圓防歸納微生物分離與計數中的5個“兩”(1)兩種無菌技術一一消毒與滅菌。(2)兩類培養基一一選擇培養基、鑒別培養基。兩類純化菌種方法一一平板劃線法、稀釋涂布平板法。兩種對照組一一培養基制備是否合格；培否起到“篩選”作用。(5)微生物兩類計數方法一一活菌計數法與顯微鏡直接計數法。微專題2傳統發酵技術IS知識整臺,融合貫通果酒、果醋和泡菜制作的比較項目X.內容、果酒和果醋的制作制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含

23、量作用菌種果酒：酵母菌；果醋：醋酸菌乳酸菌原理(1)酵母菌在無氧條件多將葡萄糖轉化成 乙醇；(2)醋酸菌在用氧條件下將乙醇轉化為醋 酸乳酸菌將糖轉化為乳酸原料選擇新鮮葡萄(或蘋果等)大白菜、花椰菜等新鮮干凈的蔬菜實驗流程挑選菊衢*沖洗桂汁酒的騎肢發醉1發醉1果酒果暗逸材配制捻水1 T 1加調味料，裝壇發ATI泊定.亞 1口硝成虻成品含量1充氣口出“：1-1制作裝置出料口出TV »'H - hJ-43高考真題偵驗探究7 .（不定項）（2017 高考江蘇卷）下圖是探究果酒與果醋發酵的裝置示意圖。下列相關敘述正確的是（）氣體出口 培養基人口氣體人IIA.改變通入氣體種類，可以研究呼

24、吸作用類型對發酵的影響B.果酒發酵中期通入氮氣，酵母菌將從有氧呼吸轉變為無氧呼吸C.果醋的發酵周期與實驗設定的溫度密切相關D.氣體入口與氣體出口可以交換使用解析：選 ABG改變通入氣體的種類，例如分別通入氮氣和氧氣，可研究無氧呼吸和有氧呼吸對發酵的影響，A項正確；果酒發酵中期通入氮氣，更利于創造無氧條件，酵母菌將從有氧呼吸轉變為無氧呼吸，B項正確；果醋發酵的菌種是醋酸菌，其生長的適宜溫度是3035 C,溫度能影響醋酸菌的代謝，從而影響果醋的發酵周期，C項正確；氣體的入口必須伸入培養液中，氣體出口不能伸入培養液中，如果氣體的入口和出口交換，會導 致發酵液噴出，D項錯誤。8 . （2018 高考海

25、南卷） 葡萄酒是葡萄汁經酵母菌發酵而成的，釀制葡萄酒的兩個簡易 裝置如圖所示。回答下列問題：（1）試管中的X溶液有助于維持甲裝置瓶中的氣壓相對穩定，與乙裝置相比，用甲裝置釀制葡萄酒的優點是 （答出兩點即可）。（2）葡萄汁裝入甲裝置時，要留有約1/3的空間，這種做法的目的是（答出兩點即可）。A和乙B）,乙A裝置（3）某同學若用乙裝置進行發酵，并設置兩個不同處理組（乙 中保留一定量的氧氣，乙 B裝置中沒有氧氣。在其他條件相同且適宜的情況下，測得一段 時間內乙A和乙B中酒精含量的變化趨勢及乙 A中氧氣含量的變化趨勢如曲線圖所示。圖中 曲線、依次表示 、 含量的變化趨勢。（4）從細胞呼吸類型看，酵母菌

26、屬于 生物；從同化作用的類型 看，酵母菌屬于 （填“自養”或“異養”）生物。解析：（1）乙裝置為密閉狀態，為防止發酵過程中產生的二氧化碳導致裝置炸裂，要 經常開蓋放氣，而放氣過程中可能導致雜菌污染。裝置甲中，發酵過程中產生的二氧化碳 導入X溶液，不需要開蓋放氣，也就避免了因開蓋引起的雜菌污染。（2）甲裝置中留的約1/3的空間中，含有大量氧氣，可使酵母菌通過有氧呼吸大量增殖。酵母菌有氧呼吸、無 氧呼吸均能產生二氧化碳，發酵過于旺盛會導致發酵裝置中汁液溢出，裝置留有空間，可 防止汁液溢出。（3）由題圖可知，乙 B裝置中，由于沒有氧氣，酵母菌從一開始就進行無 氧呼吸產生酒精，即曲線為乙 B裝置中的酒

27、精的含量變化趨勢；乙A裝置中由于酵母菌有氧呼吸不斷消耗氧氣，氧氣的含量不斷下降，即曲線為乙A裝置中的氧氣的含量變化趨勢；有氧呼吸減弱時，才開始進行無氧呼吸，即曲線為乙A裝置中的酒精的含量變化趨勢。（4）從細胞呼吸類型看，酵母菌既可進行無氧呼吸，也可進行有氧呼吸，屬于兼性厭 氧型生物。從同化作用的類型看，酵母菌只能將外界的有機物轉化為自身的有機物，屬于 異養型生物。答案：（1）不需要開蓋放氣；避免了因開蓋引起的雜菌污染（2）為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣；防止發酵旺盛時汁液溢出（3）乙A裝置中的氧氣 乙B裝置中的酒精乙A裝置中的酒精 （4）兼性厭氧型 異養本部分屬于高考中的中頻考點，主要體現在果

28、酒、果醋及泡菜制作技術、發酵條件控 制，相關菌種特點等方面，對亞硝酸鹽測定及酶的應用也偶有考查。近年高考中本部分常 與細胞結構、細胞呼吸、酒精檢測等進行綜合考查，備考時應多加關注。®題蛆蟆榔素養提升11 . （2020 山東省高三等級考模擬）在實驗室中可利用酵母菌發酵的方式制作葡萄酒, 下列說法正確的是（）A.葡萄糖在酵母菌細胞的線粒體內被分解B.制作葡萄酒時酵母菌先在有氧條件下大量增殖C.制作過程中酵母菌始終處于堿性環境D.酵母菌的發酵產物不會抑制自身的代謝活動答案：B2 .（不定項）某研究性學習小組以櫻桃番茄為材料進行果酒、果醋發酵實驗。下列相關敘述正確的是(A.實驗中不需要接種

29、酵母菌，但需要人工接種醋酸菌B.先隔絕空氣進行果酒發酵后供氧進行果醋發酵C.實驗中可通過控制發酵溫度防止雜菌污染D.在進入果醋發酵前，需要適當調節發酵液的pH等解析：選 BCD本題制作原料是櫻桃番茄而不是葡萄，前者因果皮表面聚集的野生型 酵母菌很少，實驗中需要人工接種酵母菌，制作果醋時，也需要人工接種醋酸菌，以保證 醋酸發酵迅速進行，A錯誤；酵母菌產酒過程為無氧發酵，果醋發酵為需氧發酵，B正確;不同的微生物生長最適溫度、pH不同，實驗中可通過控制發酵溫度防止雜菌污染，進入果醋發酵前，需適當調節發酵液的pH等，C D正確。3 .(不定項)下圖為蘋果酒的發酵裝置示意圖，下列敘述正確的是(A.發酵過

30、程中酒精的產生速率越來越慢B.集氣管中的氣體是酵母菌無氧呼吸產生的COC.發酵過程中酵母種群呈“ J”型曲線增長D.若發酵液表面出現菌膜，最可能的原因是發酵瓶漏氣解析：選 AD隨著發酵時間延長，酒精積累量越來越多，由于高濃度的酒精對酵母菌 發酵起抑制作用，所以發酵后期酒精產生速率越來越慢，A正確；酵母菌發酵瓶需留 1/3的空間，有少量空氣存在，因此集氣管中的CO氣體由有氧呼吸和無氧呼吸產生，B錯誤；發酵過程中酵母菌受原料、代謝產物影響，其種群呈“ S”型曲線增長，C錯誤；發酵液表面出現菌膜，應主要為醋酸菌，醋酸菌為好氧菌，因此可推測出現的原因是發酵瓶漏氣，D正確。4 .回答下列有關傳統發酵技術

31、的問題：(1)在利用果汁制作果酒時，從微生物培養的角度分析，果汁能夠為制作果酒所用的 酵母菌提供水、無機鹽、 。在利用葡萄糖溶液制作果酒時，需對葡萄糖 溶液的濃度進行調整，目的是 (2 )在利用果酒制作果醋時，醋酸菌將酒精轉變為醋酸的途徑是 O制作果醋時應持續通入無菌空氣，其原因是 （3）在腌制泡菜時，要定期測定亞硝酸鹽含量，一般采用比色法進行測定，測定時將 待測溶液與 的顏色進行比較，并估算出亞硝酸鹽含量，在進行待測液的取樣后 要,防止泡菜被污染。解析：（1）制作果酒時，所用果汁相當于酵母菌的培養基，因此果汁能夠為酵母菌的 生長提供水、碳源、氮源和無機鹽等。在利用葡萄糖溶液制作果酒時，葡萄糖

32、的濃度也不 能太高，否則酵母菌不能正常生長或失水死亡；葡萄糖的濃度不能太低，否則不能滿足酵 母菌發酵對葡萄糖的需要。（2）果醋發酵時需要醋酸菌，當缺少糖源時，醋酸菌可以將酒 精變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。醋酸菌為好氧型細菌，故制作果醋時，氣體入口應持續 通入無菌空氣。（3）在腌制泡菜的過程中，測定亞硝酸鹽含量的方法是比色法，即在鹽酸 酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N-1-泰基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料，將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準顯色液進行目測比較，估算泡 菜中亞硝酸鹽含量。在進行待測液取樣時要用洗凈的筷子或小匙，取樣后迅速封壇，防止 泡菜被污染。答案：（1

33、）碳源和氮源避免葡萄糖的濃度過高，影響酵母菌正常生長或引起酵母菌失水死亡，同時又能滿足酵母菌發酵對葡萄糖的需要（2）先將酒精變為乙醛，再將乙醛變為醋酸醋酸菌為好氧型細菌（3）標準顯色液迅速封壇微生物發酵過程中滅菌措施的分析微生物發酵過程應該從原料、裝置和實驗過程三個層次進行無菌操作。以果酒與果醋 制作中原料的消毒為例：（1）榨汁前葡萄應先沖洗再去枝梗，因為若先去枝梗則會使一些微生物侵入果實內 部，影響果酒的制作；（2）體積分數為 70%勺酒精殺菌效果最強，若酒精濃度過低，殺菌效果弱，而濃度過 高，又會使菌體表面蛋白質凝固形成一層保護膜，乙醇分子不能滲入其中，從而使殺菌效 果受到影響。強化練習知

34、能提升1 . （2019 臨沂高三*II擬）取 9個潔凈培養皿，均分為三組（I、n、出） ，各組分別 加入等量的不同培養基，每個平板均接種0.1 mL大腸桿菌菌液，37 C培養36小時后，統計菌落數（見表），以下相關敘述錯誤的是（）組別/口加小各平板的菌落數123I瓊脂、GH2Q、NHNO303127n瓊脂、GH12Q、nhno、維生素169178193m瓊脂、NHNQ維生素001a. i組和n組說明維生素可以促進大腸桿菌生長繁殖b. n組和m組說明大腸桿菌正常生長需要葡萄糖C.三組實驗均采用了稀釋涂布平板法，以便菌落計數D.三組實驗所使用的培養基均需62 C、30 min滅菌解析：選 D。I

35、組和n組培養基成分的差異是有無維生素，結果可以說明維生素可以 促進大腸桿菌的生長繁殖，A正確；n組和m組的差異是有無葡萄糖，結果說明，沒有葡萄糖大腸桿菌不能正常生長，B正確；采用稀釋涂布平板法接種大腸桿菌便于菌落計數，C正確；對培養基加熱到 62 C不能徹底滅菌，應采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，D錯誤。2 . （2019 山東濰坊調研）下列有關使用高壓蒸汽滅菌鍋的操作，錯誤的是（）A.加水時，水面應與三角擱架平齊B.加蓋時，將排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內C.加熱時，待冷空氣完全排盡后關上排氣閥D.切斷電源后，打開排氣閥使壓力表降到零后開蓋解析：選 Do在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時，加水時，水面應與

36、三角擱架平齊，A正確；加蓋時，應該將排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內，B正確；加熱時，應該等冷空氣完全排盡后再關上排氣閥，C正確；切斷電源后，應該等壓力表降到零后再打開排氣閥并開蓋，D錯誤。3 .下列關于“檢測土壤中細菌總數”實驗操作的敘述，錯誤的是（）A.用蒸儲水配制牛肉膏蛋白月東培養基，經高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL ,分別涂布于各組平板上C.將實驗組和對照組平板倒置，37 C恒溫培養2448小時D.確定對照組無菌后，選擇菌落數在300以上的實驗組平板進行計數解析：選 Do首先要進行培養基的制備，用蒸儲水配制牛肉膏蛋白月東培養基，經

37、高 溫、高壓滅菌后倒平板，A正確；取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL ,分別涂布于各組平板上，B正確；將實驗組和對照組平板倒置，37 C恒溫培養2448小時，C正確；確定對照組無菌后，選擇菌落數在30300的實驗組平板進行計數，求其平均值，再通過計算得出土壤中細菌總數，D錯誤。4 . （2019 濟南高三模擬） 下圖所示的裝置可用于生物技術實踐的相關實驗，下列有關 敘述錯誤的是（）充氣口排氣uA.乙裝置可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作B.利用裝置甲制作泡菜時，應按照清水與鹽的質量比為4 ： 1的比例配制鹽水C.用裝置乙制作果酒時溫度應控制在30 c左右，制作果醋時

38、應適當降溫D.裝置乙的排氣口通過一個長而彎曲的膠管，可防止空氣中微生物的污染解析：選 Co乙裝置可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作，先密封后通入空氣，A正確；利用裝置甲制作泡菜時，應按照清水與鹽的質量比為4： 1的比例配制鹽水，B正確；用裝置乙制作果酒時溫度應控制在1825 C,制作果醋時溫度為 3035 C,制作果醋時應適當升溫，C錯誤；裝置乙的排氣口通過一個長而彎曲的膠管，排出果酒制備時產 生的二氧化碳，而且能防止空氣中微生物的污染，D正確。5 .（不定項）下列有關實驗操作流程的敘述，錯誤的是（）A.制備牛肉膏蛋白月東固體培養基的操作順序為計算一稱量一溶化一倒平板一滅菌B.在制作果醋的過

39、程中，要將溫度嚴格控制在3035 C,時間控制在 78 d左右C.在泡菜的制作過程中要保證泡菜壇內乳酸菌發酵所需的有氧環境D.果酒制作的實驗流程是挑選葡萄一沖洗一榨汁一酒精發酵一果酒解析：選 AG制備牛肉膏蛋白月東固體培養基的操作順序為計算一稱量一溶化一滅菌一 倒平板，A錯誤；在制作果醋的過程中，要將溫度嚴格控制在3035 C,時間控制在78d左右，B正確；在制作泡菜時，應向泡菜壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內乳酸菌發 酵所需的無氧環境，C錯誤；果酒制作的實驗流程是挑選葡萄一沖洗一榨汁一酒精發酵一果酒，D正確。6 .（不定項）關于微生物的實驗室培養，下列敘述正確的是（）A.為避免污染，實驗操

40、作應在酒精燈火焰上進行B.瓊脂是從紅藻中提取的多糖，在配制培養基中用作凝固劑C.接種環、接種針、試管口等常使用灼燒滅菌法D.試管、燒杯、培養基等可'以用高壓蒸汽滅菌法滅菌解析：選BCD為避免污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行，A錯誤；瓊脂在配制培養基中用作凝固劑，它是從紅藻中提取的一種多糖，B正確；常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法，接種環、接種針、試管口等常使用灼燒滅菌法，C正確；培養基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，試管、燒杯等也可采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，D正確。7 .楊梅是某地特色水果之一，某工廠對其深加工，進行了楊梅酒和楊梅醋的研制。請根據所學知識回答下列問題:（1）在制備楊梅酒過程中，需要控制的發酵溫度為 。發酵罐頂上彎管中常需 要加水，其主要目的是 。發酵一定時間后，觀察到 說明發酵基本完畢。（2）在制備楊梅醋過程中，發酵罐內需要先填充經 處理的木材刨花，然后加 入含 菌的培養液，加木材刨花的目的是 ;再讓發酵完畢的楊梅酒流入發酵罐進行楊梅醋發酵，楊梅醋的pH可通過 來調節。（3）若發酵好的楊梅酒全部制成楊梅醋，則發酵制醋過程中