1、德國Zeiss激光掃描共聚焦顯微鏡制作：Zeiss光學(xué)儀器（上海）國際貿(mào)易有限公司2009年6月目錄：1系統(tǒng)的組成系統(tǒng)組成及光路示意圖實(shí)物照片說說明明2系統(tǒng)的使用2.1開機(jī)順序2.2軟 件 的快快速速 使使用用 說說明明2.3顯微鏡的的觸摸屏控制2.4關(guān)機(jī)順序3系統(tǒng)的維護(hù)1系統(tǒng)的絹成激光掃描共聚焦顯微鏡系統(tǒng)主要由：電動熒光顯微鏡、掃描檢測單元、激光器、電腦工作站及各相關(guān)附件組成系 統(tǒng) 組組成成及及光光路路示示意意圖圖*. Tube lentNOD ； +0 Q南HBO 、'ObjectiveScannerL激光器MBSInVhColllmatJonLbw b«m combin

2、ersPinholeArray PMTDispersiveelement -Beam guidesExtorn， detectionrrrrqmiITfyaF 片 FTTrrA?力FTT A口鼻FTT A實(shí)物照片說明：掃描檢測單元C6培養(yǎng)系統(tǒng)控制器電動熒光顯微鏡電腦工作站2系統(tǒng)的使用2.1開機(jī)順序（1）打開穩(wěn)壓電源（綠色按鈕）等待2分鐘（電壓穩(wěn)定）后，再開其它開關(guān)（2） 主開關(guān)MAIN SWITCHON電腦系統(tǒng)SYSTEMS/P CNI掃描硬件系統(tǒng) COMPONEN TSN（3）打開電動顯微鏡開關(guān)打開熒光燈開關(guān)（注：具有5檔光強(qiáng)調(diào)節(jié)旋鈕）（4） Ar離子激光器主主開開關(guān)關(guān)“ON順時(shí)針旋轉(zhuǎn)鑰匙至

3、“一”預(yù)熱等等待待約約15分鐘，將激光器扳鈕由“Standby扳至“I "一Laser run狀態(tài)，即支E常使用（5）打開電腦開關(guān),也操作甚統(tǒng):注：鍵盤上也具有電腦2.燃件的快速使用說明（1）電腦開機(jī)進(jìn)入操作系統(tǒng)界面后，雙擊桌面共聚焦軟件ZENS標(biāo)（2）進(jìn)入ZE濡面，彈出對話框：“Start Syste m初始化整個(gè)系統(tǒng)，用于激光掃描取圖、分析等。“Image ProcesSing- 不啟動共聚焦掃描硬件，用于已存圖像數(shù)據(jù)的處理、分析。1 掃描取圖（Acquisition象處理（Processing戶（Maintain 功能界面切換：）、圖像處理）、維護(hù)（注：Maintain供 Ze

4、iss專業(yè)工程師使用）2動作按鈕；3多維掃描控制）；4工具詳細(xì)界面；5狀態(tài)欄；6 工具組（視窗切換按鈕；7圖像切換按鈕；8圖像瀏覽 頒掃描窗口； 9文檔瀏覽/處理區(qū)域；10視窗中圖像處理模塊動作按鈕鈕:Singl-圖片、并在圖像預(yù)覽窗口顯示。單張圖片或一個(gè)實(shí)驗(yàn)流程（1組圖片，如 XYZ XY侍）Star-New 建立一個(gè)新圖像掃描窗口及檔激光連連接接狀狀況況檢檢查查眼睛觀察廂機(jī)洪聚焦LS毗路切換（ZEN軟件界面右上角）Ocula通過觀察筒用眼睛觀察。（激光安全保護(hù)裝置自動阻斷激光、保護(hù)眼睛。）Camera光路切換至相機(jī)。LSM共聚焦掃描成像光路。Ocula->Light Pa ->

5、點(diǎn)擊物鏡圖標(biāo)， 選擇物鏡>樣品聚焦。ReflectorShutter透射光控制(Transmitted Light Control反射光光閘控制（Reflected Light Shutter熒光激發(fā)塊選擇（ReflectorTransmitted Light ControlReflected LightReflected LightSource (XCite 120 orHBO 100)V，共聚焦LSMm描設(shè)置軟件界面右上角），系統(tǒng)切換至共聚焦掃描光路:點(diǎn)擊 ” “LSMT （ZEN選取“熒光探針”、“顏色”、掃描方法，應(yīng)用 “ Apply 。（注：Faste的最快速掃描，多條激光譜線

6、同時(shí)掃描。Best signa最佳信號掃描，多條激光譜線順序掃描。Best compromise顧速度與信號的折中式掃描。）O Scan Area每個(gè)通道的精細(xì)調(diào)節(jié)：包括：（1） Pinhole調(diào)節(jié)（ 一般設(shè)為 1AU該值越大，則信號越強(qiáng)，但共聚焦圖像效果會降低。原則上，在保證圖像質(zhì)量的前提下，該值越接近于1AU1好）；在保證圖像質(zhì)量的前提下（2） Master Gain的調(diào)節(jié)（增大則信信號號和和噪噪音音都都增增強(qiáng)強(qiáng)，減小則信號和噪音均減小。原則上，在保證圖像質(zhì)量的前提下，Gain 值越小越好）；（3） Digital Offset的調(diào)節(jié)（可扣除背景噪音，但標(biāo)本信號也也 有一定程度的扣除。原則

7、上，在保證圖越好）；(4) Dig原則上，圖像質(zhì)量的前提下O像質(zhì)量的前提下，Digital OffSe越接近于0大則信號和噪音都增強(qiáng),口減小則信號和噪音均減小。原則上，在保證圖Gairn直越接近于 1.01.2（5）對于每個(gè)通道一需要靈KU時(shí)標(biāo)本更容易被漂白或淬滅活調(diào)中繳光的強(qiáng)度選擇 可連續(xù)掃描、 一邊預(yù)覽圖像效果、一邊精精細(xì)細(xì)調(diào)調(diào)節(jié)節(jié)各各個(gè)個(gè)通通道道的的掃掃描描參參數(shù)數(shù)。如果預(yù)覽圖像的效果可以， ，則先 “Stop”，再點(diǎn)擊 “Single”或 “ Star”t即可完成圖像的掃描。 。圖像的保存:Save三種方法：(1) “File” 菜單下，或者 “ "Save AS。(2)點(diǎn)擊

8、右下角按鈕(3)點(diǎn)擊工具欄按鈕(如圖所示)另外，也可將圖像以其它格式輸出。福，什“ "Fil，_三苣四飛的 “ “Evcc存EsportSdect fBe name nd2.3顯微鏡的觸觸摸摸屏屏控控制制顯微鏡可由TFT夜晶觸摸屏進(jìn)行控制:TFT蟲摸屏控制直觀、便捷。Objectiv命鏡控制TLS射光光閘R以射光光閘Reflector熒光激發(fā)塊控控制制熒光觀察時(shí)，需要選擇相應(yīng)的熒光激發(fā)塊（或者激發(fā)波長、發(fā)射波長相 近的熒光激發(fā)塊）Light path路設(shè)置觸摸控制，可將光路切換至 “ "Eyepiede目鏡觀觀察察筒筒，或者將光路切換至左側(cè)共聚焦光路“ "Side

9、porfL,或者將光路切換至前側(cè)Frontpo” rt相機(jī)。2.4關(guān)機(jī)順序：(1)主菜單” "Fiie關(guān)閉軟件：> “Exif ,退出共聚焦軟件 ZEN(2)關(guān)閉主主電電腦腦操操作作系系統(tǒng)統(tǒng)、(3)關(guān)閉熒光燈電源卜(4)關(guān)閉電動顯顯微微鏡鏡電電源源。(5)關(guān)閉Ar 激光器：先將扳鈕從 " Laser rdn 扳至U“Standby再將鑰匙逆時(shí)針從從顯示器電源。狀態(tài)；旋轉(zhuǎn)到“O'等待約8-10分鐘、將主開關(guān)按鈕按到 按到(6)掃描硬件系統(tǒng) COMPONENTSOFF電腦系統(tǒng)SYSTEMS/PCOFF主開關(guān)MAIN SWITCHOFF(7)等燈箱充分冷卻后，再放防

10、塵罩8）長時(shí)間（超過5,則關(guān)閉穩(wěn)壓電源如果系系統(tǒng)統(tǒng)長時(shí)間 個(gè)小時(shí)）不使用，則關(guān)閉穩(wěn)壓電源。3系統(tǒng)的維護(hù)主要注意事項(xiàng)如下：(1)打開穩(wěn)壓電源時(shí)，應(yīng)等待 2分鐘(電壓穩(wěn)定)后，再開其它開關(guān)。(2)嚴(yán)格遵守激光器的開、關(guān)流程(詳見“ 2.1 2.4開/關(guān)機(jī)順序”)。(3)如果使用過油鏡,或者物鏡表面較臟，則需用擦鏡紙擦干凈物鏡的前表面(清潔液使用無水乙醇和無水乙醛的混合液，混合比例：無水乙醇30%無水乙醛70% 。(4)不使用熒光日t不打開 熒光燈。避免頻繁開/關(guān)熒光燈。(5)必須等燈箱充分冷卻后，再小心地蓋上防塵罩。(6)顯微鏡可由TFT蟲摸屏控制，使用觸摸屏?xí)r注意：手指保持清潔、干燥狀態(tài)，并且為了保證他人使用安全，觸摸時(shí)嚴(yán)禁配戴有可能接觸污染物或危險(xiǎn)樣品的手套；觸摸屏已足夠靈敏，不要大力按壓觸摸屏；不要旋轉(zhuǎn)、插拔觸摸屏。77)刻錄圖像數(shù)據(jù)資料：