1、生化試劑各機型參數(shù)確定生化試劑各機型參數(shù)確定目錄生化試劑主要參數(shù)及意義生化試劑其他參數(shù)及意義各機型生化分析儀概括介紹各機型參數(shù)特點生化試劑主要參數(shù)及意義生化試劑說明書中各參數(shù)（例：脂肪酶）項目名稱方法類型反應(yīng)方向測定波長測定溫度樣本體積試劑量分析時間校正方法生化試劑主要參數(shù)及意義項目名稱(test name)：常以項目的英文縮寫來設(shè)置。方法類型(assay/Method )（適用于儀器的方法）：方法類型主要分為：終點法和動力學法u終點法u一點終點法：樣本與試劑混勻一定時間后讀取反應(yīng)終點吸光度，如血糖氧化酶法、總蛋白雙縮脲法、白蛋白溴甲酚綠法等。u兩點終點法：（又稱固定時間法）樣本與試劑混勻一定

2、時間后先讀取吸光度A1，延遲一定時間后讀取吸光度A2，計算吸光度差值與標準比較求得結(jié)果。如肌酐苦味酸法等。可消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾。生化試劑主要參數(shù)及意義u動力學法u一級動力學法：（兩點速率法）樣本與試劑反應(yīng)不斷消耗反應(yīng)物，反應(yīng)速度不斷減小，吸光度變化不斷減小，在特定時間段內(nèi)進行監(jiān)測，該時間段內(nèi)吸光度升高或降低與樣本濃度成正比，如同型半胱氨酸、總膽汁酸等。u零級動力學法：（連續(xù)監(jiān)測法，用于酶活性監(jiān)測）樣本與試劑反應(yīng)，反應(yīng)物可勻速生成某個產(chǎn)物，如NADH，在特定波長下吸光度均勻的增大或減小，增大或減小的速度與樣本濃度呈正比。如堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶等。生化試劑主要參數(shù)及意義一級動力學法：（兩點速率法

3、）生化試劑主要參數(shù)及意義零級動力學法：（連續(xù)監(jiān)測法，用于酶活性監(jiān)測）生化試劑主要參數(shù)及意義反應(yīng)方向(response direction)u正向反應(yīng)（UP/INC/+）：吸光度增加。u負向反應(yīng)（DOWN/DEC/-）：吸光度下降。測定溫度30、37、25樣本體積（sample volum）一般為2-35l ，以0.1l步進。試劑量（regengt volum）一般為20-300l ，以1l步進。不同機型生化分析儀的樣本量及試劑量限制不同，樣本與試劑可根據(jù)比例進行增大或減少。生化試劑主要參數(shù)及意義測定波長（wavelength）：不同生化分析儀具備不同的波長。可選擇單波長或雙波長。u主波長（ma

4、in wavelength/primary wavelength ）根據(jù)待測物質(zhì)在特定波長下具有最大吸收峰來選擇主波長。u副波長（次波長sub wavelength/second wavelength ）可不選擇設(shè)定。副波長可消除樣本溶血，血清渾濁的干擾影響，副波長與主波長越接近越好。檢測時吸光度值為主波長的吸光度減去副波長的吸光度。生化試劑主要參數(shù)及意義分析時間：u孵育時間（incubate time）一點終點法的孵育時間是指樣本與試劑開始到反應(yīng)終點的時間；兩點終點法是指第一個吸光度反應(yīng)點開始到第二個吸光度點為止時間。一般為5min。u延遲時間（delay time）加入第二反應(yīng)試劑后到第一

5、個吸光度監(jiān)測點開始的時間。即樣本與反應(yīng)試劑（第二試劑）混勻開始至第一個吸光度選擇點之間的時間。單試劑一般設(shè)置為30s，雙底物反應(yīng)或酶類反應(yīng)一般設(shè)置為1-3min。u連續(xù)監(jiān)測時間（ continuous monitoring time）在延遲時間后的零級反應(yīng)開始，監(jiān)測至少4個點（3個吸光度變化值），一般為1-2min。生化試劑主要參數(shù)及意義校正方法（Calibration Type）：可采用標準液（校準液）定標方式或理論K值方式獲取標準曲線。u線性定標（ Linear/AB）：兩點定標，標準曲線呈直線。u非線性定標（Spline/4AB/polygonal）：多點定標，標準曲線近似于直線。u理論

6、K值 （Factor/MB）：多用于連續(xù)監(jiān)測法測定酶活時，無需定標曲線，根據(jù)摩爾消光系數(shù)計算得到結(jié)果。 106 VF= vL生化試劑主要參數(shù)及意義V：反應(yīng)體系總體積（ml）；v：樣本體積（ml）：摩爾消光系數(shù)（cm2/mol）L：比色杯光徑（cm）；106：將mol換算為mol生化試劑其他參數(shù)及意義試劑吸光度上限、下限/試劑吸光度界限(OD Limt) 底物耗盡限額(substrate exhaust limit)試劑吸光度線性范圍(Linearity） 試劑線性范圍（Technical Limit）前區(qū)檢查限(Prozone Check Limt) 方程式（Fomular）小數(shù)位（Decim

7、al Places）雙份界限（Duplicate Limit）敏感性界限(Sensitivity Limit)第一標準吸光度界限(S1 Abs.limt)反應(yīng)過程吸光度界限(Absorbance Limit)生化試劑其他參數(shù)及意義試劑吸光度上限、下限/試劑吸光度界限(OD Limt) 常用規(guī)定波長及光徑下的吸光度值表示。終點法常在0點讀數(shù)，連續(xù)監(jiān)測法常以反應(yīng)監(jiān)測起始點來判讀該吸光度值。可用于判斷試劑質(zhì)量。檢測試劑空白時，若超過此參數(shù)的限值，則提示試劑可能失效。底物耗盡限額(substrate exhaust limit)連續(xù)監(jiān)測法或兩點終點法時設(shè)置。根據(jù)吸光度上升或下降設(shè)定MAX-OD/MIN

8、-OD，吸光度超過設(shè)定界限時，代表樣品酶活非常高，底物消耗太快，所測得結(jié)果不能代表真實酶活力。生化試劑其他參數(shù)及意義 試劑吸光度范圍(Linearity） 線性度不能超過設(shè)定界限，超限時說明吸光度的變化量之間已經(jīng)不成線性或說明底物不足，檢測結(jié)果會變低。試劑線性范圍（Dynamic Range/Technical Limit）與試劑/樣本比值有關(guān)，超出范圍的樣本應(yīng)增加樣本量重測或樣本稀釋后重測。生化試劑其他參數(shù)及意義方程式（Fomular）Y=aX+ba為截距，b為斜率。用于校正檢測結(jié)果，一般a為1.000，b為0.000，小數(shù)位（Decimal Places）主要根據(jù)項目參考范圍的小數(shù)位進行設(shè)

9、定，一般0-2位。前區(qū)檢查限(Prozone Check Limt) 主要用于免疫比濁法項目，可根據(jù)項目要求選YES或NO，比較終點法后兩個讀數(shù)點的差別，如果后一點比前一點的吸光度低，表示已經(jīng)有抗原過剩，樣本應(yīng)稀釋后重測 生化試劑其他參數(shù)及意義雙份界限（Duplicate Limit）也稱離散性，是同一個標準液兩次測定吸光度的差值，表示試劑和儀器的重復性,此值越小表示試劑和儀器的精密度越高敏感性界限(Sensitivity Limit) 可以檢測的最低吸光度值，也就是檢測最低濃度的可靠性第一標準吸光度界限(S1 Abs.limt)通常指零濃度標準品的吸光度界限，在終點法和速率法中計算方式不同生

10、化試劑其他參數(shù)及意義反應(yīng)過程吸光度界限(Absorbance Limit)在動力學反應(yīng)中,由于高濃度（活性）樣本使底物耗盡，所測吸光度已不可靠,使高濃度的樣本測定值低很多,甚至為負值。為能正確反映測定結(jié)果，需設(shè)置底物耗盡限(某一特定吸光度)，是在反應(yīng)時間內(nèi)反應(yīng)沒有發(fā)生底物耗盡時所能達到的最小(反應(yīng)曲線向下)或最大(反應(yīng)曲線向上)的吸光度值 ，該吸光度即為吸光度界限。可用于確保高濃度（活性）樣本結(jié)果的準確性。淡藍色字體標注參數(shù)設(shè)定時一般為機器默認。各機型生化分析儀概括介紹AU400AU640AU2700AU480各機型生化分析儀概括介紹機型機型 試劑位試劑位 R1/R2R1/R2 項目項目 (

11、(雙雙) ) 速度速度 無無 ISEISE 樣本樣本 (ul)(ul) R1R1 (ul)(ul) R2R2 (ul)(ul) 反應(yīng)液反應(yīng)液 (ul)(ul) AU400AU400 48/4848/48 3838 400400 2 2- -5050 2525- -300300 AU600AU600 48/4848/48 4848 800800 2 2- -5050 2525- -300300 AU640AU640 48/4848/48 4848 800800 2 2- -5050 2525- -300300 150150- -550550 AU2700AU2700 48/4848/48 484

12、8 16001600 1.61.6- - 1515- -250250 120120- -430430 AU5600AU5600 26402640 AU系列各機型生化分析儀概括介紹各機型生化分析儀概括介紹機機型型 試試劑劑位位 R R1 1/ /R R2 2 項項目目 （雙雙） 速速度度 無無 I IS SE E 樣樣本本 ( (u ul l) ) R R1 1 ( (u ul l) ) R R2 2 ( (u ul l) ) 反反應(yīng)應(yīng)液液 ( (u ul l) ) 7 76 60 00 0P P 4 44 4 8 80 00 0 2 2- -3 35 5 7 76 60 00 0D D 1 1

13、6 6 2 24 40 00 0 2 2- -2 20 0 2 20 0- -2 27 70 0 1 15 50 0- -3 38 80 0 7 71 17 70 0S S 4 45 5/ /4 45 5 8 86 6 8 80 00 0 2 2- -3 35 5 2 20 0- -2 27 70 0 1 15 50 0- -3 35 55 5 7 70 06 60 0 3 32 2/ /3 32 2 3 32 2 3 36 60 0 3 3- -5 50 0 5 50 0- -3 35 50 0 2 25 50 0- -5 50 00 0 7 70 08 80 0 3 33 3/ /3 33

14、 3 4 49 9 3 36 60 0 2 2- -2 25 5 2 20 0- -2 27 70 0 1 15 50 0- -3 32 20 0 7 70 02 20 0 4 40 0 3 36 6 2 20 00 0 2 2- -5 50 0 2 20 0- -3 35 50 0 1 18 80 0- -5 50 00 0 7 71 15 50 0 3 32 2/ /3 32 2 6 60 00 0 2 25 50 0- - 7 71 18 80 0 3 33 3/ /3 33 3 8 86 6 8 80 00 0 1 1. .5 5- -3 35 5 2 20 0- -2 27 70 0

15、 1 12 20 0- -3 30 00 0 日立系列各機型生化分析儀概括介紹Beckman CX5Beckman LX20各機型生化分析儀概括介紹Beckmam系列機機型型 試試劑劑位位 R R1 1/ /R R2 2 項項目目 速速度度 無無I IS SE E 樣樣本本 ( (u ul l) ) R R1 1 ( (u ul l) ) R R2 2 ( (u ul l) ) 反反應(yīng)應(yīng)液液 ( (u ul l) ) C CX X4 4 2 24 4 2 24 4 2 22 25 5 3 3- -2 25 5 C CX X5 5 2 24 4 2 29 9 6 60 00 0 3 3- -6

16、69 9 C CX X7 7 2 24 4 3 33 3 9 90 00 0 3 3- -2 25 5 C CX X9 9 2 24 4 3 33 3 9 90 00 0 3 3- -2 25 5 L LX X2 20 0 4 41 1 7 70 0 8 80 00 0 3 3- -2 25 5 2 20 00 0- -3 32 27 7/ /6 6- -7 75 5 2 22 25 5- -3 32 25 5 各機型參數(shù)特點不同機型分析方法 表示方法 常用選擇項 COBAS Asaay Rate A/2Pont rate/1 Ponit/2 Point end HITACHI Assay c

17、ode Rate A/2Pont rate/1 Ponit/2 Point endOLYMPUS Method RATE/FIXED/ENDBECKMAN Reaction type RATE1/2/END1/2ABBOTT Reaction defintion Rate /Flex Rate/End 各機型參數(shù)特點 不同機型反應(yīng)方向 表示方法 可選擇項 COBAS INC/DEC INC/DECHITACHI INC/DEC INC/DECOLYMPUS Reaction Slope +/-BECKMAN Reaction Direction Positive/NegativeABBOTT

18、Reaction Mode Up/Down各機型參數(shù)特點 不同機型測定波長 主波長 次波長COBAS Wave(Main/ Sub)HITACHI Wave(Main/ Sub)OLYMPUS Wavelength pri Wavelength secBECKMAN Primary Wavelength Secondary WavelengthABBOTT Wavelength Primary Wavelenght Secondary 不同機型所具波長數(shù)目不同，一般波長分布為 從紫外線到紅外線340-800nm。參數(shù)設(shè)定時可選擇與項目要求相近的波長。各機型參數(shù)特點不同機型反應(yīng)時間：儀器的一個分析周期中，試劑和樣本混合最后一點測定讀數(shù)時間 常見儀器可以選擇的時間COBAS P800 :110、15、22分鐘 C501: 310分鐘HITACHI ：3、5、8、10、15、22分鐘OLYMPUS固定時間： 8.3分鐘ABBOTT固定時間：9.6 分鐘BECKMAN可達時間：975秒各機型參數(shù)特點 不同機型試劑加入相應(yīng)時間(分鐘) HITACHI R1 R2(1.5) R3(5) R4(9) P800 R1 R2(1.5) R3(5) R4(9) C501 R1 R2(1.5) R3