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文檔簡介
1、1、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用(果酒果醋、腐乳、泡菜) 022、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用113、植物組織培養(yǎng)(菊花組培、月季花藥) 254、酶的研究與應(yīng)用(果膠酶、加酶洗衣粉) 355、 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)(非重點(diǎn)內(nèi)容)436、植物有效成分提取(植物芳香油的提取、胡蘿卜素的提取)-5651傳統(tǒng)發(fā)醉技術(shù)的應(yīng)用課題1:果酒和果醋的制作學(xué)習(xí)目標(biāo):1、說明果酒和果醋制作的原理。2、設(shè)計(jì)制作果酒和果醋的裝置。3、嘗試果酒和果醋的制作。4、果酒和果醋制作中發(fā)酵需要的條件。學(xué)習(xí)重難點(diǎn):1、說明果酒果醋制作的原理2、果酒和果醋制作中發(fā)酵需要的條件 自主學(xué)習(xí):一、果酒制作的原理1、酵母菌的生物學(xué)特征屬于 生物。新陳代謝類型:
2、異氧兼性厭氧型。酵母菌是兼性厭氧微生物,在有氧條件下,酵母菌進(jìn)行 反應(yīng)式為: 。在無氧條件下,酵母菌能進(jìn) 行,反應(yīng)式為: 0 繁殖方式:酵母菌可以通過出芽進(jìn)行 無性生殖,也可以通過形成抱子進(jìn)行有性 生殖。但多以出芽方式進(jìn)行無性生殖。 無性生殖即在環(huán)境條件適合時(shí),從母細(xì)胞 上長出一個(gè)芽,逐漸長到成熟大小后與母體分離。在營養(yǎng)狀況不好時(shí),一些可進(jìn) 行有性生殖的酵母菌會形成抱子(一般是四個(gè)),進(jìn)入休眠狀態(tài),在條件適合時(shí) 再萌發(fā)。2、在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮上 的。3、果酒制作時(shí)需控制溫度在。4、紅色葡萄果酒的顏色成因:在發(fā)酵過程中,隨著 的提高,紅葡萄皮 的 進(jìn)入發(fā)酵液,使
3、葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。一、果醋制作的原理1、醋酸菌的生物學(xué)特性屬于生物。新陳代謝類型:異氧需氧型。有氧呼吸的場所:細(xì)胞膜。好氧細(xì)菌與呼吸作用有關(guān)的酶主要分布在細(xì)胞膜上。 繁殖方式:二分裂細(xì)菌沒有核膜,只有一個(gè)大型的環(huán)狀 DN吩子,細(xì)菌細(xì)胞分裂時(shí),DN的子附著 在細(xì)胞膜上并復(fù)制為二,然后隨著細(xì)胞膜的延長,復(fù)制而成的兩個(gè)DN砌子彼此 分開;同時(shí),細(xì)胞中部的細(xì)胞膜和細(xì)胞壁向內(nèi)生長,形成隔膜,將細(xì)胞質(zhì)分成兩 半,形成兩個(gè)子細(xì)胞,這個(gè)過程就被稱為細(xì)菌的二分裂。2、果醋制作的原理當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí),醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成 。當(dāng)缺少糖源時(shí),醋酸菌將乙醇變?yōu)?,再變?yōu)椤7磻?yīng)式為:。3、果醋制作時(shí)需控制的條件
4、環(huán)境條件: 充足。溫度:醋酸菌生長的最適溫度為 。4、在變酸的酒的表面觀察到的菌膜是 在液面大量繁殖而形成的。溶液內(nèi)部能形成菌膜嗎?三、果酒和果醋的制作過程挑選葡萄T沖洗T J JJ果酒果醋四、發(fā)酵裝置的設(shè)計(jì)出料口果酒和果醋的發(fā)酵裝置示意圖1、設(shè)計(jì)思路因?yàn)楣浦谱鞒跗谛枰酰渍麄€(gè)制作過程都需氧,所以需要帶開關(guān)的充氣 口,以調(diào)控對氣體的需求。在果酒制作過程中會產(chǎn)生CO2,所以要有排氣口。實(shí)驗(yàn)過程中要取樣檢測,所以有出料口的設(shè)計(jì)。思考:為什么排氣口要通過一個(gè)長而彎曲的膠管與瓶身連接?2、實(shí)驗(yàn)操作(1)材料的選擇與處理:選擇新鮮的葡萄,榨汁前先將葡萄沖洗,并除去枝梗。思考:你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還
5、是先除去枝梗?為什么?(2)滅菌,防止發(fā)酵液被污染榨汁機(jī)要清洗干凈,并晾干。發(fā)酵瓶要清洗干凈,并用 消毒,或用洗潔精洗滌。裝入葡萄汁后,。榨汁將沖洗好并除枝梗的葡萄放入榨汁機(jī)榨取葡萄汁。(4)發(fā)酵,控制好發(fā)酵的條件將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶時(shí),要留要大約 的空間。在制葡萄酒的過程中,要將溫度嚴(yán)格控制在 ,時(shí)間控制在左右,可通過 對發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測。在制葡萄醋的過程中,要將溫度嚴(yán)格控制在 ,時(shí)間控制在左右,并注意適時(shí)通過 充氣。思考:1、為什么在酒精發(fā)酵過程中往往“先通氣后密封”?2、酒精發(fā)酵過程中發(fā)生“先來水后來酒”現(xiàn)象,其原因是什么?五、酒精的檢驗(yàn)1、檢驗(yàn)試劑:2、現(xiàn)象:在 條件下,反應(yīng)呈現(xiàn)
6、。注意:發(fā)酵是通過微生物的培養(yǎng)來大量生產(chǎn)各種代謝產(chǎn)物的過程,包括有氧發(fā)酵(如醋酸發(fā)酵)和無氧發(fā)酵(如酒精發(fā)酵),所以發(fā)酵才無氧呼吸。鞏固提高1、利用酵母菌釀酒時(shí),從開始便持續(xù)向發(fā)酵罐內(nèi)通入無菌空氣,結(jié)果是()A .酵母菌大量死亡,酒精減產(chǎn)B .酵母菌數(shù)量不變,酒精產(chǎn)量不變C .酵母菌數(shù)量增多,酒精減產(chǎn)D .酵母菌數(shù)量增多,不產(chǎn)生酒精2、單細(xì)胞綠藻的培養(yǎng)液和單細(xì)胞酵母菌的培養(yǎng)液,所含成分的最大區(qū)別是()A.前者必須含有有機(jī)成分B.后者必須含有有機(jī)成分C.前者必須通入氧氣D.后者必須通入氧氣3、制作葡萄醋時(shí),必須控制的發(fā)酵條件是A.溫度18250C,適時(shí)通氣B.溫度18250c,隔絕空氣C.溫度3
7、035C,隔絕空氣D.溫度3035°C,適時(shí)通氣4、在一個(gè)普通的錐形瓶中,加入大半瓶含有酵母菌的葡萄糖溶液后密封。下列5、釀酒用的酵母菌既可進(jìn)行有性生殖,又可進(jìn)行出芽生殖,二者相比,前者特 有的是()A.基因突變 B .基因重組 C .染色體變異 D .不可遺傳的變異6、制果醋時(shí),要適時(shí)通過充氣口進(jìn)行充氣是因?yàn)椋ǎ〢 .醋酸菌是好氧菌,將酒精變成醋酸時(shí)需要 O2的參與B.酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵時(shí)需要 O2C.通氣,防止發(fā)酵液霉變D.防止發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生的CO2氣體過多而引起發(fā)酵瓶的爆裂7、酒廠利用酵母菌釀酒過程中,經(jīng)檢測活菌數(shù)量適宜但卻不產(chǎn)生酒精,應(yīng)采取 的措施是()A.降低溫度B.隔絕空氣C
8、.加緩沖液 D.加新鮮培養(yǎng)基8、現(xiàn)有一瓶葡萄糖溶液,內(nèi)有適量酵母菌,經(jīng)檢測瓶中放出的CQ的體積與吸收Q的體積之比為5: 3。這是因?yàn)椋ǎ〢、有1/4的酵母菌在進(jìn)行有氧呼吸B 、有1/3的酵母菌進(jìn)行有氧呼吸G有1/2的酵母菌有氧呼吸D 、有2/3的酵母菌有氧呼吸9、在利用葡萄自然發(fā)酵產(chǎn)生果酒的過程中,未經(jīng)殺菌,但其他雜菌不能生長的 原因是()A、經(jīng)沖洗后的葡萄上只有野生型酵母菌無其他雜菌R其他雜菌不能利用葡萄汁中的糖作為碳源G在缺氧和呈酸性的發(fā)酵液中,酵母菌能大量繁殖,其他雜菌不適應(yīng)環(huán)境而被 抑制D酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生大量酒精,殺死了其他雜菌10、在果酒的制作實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)用重銘酸鉀檢驗(yàn)是否有酒精產(chǎn)生,正
9、確的操作步驟是()A先在試管中加入適量的發(fā)酵液,然后再加入硫酸和重銘酸鉀的混B、先在試管中加入適量的發(fā)酵液,然后再加入重銘酸鉀 ,混勻后滴加硫酸G 先在試管中加入適量的發(fā)酵液,然后再加入硫酸,混勻后滴加重銘酸鉀D先在試管中加入適量的發(fā)酵液,然后再加入硫酸 ,混勻后滴加重銘11、將葡萄汁制成果酒和果醋后()A.能量減少,有機(jī)物種類變化B .能量增加,有機(jī)物種類不變C能量不變,有機(jī)物種類變化D .能量減少,有機(jī)物種類不變12、嚴(yán)格控制發(fā)酵條件是保證發(fā)酵正常進(jìn)行的關(guān)鍵, 直接關(guān)系到是否能得到質(zhì)量高、產(chǎn)量多的理想產(chǎn)物。通常所指的發(fā)酵條件不包括()A.溫度控制B.溶氧控制C. pH控制D.酶的控制13、
10、(多選)在利用葡萄釀制果酒的過程中,可能觀察到的現(xiàn)象有()A.有酒精大量產(chǎn)生B.發(fā)酵液逐漸澄清C.發(fā)酵液中有大量氣泡產(chǎn)生D.發(fā)酵液紅色加深14、下圖簡單表示了葡萄酒的釀制過程,請據(jù)圖分析:葡萄汁+白糖+酵母菌 一天攪拌23次乙與空氣斷絕接觸(1825 c約10天)丙葡萄酒的釀制原理是:先通氣使酵母菌進(jìn)行,以增加酵母菌的數(shù) 量,然后使酵母菌 獲得葡萄酒。在甲中進(jìn)行攪拌的目的是 ,乙中排出的氣體是發(fā)酵過程產(chǎn)生的。寫出甲、乙中有關(guān)的化學(xué)反應(yīng)式:甲: 乙:如果內(nèi)忘記蓋上蓋子,一段時(shí)間后會變酸,這是由于酒精在 的作 用下生成了,寫出此時(shí)發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)式: 。 15、在啤酒生產(chǎn)過程中,發(fā)酵是重要環(huán)節(jié).生產(chǎn)
11、過程大致如下:將經(jīng)過滅菌的麥 芽汁充氧,接入啤酒酵母菌菌種后輸入發(fā)酵罐。初期,酵母菌迅速繁殖,糖度下 降,產(chǎn)生白色泡沫,溶解氧漸漸耗盡。隨后,酵母菌有氧呼吸迅速下降,酒精濃 度漸漸上升,泡沫不斷增多。當(dāng)糖度下降到一定濃度后,結(jié)束發(fā)酵.最后分別輸 出固體物質(zhì)和鮮啤酒。根據(jù)上述過程,回答下列問題:該過程表明啤酒酵母菌異化作用的特點(diǎn)是 (2)初期酵母菌迅速繁殖的主要方式是(3)酒精主要是啤酒酵母菌進(jìn)行 產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物. 經(jīng)測定,酵母菌消耗的糖中,98.5 %形成了、和.及其他發(fā)酵產(chǎn)物,其余 1.5 %用于(5)請寫出由麥芽糖T葡萄糖T酒精的反應(yīng)方程式:課后反思:課題2腐乳的制作一、學(xué)習(xí)目標(biāo)1 .以制
12、作腐乳為例了解傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用。2 .說明腐乳制作過程的科學(xué)原理,設(shè)計(jì)并完成腐乳的制作。3 .分析影響腐乳品質(zhì)的條件。二、學(xué)習(xí)重點(diǎn)與難點(diǎn)學(xué)習(xí)重點(diǎn):說明腐乳制作過程的科學(xué)原理,設(shè)計(jì)并完成腐乳的制作。學(xué)習(xí)難點(diǎn):在實(shí)踐中摸索影響腐乳品質(zhì)的條件。自主學(xué)習(xí)一、基礎(chǔ)知識:(腐乳制作的原理)1 .參與豆腐發(fā)酵的微生物有 、等多種,其中起主要作用的是。2 . 毛霉是一種, 分布廣泛,常見 于、,具有發(fā)達(dá)的。3 .毛霉等微生物產(chǎn)生的 能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成和 , 產(chǎn)生的 可將脂肪分解為 和。在多種微生物的 作用下,普通的豆腐轉(zhuǎn)變成風(fēng)味獨(dú)特的腐乳。思考:豆腐變?yōu)楦榈倪^程中,有機(jī)物總量、有機(jī)物種類有何變化?二
13、、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(一)制作腐乳的實(shí)驗(yàn)流程:(二)毛霉的生長:1 .豆腐塊表面長滿菌絲 ,溫度應(yīng)控制在,并保持一定的濕度,約后,毛霉開始生長,天后,菌絲生長旺盛,天后,豆腐塊表面布滿菌 絲。2 .豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的 。現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在 的條件下,將優(yōu)良 直接接種在豆腐上,這樣可以避免其他菌種的 污染,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。思考:你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識,解釋豆腐長白毛是怎么一回事?提示:豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。 嚴(yán)格地說是直立菌絲,在豆腐中還 有匍匐菌絲。(三)加鹽腌制:1 .將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地?cái)[放在瓶中 ,同時(shí)逐層 隨著層數(shù)的 加高而增加鹽量,接近瓶口表面的鹽要 。2 .
14、加鹽腌制的目的是。思考:瓶口處多加鹽的原因是什么?(四)配制鹵湯1 .鹵湯直接關(guān)系到腐乳的 、 、 。鹵湯是由 和各種 配制而成.2 .鹵湯中酒的含量一般控制在 左右.加灑的目的是。3 .香辛料可以, 也具有 作用。討論:1.腐乳外面有一層致密的皮,它是怎樣形成的?作用是什么?提示:“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長的菌絲,它能形成腐乳的“體”, 使腐乳成形。2.哪種豆腐適合用來做腐乳?為什么?提示:含水量為70%£右的豆腐適于做腐乳。因?yàn)橛煤窟^高的豆腐制腐乳, 不易成形。三、操作提示1 .控制好材料的用量用鹽腌制時(shí),注意控制鹽的用量。鹽的濃度太低,;鹽的濃度過高,左右。酒精含量
15、過鹵湯中酒的含量應(yīng)控制在高,酒精含量過低,2 .防止雜菌污染用來腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干凈后要用 。裝瓶時(shí),操作要。整齊地?cái)[放好豆腐、加入鹵湯后,要用膠條將 瓶口。封瓶時(shí),最好將瓶口通過 ,防止瓶口被污染。鞏固提升1、測定3類細(xì)菌對氧的需要,讓它們在 個(gè)不同的試管中生長,右圖顯示了細(xì)菌的生 長層。據(jù)此判斷:只能在需氧培養(yǎng)基中 繁殖、只能在無氧培養(yǎng)基中繁殖、在有氧 和無氧的培養(yǎng)基中都能繁殖的細(xì)菌依次是配棉花一棉花-細(xì)菌繁殖年棉花軟-細(xì)菌巍A、IH、I、IIB 、m、H、ImD 、 I、m、H2、豆腐發(fā)酵過程中,毛霉消耗的能量主要來自于哪種物質(zhì)的分解()A .脂肪B .磷脂C.葡萄糖D.蛋白質(zhì)3、
16、下列關(guān)于腐乳制作的描述中,錯(cuò)誤的是()A,在腐乳制作過程中必須有能產(chǎn)生蛋白酶的微生物參與B.含水量大于85%的豆腐利于保持濕度,適宜制作腐乳C .加鹽和加酒都能抑制微生物的生長D.密封瓶口前最好將瓶口通過火焰以防雜菌污染總結(jié)影響腐乳品質(zhì)的因素:1、鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒和各種香辛料配制而成。鹵 湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等,含量一般控制在 左右。加酒可以抑制微生物的生長,同時(shí)能使腐乳具有獨(dú)特的香味。香辛料種類很多,如:胡椒、 花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等,香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味,也具有 的作用。2、控制好材料的用量用鹽腌制時(shí),若鹽的濃度,不足以抑制微生物生長
17、,可能導(dǎo)致豆 腐腐敗變質(zhì);若鹽的濃度 ,會影響腐乳的口味。鹵湯中酒的含量應(yīng)控制在 左右。酒精含量過高,腐乳成熟的時(shí)間會;酒精含量過低,不足以抑制微生物生長,可能導(dǎo)致豆腐腐敗。3、防止雜菌的污染用來腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干凈后要用沸水消毒。裝瓶時(shí),操作要迅速小心。加入鹵湯后,要用膠條將瓶口密封。封瓶時(shí),最好將瓶口通過酒精燈的火焰,防止瓶口被污染。4、控制適宜的溫度:毛霉的最適生長溫度為 ,該溫度既能使毛霉 快速生長又不適于細(xì)菌、酵母菌和曲霉的生長,從而保證發(fā)酵時(shí)間和腐乳的風(fēng)味。課后反思:課題3制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量學(xué)習(xí)目標(biāo)1 .嘗試制作泡菜,并嘗試用比色法測定泡菜中亞硝酸鹽含量變化2 .討論
18、與亞硝酸鹽相關(guān)的食品安全問題。學(xué)習(xí)重點(diǎn)和難點(diǎn)1 .學(xué)習(xí)重點(diǎn)測定泡菜中亞硝酸鹽含量2 .學(xué)習(xí)難點(diǎn)泡菜中亞硝酸鹽含量的測定自主學(xué)習(xí)一乳酸菌1 .代謝類型為異養(yǎng)厭氧型,在 情況下,將葡萄糖分解成乳酸2 .常見種類: 和3 .分布:分布廣泛,、土壤、植物、人或動物的 內(nèi) 等均有分布。4 .應(yīng)用:常用于生產(chǎn)二亞硝酸鹽1.物理性質(zhì)粉末、易溶于 o2應(yīng)用在食品生產(chǎn)中常用作食品3 .分布自然界中分布廣泛。據(jù)統(tǒng)計(jì),亞硝酸鹽在蔬菜中的平均含量約為 ,咸 菜中平均含量在 以上,而豆粉中的平均含量可達(dá) 4 .對人體的影響膳食中的亞硝酸鹽一般不危害人體健康,當(dāng)人體攝入總量達(dá) 時(shí), 會引起中毒;當(dāng)攝入總量達(dá) 時(shí),會引起死
19、亡5 .我國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)亞硝酸鹽殘留量在肉制品中不得超過,醬腌菜中不超過,嬰兒奶粉中不得超過。6 .絕大多數(shù)亞硝酸鹽隨 排出,但在特定條件下,即適宜的 和一定的 作用,會轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì) -三泡菜腌制過程1 .泡菜壇的選擇(1)應(yīng)選用火候好、無砂眼、 、壇沿深、好的泡菜壇(2)檢查時(shí)可將壇口 壓入水中,看壇內(nèi)有無 現(xiàn)象2 .腌制(1)過程:將清水和鹽以 的質(zhì)量比例配制鹽水。將鹽水后備用。將蔬菜裝至 時(shí)加入香辛料,裝至 時(shí),加入鹽水,要使鹽水 蓋好壇蓋。將壇蓋邊沿的水槽中注滿水,以保證壇內(nèi)的 環(huán)境(2)條件:控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量。溫度 、食鹽用量不 足,腌制時(shí)間,容易造成細(xì)胞大量繁殖, 含
20、量增 加四亞硝酸鹽的測定1 .原理(1)在 條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生 反應(yīng)后,與N 1蔡基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成 色染料。(2)將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的 進(jìn)行比較,可以大致出泡菜中亞硝酸鹽的含量2 .測定步驟配制溶液一 一制備樣品處理液一 思考:亞硝酸鹽可轉(zhuǎn)化成致癌物質(zhì),為什么在食品生產(chǎn)中還可作為添加劑?鞏固提高1 .膳食中一般都含有一定量的亞硝酸鹽, 下列有關(guān)敘述中,不正確的是 ()A.當(dāng)人體攝入亞硝酸鹽的總量達(dá)到 0.30.5 g時(shí),會引起死亡B.在肉制品中亞硝酸鹽的含量不得超過 30 mg/kgC.醬腌菜中亞硝酸鹽的含量不得超過 20 mg/kgD.嬰兒奶粉中亞硝酸鹽的含量
21、不得超過2 mg/kg2,下列關(guān)于亞硝酸鹽含量測定過程的描述中,正確的是()A.重氮化一酸化一顯色一比色B.重氮化一酸化一比色一顯色C.酸化一重氮化一顯色一比色D.酸化一重氮化一比色一顯色4.將接種有乳酸菌的牛奶100 mL各4份分別裝在100 mL、200 mL、300 mL, 和400 mL的燒瓶內(nèi),將口密封,置于適宜溫度下培養(yǎng)。 24 h后產(chǎn)生乳酸最多的 是 ()A.100 mLB. 200 mLC .300 mLD. 400 mL5,下列關(guān)于亞硝酸鹽的敘述中,錯(cuò)誤的是()A.亞硝酸鹽為白色粉末,易溶于水B.亞硝酸鹽的分布廣泛,其中蔬菜中亞硝酸鹽的平均含量約為4 mg/kgC.咸菜中的亞
22、硝酸鹽的平均含量在 7 mg/kg以上,所以盡量少吃咸菜D.亞硝酸鹽具有防腐作用,所以在食品中應(yīng)多加些以延長食品的保質(zhì)期6 .在泡菜的制作過程中,下列有關(guān)敘述中,不正確的是()A.按照清水與鹽的質(zhì)量比為 4: 1的比例配制鹽水B.乳酸菌的代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型C.鹽水入壇前要煮沸冷卻,以防污染D.在壇蓋邊沿的水槽中要注滿水,以保證壇內(nèi)的無氧環(huán)境7 .在制備泡菜樣品處理液時(shí),對濾液起到凈化作用的是()A.氫氧化鋁溶液B.氫氧化鈉溶液C.氯化鎘溶液D.氯化鋼溶液課后反思:微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)學(xué)習(xí)目標(biāo)1. 了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識2. 掌握無菌操作技術(shù)3. 了解純化大腸桿菌的基
23、礎(chǔ)知識學(xué)習(xí)重點(diǎn)、難點(diǎn)了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識;掌握無菌操作技術(shù)自主學(xué)習(xí)一基礎(chǔ)知識d成關(guān)苴1J(1)培養(yǎng)基的種類包括 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基等(2)培養(yǎng)基的化學(xué)成分一般都含有 、 四類營養(yǎng)成分,(3)在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上,培養(yǎng)基還需要滿足微生物生 長對、以及 等的要求。例如:培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加 ;培養(yǎng)霉菌時(shí)需要將培養(yǎng) 基的PH調(diào)至;培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要將培養(yǎng)基的PH調(diào)至;培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無氧的條件【思考】為什么各種營養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都有水、無機(jī)鹽、碳源和氮 源?2.無菌技術(shù)0避免雜菌(1)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 污染的方法主要包括以下四個(gè)內(nèi)容: (2)消毒是指滅
24、菌是指【思考】消毒與滅菌的相同點(diǎn)與區(qū)別分別是什么?(3)實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法是 ,止匕外,人們也常使用 化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒,如用-等。常用的滅菌方法、y止匕外,實(shí)驗(yàn)室里還用 或 進(jìn)行消毒。二實(shí)驗(yàn)操作1 .制備牛肉膏蛋白豚固體培養(yǎng)基(1)制備牛肉膏蛋白豚固體培養(yǎng)基的方法步驟:一 一 一 一倒平板(2)倒平板的過程【思考】培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50左右,才能用來倒平板。你用什么方法來 估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?平板冷凝后,為什么要將平板倒置?在倒平板的過程中,如果不小心瘵培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?2 .純化大腸桿菌(1 ) 微生
25、物接種的方法中最常用的是和平板劃線法是指 0稀釋涂布平板法是指 0(2)平板劃線的操作步驟如下:【思考】為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作 結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?在作第二次以及其后的劃線操作是赤什么總是從上一次劃線的末端開始 劃線?(3)系列稀釋操作步驟:D2) 3) (4)涂布平板操作步驟:4) 國種的保存為了保持菌種的純凈,需對菌種進(jìn)行保藏。對于頻繁使用的菌種,我們可以采用 法;對于需要長期保存的菌種,可以采用 法。將菌種放在低溫環(huán) 境中保藏的目的是 ,但時(shí)間長了菌種還是要老化的,因此對臨時(shí) 保存的
26、菌種 個(gè)月后需重新接種【疑難點(diǎn)撥】1 .生物的營養(yǎng)營養(yǎng)是指生物攝取、利用營養(yǎng)物質(zhì)的過程。營養(yǎng)物質(zhì)是指維持機(jī)體生命活動, 保證發(fā)育、生殖所需的外源物質(zhì)。在人及動物,營養(yǎng)物質(zhì)包括水、無機(jī)鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類;在植物,營養(yǎng)物質(zhì)包括礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類;在微生物,則有水、無 機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊營養(yǎng)物質(zhì)五類。2 培養(yǎng)基 的制作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫 12天后無菌落生長,說明培養(yǎng)基的 制備是成功的,否則需要重新制備。3 .無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有 什么目的?無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。4 .平板冷凝后,為什么
27、要將平板倒置?平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高, 將 平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā), 又可以防止皿蓋上的水珠落 入培養(yǎng)基, 造成污染。5 .為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作 結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng) 物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種, 使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端, 從而通過劃線次 數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少, 以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒 接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上
28、殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。【典例解析】例1.關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中,正確的是A.是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的無機(jī)物只提供無機(jī)鹽D.無機(jī)氮源也能提供能量解析:不同的微生物,所需營養(yǎng)物質(zhì)有較大差別,要針對微生物的具體情況 分析。對于A、B選項(xiàng),它的表達(dá)是不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化 碳;有的碳源可同時(shí)是氮源,如 NH4HCO3;有的碳源同時(shí)是能源,如葡萄糖; 有的碳源同時(shí)是氮源,也是能源,如蛋白陳。對于 C選項(xiàng),除水以外的無機(jī)物 種類繁多,功能也多樣。如二氧化碳,可作為自養(yǎng)型微生物的碳源;NaHCO3,可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無機(jī)鹽;
29、而NaCl則只能提供無機(jī)鹽。對于D選項(xiàng), 無機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的,如 NH3可為硝化細(xì)菌提供能量和氮源。答案:D例2.下面對發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是A.防止雜菌污染B.消滅雜菌C.培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌D.滅菌必須在接種前解析:滅菌是微生物發(fā)酵過程的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。 A說的是滅菌的目的,因?yàn)?發(fā)酵所用的菌種大多是單一的純種, 整個(gè)發(fā)酵過程不能混入其他微生物(雜菌), 所以是正確的;B是錯(cuò)誤的,因?yàn)闇缇哪康氖欠乐闺s菌污染,但實(shí)際操作中不 可能只消滅雜菌,而是消滅全部微生物。C是正確的,因?yàn)榕c發(fā)酵有關(guān)的所有設(shè) 備和物質(zhì)都要滅菌;發(fā)酵所用的微生物是滅菌后專門接種的,滅菌必須在接種
30、前, 如果接種后再滅菌就會把所接菌種也殺死。答案:B例3.右表是某微生物培養(yǎng)基成分,請據(jù)此回答:(1)右表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類型(2)若除去成分,加入(CH2O),該培養(yǎng) 基 可 用 于 培養(yǎng)。一(3)表中營養(yǎng)成分共有 類。(4)不論何種培養(yǎng)基,在各種成分都溶化后分裝前,要進(jìn)行的是 。(5)右表中各成分重量確定的原則是編 號成分含量粉狀硫10g(NH4)2SO40.4gK2HPO44.0gMgSO 49.25gFeSQ0.5gCaCl20.5gH2O100ml0(6)若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定,應(yīng)該增加的成分解析:對于一個(gè)培養(yǎng)基,它能培養(yǎng)何種微生物,要看它的化學(xué)成分。當(dāng)然這 只適用于合成培養(yǎng)基
31、,如果是一個(gè)天然培養(yǎng)基就不能從培養(yǎng)基的成分上區(qū)分它是 培養(yǎng)何種微生物的。分析化學(xué)成分要從營養(yǎng)物質(zhì)的類型出發(fā)。 右表中的營養(yǎng)物質(zhì) 有水、無機(jī)鹽、氮源三類,缺乏碳源和特殊營養(yǎng)物質(zhì)。對特殊營養(yǎng)物質(zhì),有的微 生物是不需要的,但沒有微生物是不需要碳源的。 該培養(yǎng)基中沒有碳源,說明培 養(yǎng)的微生物是從空氣中獲得碳源的, 即可培養(yǎng)的微生物就是自養(yǎng)型微生物了。 該 培養(yǎng)基若加入(CH2O),培養(yǎng)基中就有了碳源,但除去成分,卻使培養(yǎng)基中沒 有了氮源,這時(shí)就只能用于培養(yǎng)固氮微生物了。 對于菌種鑒定,往往用的是固體 培養(yǎng)基,而表中沒有凝固劑,需要加入常見的凝固劑一一瓊脂。答案:自養(yǎng)型微生物(2)固氮微生物(3) 3(
32、4)調(diào)整pH(5)依微生物的生長需要確定(6)瓊脂(或凝固劑)反饋提升1 .下列措施中不屬于消毒的是()A酒精擦拭雙手B向水中通入少量cl2C皮膚受傷處涂紫藥水D灼燒接種環(huán)2 .有關(guān)平板劃線操作的敘述,正確的是()A使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿,操作過程中不再滅菌B打開含菌種的試管需通過火焰滅菌,取出菌種后需馬上塞上棉塞C把皿蓋打開,將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線即可D最后將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)課后反思課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)研究培養(yǎng)基對微生物的選擇作用,進(jìn)行微生物數(shù)量的測定。學(xué)習(xí)重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn):對土樣的選取和選擇培養(yǎng)基的配制。難點(diǎn):對分解尿素的
33、細(xì)菌的計(jì)數(shù)自主探究1 .尿素只有被 分解成 之后,才能被植物吸收利用。2 .以土壤中能分解尿素的細(xì)菌為研究對象,要達(dá)到的兩個(gè)主要目的是:。3 . PCR ( ) 是一種在體外 將。此項(xiàng)技術(shù)的自動化,要求使用耐高溫的 DNA 聚合酶。思考:怎樣找耐高溫的酶呢?4 .實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是:人為提供有利于 生長 的條件(包括 等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長。5 選 擇 培 養(yǎng) 基 是指 06 .常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是二 即當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落,來源于 樣品稀釋液 中 的。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少 活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確
34、,一般選擇菌落數(shù)在 _的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。另外, 也是測定微生物數(shù)7 .比較教材中兩位同學(xué)的操作方法,哪位同學(xué)的結(jié)果接近真實(shí)值?你認(rèn)為 這兩位同學(xué)的實(shí)驗(yàn)需要改進(jìn)呢?如需要,如何改進(jìn)?8 . 一股來說,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目 。這是因?yàn)橐?。因此,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用 而不是9 .設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)的主要目的是 ,提高實(shí) 驗(yàn)結(jié)果的可信度。10 .對照實(shí)驗(yàn)是 011 . 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括的內(nèi)容有: 、 和,具體的實(shí)驗(yàn)步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。12 .不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng) 和培養(yǎng)。在實(shí)驗(yàn)過程中,一般每隔 24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以 13 .無
35、菌操作應(yīng)注意什么問題?14 .在進(jìn)行多組實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)注意做好標(biāo)記,其目的是 思考:應(yīng)標(biāo)記哪些內(nèi)容?怎樣操作更有利于實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行?15 .對所需的微生物進(jìn)行初步篩選,只是分離純化菌種的第一步,要對分離 的菌種進(jìn)行一步的鑒定,還需要借助 的方法。思考:有哪些方法可以對菌種進(jìn)行鑒定?【疑難點(diǎn)撥】1 .選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基的含義是:在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的 生長,促進(jìn)需要的微生物的生長。目的是從眾多微生物中分離所需要的微生物。 在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)可以做到這一點(diǎn),如加入青霉素可以分離出酵母菌 和霉菌。加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。 這里的加入是在培養(yǎng)的培養(yǎng) 成分
36、的基礎(chǔ)上加入的。培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分的改變也可達(dá)到分離微生物的目的。如培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí),可以分離固氮微生物,因?yàn)榉枪痰⑸锊荒茉诖伺囵B(yǎng)基上生存。 當(dāng)培養(yǎng) 基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí),也具有分離效果。如石油是唯一碳源時(shí), 可以抑制不能利用石油的微生物的生長,使能夠利用石油的微生物生存,達(dá)到分 離能消除石油污染的微生物的目的。改變微生物的培養(yǎng)條件,也可以達(dá)到分離微生物的目的,如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。2 .如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)?統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù), 最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板,計(jì)算出平板菌落數(shù)的 平均值,然后按課本旁欄的公式進(jìn)行計(jì)算。3
37、 .為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度?測定土壤中細(xì)菌的總量和測 定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍相同嗎?這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量(單位:株 /Kg)是不同的,例如在干旱土壤 中的上層樣本中:好氧及兼性厭氧型細(xì)菌數(shù)約為 2185萬,放線菌數(shù)約為477萬, 霉菌數(shù)約為23.1萬。因此,為獲得不同類型的微生物,就需要按不同的稀釋度 進(jìn)行分離,同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對性地提供選擇培養(yǎng)的條件。【典例解析】例1.對細(xì)菌群體生長規(guī)律測定的正確的表述是A.在液體培養(yǎng)基上進(jìn)行B.至少接種一種細(xì)菌C .接種一個(gè)細(xì)菌D .及時(shí)補(bǔ)充消耗的營養(yǎng)物質(zhì)解析:細(xì)菌群體生長規(guī)律的測定是人們在一定條件下進(jìn)行的
38、。這些條件是: 一種細(xì)菌、恒定容積的培養(yǎng)基,液體培養(yǎng)基、定時(shí)測定細(xì)菌總數(shù)。在這些條件下, 才能測定出細(xì)菌的生長規(guī)律。測定時(shí)只能用一種細(xì)菌的子細(xì)胞群體的變化規(guī)律表 達(dá)微生物的生長;恒定容積是給微生物提供一定的生存環(huán)境; 液體培養(yǎng)基才能通 過樣品推測細(xì)菌總數(shù)。若接種多種細(xì)菌,則會發(fā)生種間斗爭而不能測定一種微生 物的生長規(guī)律。在接種時(shí),要保證一定的接種量。答案: A例2.在微生物群體生長規(guī)律的測定中,種內(nèi)斗爭最顯著最激烈的時(shí)期是A.調(diào)整期B.對數(shù)期C.穩(wěn)定期D.衰亡期解析:種內(nèi)斗爭是一種生態(tài)因素。種內(nèi)斗爭反應(yīng)了種內(nèi)生物對生存空間和生 活資源的爭奪。在生活空間充裕,營養(yǎng)充足的時(shí)候,種內(nèi)斗爭的程度是比較
39、低的。 隨著微生物個(gè)體數(shù)目的增加,每個(gè)個(gè)體的生存空間越來越少,營養(yǎng)物質(zhì)也越來越 少,每個(gè)個(gè)體對生存空間和資源的爭奪也越來越激烈,種內(nèi)斗爭就越來越激烈。由此可知,在穩(wěn)定期的種內(nèi)斗爭最激烈。在衰亡期,微生物的數(shù)目已經(jīng)開始減少, pH已經(jīng)極度不適于微生物的生存,次級代謝產(chǎn)物積累到很高的程度,這時(shí)的微 生物的生存斗爭主要是與無機(jī)環(huán)境的斗爭。答案:C例3. (2005年江蘇)抗生素作為治療細(xì)菌感染的藥物,具高效性和巨大的經(jīng)濟(jì) 價(jià)值使抗生素工業(yè)經(jīng)久不衰。其中青霉素的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用具有劃時(shí)代的意義。青霉素發(fā)酵產(chǎn)生青霉素。青霉菌的新陳代謝類型是 ,青霉素是青霉菌的 代謝產(chǎn)物。在生產(chǎn)和科研中,常選用處于 期的青霉菌
40、作為菌種或研究材料,因?yàn)榇藭r(shí)的青霉菌代謝旺盛, 和 比較穩(wěn)定。對青霉菌菌體生長情況的測定:取一定體積的發(fā)酵液,經(jīng)離心分離、反復(fù)洗滌 后,,再計(jì)算發(fā)酵罐中菌體的總重量。解析:青霉菌屬于真菌,其代謝類型應(yīng)為異養(yǎng)需氧型,而青霉素作為它的代 謝產(chǎn)物,并不是它生長、繁殖所必需的,所以青霉素應(yīng)屬于次級代謝產(chǎn)物。在測 定培養(yǎng)基上青霉菌菌體的生長情況時(shí), 常用的方法有兩種:一種是測量青霉菌的 細(xì)胞數(shù)目,另一種是測重量,取一定體積的發(fā)酵液,經(jīng)離心分離、反復(fù)洗滌后, 稱菌體的濕重,或烘干后稱干重,再由此計(jì)算出其中的細(xì)胞總重量。 在細(xì)菌生長 的四個(gè)主要時(shí)期中,因?yàn)樘幱趯?shù)期的細(xì)菌代謝旺盛,個(gè)體的形態(tài)和生理特性比 較
41、穩(wěn)定,常作為生產(chǎn)用的菌種和科研的材料。答案:異養(yǎng)需氧型 次級 對數(shù) 個(gè)體的形態(tài)生理特性稱菌體的濕重(稱烘干后的重量)鞏固提升一、 選擇題1 .在一個(gè)“淀粉一瓊脂”培養(yǎng)基的 5個(gè)圓點(diǎn)位置,分別用不同方法處理,將此 實(shí)驗(yàn)裝置放在37。叵溫箱中,保溫處理24h后,將碘液滴在培養(yǎng)基的5個(gè)圓點(diǎn) 上,其實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄于下表淀粉圓點(diǎn)實(shí)驗(yàn)處理方法碘液處理后的顏色反 應(yīng)新鮮唾液與鹽酸混合藍(lán)黑色經(jīng)過煮沸的新鮮唾液藍(lán)黑色接種面包霉棕黃色只有新鮮的唾液?只有一定濃度的蔗糖溶 液?請指出和所發(fā)生的顏色反應(yīng),以及接種的面包霉的分泌物分別是A.棕黃色、棕黃色、淀粉酶B.藍(lán)黑色、棕黃色、麥芽糖酶C.棕黃色、藍(lán)黑色、淀粉酶D.棕
42、黃色、藍(lán)黑色、麥芽糖酶2 .實(shí)驗(yàn)測定鏈霉素對3種細(xì)菌的抗生素效應(yīng),用3種細(xì)菌在事先準(zhǔn)備好的瓊脂塊平板上畫3條等長的平行線(3條線均與下圖中的鏈霉素帶 接觸),將平板置于37c條件下恒溫培養(yǎng)3天,結(jié)果如圖所示 從實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析以下敘述,不正確的是A.鏈霉素能阻止結(jié)核菌的生長B.鏈霉素對結(jié)核菌比對霍亂菌更有效C.鏈霉素對結(jié)核菌比對傷寒菌更有效D.鏈霉素可以用于治療傷寒病人3 .利用生物工程生產(chǎn)啤酒、味精、胰島素、酸奶的常用菌種分別是B .酵母菌、大腸桿菌、青D .黃色短桿菌、酵母菌、D .培養(yǎng)C .水分、PH氧 D .溫多糖、脂類、維生素、抗生素、核甘酸、維生素、多糖、脂類、A.酵母菌、枯草桿菌、大
43、腸桿菌、乳酸菌 霉菌、乳酸菌C.酵母菌、谷氨酸棒狀桿菌、大腸桿菌、乳酸菌 大腸桿菌、乳酸菌4 .下列操作不屬于微生物的分離步驟的是A.稀釋B .劃線或涂布C .接斜面5 .影響微生物生長的主要環(huán)境因素是A.陽光、溫度、水分 B .溫度、水分、PH 度、PH氧6 .下列微生物的產(chǎn)物中沒有菌種特異性的一組是A.氨基酸、核甘酸、多糖、色素 B.氨基酸C.核甘酸、多糖、維生素、毒素、抗生素 D氨基酸控制發(fā)酵時(shí)的溫度 包括A、B、C三項(xiàng)種內(nèi)斗爭7 .微生物代謝的人工控制是指A.改變微生物的遺傳特性B.C.調(diào)節(jié)發(fā)酵過程中的pH,氧氣通入量D.8 .在微生物群體生長規(guī)律的測定中,不可能發(fā)生的是A.繁殖 B.
44、生存斗爭C.種問斗爭D.9 .與調(diào)整期長短有關(guān)的因素中,可縮短調(diào)整期的一組是用與菌種相同的培養(yǎng)基營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基穩(wěn)定期獲得的菌種對數(shù)期獲得的菌種接種時(shí)間提前接種量加大接種量減小 接種種類加大A、B 、C 、 D 、10 .微生物群體生長善的測定方法可以是測定樣品的細(xì)胞數(shù)目測定次級代謝產(chǎn)物的總產(chǎn)量 測定培養(yǎng)基中細(xì)菌的體積 測定樣品的細(xì)胞重量測定初級代謝產(chǎn)物的總產(chǎn)量A. B. C. D. 二、非選擇題藐' 11 .下圖示酵母菌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)模式和生長曲線圖,據(jù)圖回答:)沁;J' 從細(xì)胞核的構(gòu)造看,酵母菌屬于 生物,及多器之如果發(fā)現(xiàn)一種酵母菌細(xì)胞核中17條染色體,的癡,醉彳該酵母菌是倍體
45、。翼污上;(2)圖中(1)的結(jié)構(gòu)名稱為 。匕3»枚(3)酵母菌細(xì)胞分裂的意義是()A.產(chǎn)生新個(gè)體B.增加生產(chǎn)力C.增加變異性 D.改變遺傳性 (4)用酵母菌制啤酒時(shí),為保證發(fā)酵罐中有較多的酵母菌,必須先通入氧氣,達(dá) 到一定數(shù)量后,則應(yīng)該密閉,以獲得大量的酒精,這充分說明酵母菌的異化作用 類型是。(5)研究發(fā)酵罐中酵母菌的生長狀況,常用取樣統(tǒng)計(jì)分析,判斷取樣先后順序的 最簡單的方法是測定發(fā)酵罐中的 。A.氧氣量B.葡萄糖量 C.酒精量D. pH值(6)欲收獲酵母菌或其代謝產(chǎn)物,應(yīng)選擇曲線中的 段。(7)自然環(huán)境中的酵母菌屬于生態(tài)系統(tǒng)中的 成分。12. (1)在錐形瓶內(nèi)裝入一定量液體培養(yǎng)
46、基,接人 No個(gè)乳酸菌之后密封,放在 250C溫箱中連續(xù)培養(yǎng)若干小時(shí),其間每 30min測定一次菌數(shù),測得數(shù)量變化曲 線如下圖所示。請分析并回答問題:乳酸菌以 方式生殖,這代表 類生物普遍具有的生殖方式。用N表示總菌數(shù),Nd表示初始菌數(shù),t表示增殖世代數(shù),乳酸菌數(shù)量增長的數(shù)學(xué)表達(dá)式為N=N2t(假設(shè)生長條件理想穩(wěn)定)。當(dāng)在理想條件下乳酸菌每30min繁殖一代,按上式計(jì)算,當(dāng) 勵=1000時(shí),連續(xù)培養(yǎng)5h,總菌數(shù)可達(dá) 個(gè)。在實(shí)際培養(yǎng)條件下,乳酸菌增長速度與理想條件下乳酸菌增長速度不同,如果5h前的總菌數(shù)等于活菌數(shù),請?jiān)谏厦娴膱D中將5h后活菌數(shù)的變化趨勢用曲線表示出來。造成菌群密度變化的外界因素是
47、。*山.培養(yǎng)基中不斷產(chǎn)生的乳酸來自乳酸菌的 作用。斗.一 m實(shí)驗(yàn)過程中,為什么要在25c的條件下進(jìn)行?。(2)某同學(xué)進(jìn)行了溫度對酶活性影響的研究,設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn):2: 實(shí)驗(yàn)步驟:止*3取三支試管,分別加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 3%的可溶性淀粉溶液。ol_ j _將試管分別放人25C、60c的水中和冰塊中,在三支試管中分別加入:質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的淀粉酶溶液,兩支試管中的 pH=6.8,第三支試管中的pH=4, 搖勻后維持各自溫度5min。在三支試管中各滴1滴碘液,并搖勻。觀察并記錄:(略)結(jié)論:溫度過高或過低都影響酶的活性。請回答:1 該實(shí)驗(yàn)?zāi)芊竦贸錾鲜鰧?shí)驗(yàn)結(jié)論?。2指出步驟中不正確之處并在此基礎(chǔ)上加以糾正
48、或補(bǔ)充相應(yīng)的內(nèi)容。13.下面是發(fā)現(xiàn)和研究青霉素的過程:問題:在培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基中,發(fā)現(xiàn)青霉菌,在其周圍沒有細(xì)菌生長。沒有青霉菌的培養(yǎng)基內(nèi)布滿了細(xì)菌。假設(shè):實(shí)驗(yàn):把青霉菌放入培養(yǎng)液內(nèi)培養(yǎng),一段時(shí)間后除去青霉菌,并用這種培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)菌,觀察細(xì)菌的生長情況。結(jié)果:這種培養(yǎng)液阻止了細(xì)菌的生長和繁殖。結(jié)論:青霉菌可產(chǎn)生一種阻止細(xì)菌生長繁殖的物質(zhì)。請 回 答: 該 實(shí) 驗(yàn) 的 假 設(shè)以上實(shí)驗(yàn)還不足以論證以上結(jié)論, 請?jiān)谝陨蠈?shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,補(bǔ)充相應(yīng)的實(shí) 驗(yàn)方法。課題3分解纖維素的微生物的分離【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1 .能簡述纖維素酶的種類及作用,2 .能從土壤中分離出分解纖維素的微生物,了解這類微生物的應(yīng)用。3 .能掌
49、握從土壤中分離某種特定微生物的操作技術(shù)。【學(xué)習(xí)重點(diǎn)】從土壤中分離分解纖維素的微生物。【學(xué)習(xí)難點(diǎn)】從土壤中分離分解纖維素的微生物。自主探究一、課題背景分析纖維素是一種由 首尾相連而成的高分子化合物,植物每年產(chǎn)生的纖維素能被土壤中的某些微生物分解利用,是因?yàn)樗鼈兡墚a(chǎn)生 。對這些微生物的 研究與利用,使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn) ,用 處理服裝面料等。二.基礎(chǔ)知識:(一)纖維素和纖維素酶閱讀課本27頁基礎(chǔ)知識部分第一、二段,回答下列問題:1、纖維素在生物圈的分布狀況?纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。 植物的根、莖、葉等器官都含有大量 的纖維素。其中 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。2、纖
50、維素酶的組成及作用?纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即 、和,前兩種酶使纖維素分解成 ,第三種酶將 分解成葡萄糖。(二)纖維素分解菌的篩選閱讀課本課本28頁相關(guān)部分,回答下列問題:1、纖維素分解菌的篩選方法-,這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對 微生物進(jìn)行篩選2、纖維素分解菌的篩選方法的原理剛果紅是一種染料,它可以與纖維素形成 ,但并不和、發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后剛果紅一纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解為中心的 。這樣我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌K針對性練習(xí)O下列關(guān)于纖維素酶的說法,錯(cuò)誤的是A、纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括三種B
51、 、纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C、纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D葡萄糖甘酶可把纖維素分解成葡萄糖三、實(shí)驗(yàn)操作分離分解纖維素的微生物實(shí)驗(yàn)流程:土壤取樣一一梯度稀釋一K旁欄思考題1本實(shí)驗(yàn)的流程與課題 2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同?提示:本實(shí)驗(yàn)流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題2是將土樣制成的菌懸液直 接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上,直接分離得到菌落。本課題通過 選擇培養(yǎng),使纖維素分解菌得到增殖后,再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。 其他步 驟基本一致。(一)土壤取樣采集土樣時(shí),應(yīng)選擇富含纖維素的環(huán)境。若找不到合適環(huán)境,可將濾紙埋在土壤中一個(gè)月左右,也會有能分解纖維素的微生物生長。K旁欄思考題
52、取樣的環(huán)境是怎樣的,作出這種選擇的理由是什么?選擇 的環(huán)境,如樹林中多年落葉形成的腐殖土,多年積累的枯枝敗葉等等。根據(jù)生物與環(huán)境的互相依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中 的含 量相對提高,因此從這種土壤中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。K旁欄思考題將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深?提示:將濾紙埋在土壤中能使 ,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌 生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約 cm左右腐殖土壤中。(二)選擇培養(yǎng)1 .選擇培養(yǎng)的目的:增加,以確保能夠從樣品中分離到所需要的 微生物。2 .制備選擇培養(yǎng)基:參照課本29頁旁欄中的比例配置,回答下列問題:旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是
53、固體培養(yǎng)基?為什么?是液體培養(yǎng)基,原因是配方中無凝固劑。這個(gè)培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用?如果具有,是如何進(jìn)行選擇的?有選擇作用,本配方中的碳源是纖維素,所以能分解纖維素的微生物可以大量繁 殖。你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對照實(shí)驗(yàn),說明選擇培養(yǎng)基的作用用牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基與之對照。3、選擇培養(yǎng)將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中,將錐形瓶固定在搖床上,在一定溫度下震蕩培養(yǎng)12天,直至培養(yǎng)液變渾濁。也可重復(fù)選擇培養(yǎng)K旁欄思考題為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?提示:在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“
54、濃縮”的作用(三)梯度稀釋按照課題1的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋 101107倍。 將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上。(四)將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上1 .制備培養(yǎng)基:參照課本旁欄中的比例配制。2 .倒平板操作。3 .涂布平板:將稀釋度為104106的菌懸液各取0.1ml涂布到平板培養(yǎng)基上, 30c倒置培養(yǎng),菌落周圍會出現(xiàn)明顯的透明圈。4 .挑選產(chǎn)生透明圈的菌落(參照課本剛果紅染色法,挑選產(chǎn)生透明圈的菌落,一 般即為分解纖維素的菌落。)(五)剛果紅染色法方法一:先,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)。方法二:在 時(shí) 就加入剛果紅。K旁欄思考題這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?提示:方法一 缺點(diǎn)是操作煩瑣,加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜;優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。方法二 優(yōu)點(diǎn)是操作簡便,不存在菌落混雜問題。缺點(diǎn)一是由于培養(yǎng)基中還含有淀粉類物質(zhì)
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