1、醫學專題-花藥和花粉培養第第5 5章章 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)(hufn)培養培養 大大 家家 好好 ！植物植物(zhw)組織培養組織培養第一頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養第第5 5章章 花藥和花粉培養花藥和花粉培養(piyng)(piyng)(3學學時時) 本章主要內容本章主要內容(nirng)：l花粉和花藥培養技術花粉和花藥培養技術l花粉和花藥培養應用花粉和花藥培養應用第第5章章 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養培養第二頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養l(1)掌握花藥培養和花粉培養的區別；掌握花藥培養和花粉培養的區別；l(2)了解花藥最佳接種了解花藥最佳接種

2、(jizhng)時期；時期；l(3)掌握花藥培養的大致過程；掌握花藥培養的大致過程；l(4)掌握花粉發育的四種途徑；掌握花粉發育的四種途徑；l(5)掌握花粉培養的大致過程。掌握花粉培養的大致過程。 第第5章章 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養培養本章教學目的本章教學目的(md)與要求與要求第三頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養花粉和花藥的培養花粉和花藥的培養(pollen and anther culture) 是指花粉在培養基上改變其正常發育和機能，不經受精是指花粉在培養基上改變其正常發育和機能，不經受精(shu jng)而發生細胞分裂，由單個花粉粒發育成完整單倍體而發生細胞分裂，

3、由單個花粉粒發育成完整單倍體植株的技術。植株的技術。第第5章章 花藥花藥(huyo)和花粉培養和花粉培養單倍體植物單倍體植物( (haplobiont)haplobiont) 用離體培養花藥的方法用離體培養花藥的方法(fngf)(fngf)使花粉發育成一個使花粉發育成一個完整的植株。完整的植株。名詞名詞第四頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養第一節第一節 花藥和花粉培養花藥和花粉培養(piyng)技術技術花藥培養花藥培養是是將花粉發育至一定階段的花藥將花粉發育至一定階段的花藥(huyo)接接種到人工培養基上進行培養，以形成花粉胚或種到人工培養基上進行培養，以形成花粉胚或愈傷組織進而分化成植

4、株的技術。愈傷組織進而分化成植株的技術。第第5章章 花藥花藥(huyo)和花粉培養和花粉培養第五頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養l花粉花粉(hufn)培養：培養：是將花粉從花藥中分離出是將花粉從花藥中分離出來進行離體培養的過程。來進行離體培養的過程。油菜成熟油菜成熟(chngsh)花藥的花藥的結構結構花粉囊花粉囊花粉囊壁花粉囊壁成熟成熟(chngsh)花粉粒花粉粒花藥裂口花藥裂口第一節第一節 花藥和花粉培養技術花藥和花粉培養技術第六頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養一、花藥一、花藥(huyo)和花粉的培養方法：和花粉的培養方法：（一）花粉發育（一）花粉發育(fy)時期：時期：1、

5、適宜時期、適宜時期：單核期：單核期,尤其是單核中、晚期尤其是單核中、晚期(單核靠邊期單核靠邊期)雄配子體的發育 營養細胞營養細胞生殖細胞生殖細胞精子精子第一節第一節 花藥和花粉培養花藥和花粉培養(piyng)技術技術第七頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養第一節第一節 花藥和花粉培養花藥和花粉培養(piyng)技術技術 第八頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養2、花粉發育時期、花粉發育時期(shq)的檢測：的檢測：外部形態觀察外部形態觀察：在水稻中，一般葉枕距為：在水稻中，一般葉枕距為5-5-1515cmcm，穎片淡黃綠色、雄蕊長度接近穎片長穎片淡黃綠色、雄蕊長度接近穎片長度的度的1/

6、21/2時，可能為單核靠邊期的花粉時，可能為單核靠邊期的花粉(hufn)(hufn)。壓片染色法壓片染色法：是檢測花粉發育時期的簡便有：是檢測花粉發育時期的簡便有效方法，常用染色劑為效方法，常用染色劑為醋酸洋紅醋酸洋紅。第一節第一節 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養技術培養技術第九頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養（二）培養（二）培養(piyng)過過程程1、花藥培養過程：、花藥培養過程：1）預處理）預處理:低溫冷藏低溫冷藏是最是最常用的方法常用的方法2）表面消毒）表面消毒3）接種）接種4）培養）培養(piyng)形成花粉植株。形成花粉植株。 花粉花粉-愈傷組織愈傷組織-苗苗 花粉花

7、粉-胚狀體胚狀體-苗苗第一節第一節 花藥花藥(huyo)和花粉培養技術和花粉培養技術選幼年樹花蕾選幼年樹花蕾第十頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養水稻水稻(shudo)(shudo)花藥培養過程：花藥培養過程：旗葉鞘旗葉鞘(yqio)(yqio)用用7070酒精擦洗一遍酒精擦洗一遍剝去旗葉鞘剝去旗葉鞘(yqio)(yqio)，取出，取出稻穗稻穗10漂白粉漂白粉10 min無菌水洗無菌水洗3 3次次培養培養5 5天，花藥變褐，天，花藥變褐，2020天后花藥裂開，天后花藥裂開，長出淡黃色的花粉愈傷組織，先長芽，長出淡黃色的花粉愈傷組織，先長芽，后長根，形成幼苗。后長根，形成幼苗。用接種環接種

8、到用接種環接種到培養基上培養基上左手持穗，右手左手持穗，右手用鑷子取花藥，用鑷子取花藥，放無菌培養皿中放無菌培養皿中第一節第一節 花藥和花粉培養技術花藥和花粉培養技術第十一頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養花藥培養脫毒花藥培養脫毒l1974年日本年日本(r bn)：花藥培養可以脫除草莓病毒；：花藥培養可以脫除草莓病毒；l花藥采取時期花藥采取時期單核期：花蕾單核期：花蕾4-64-6mmmm，花藥花藥1 1mmmml花藥誘導愈傷組織培養基花藥誘導愈傷組織培養基MS+IAA4mg/L+BA2mg/L+KT2mg/L+MS+IAA4mg/L+BA2mg/L+KT2mg/L+蔗糖蔗糖3030g+g

9、+瓊脂瓊脂7 7g/Lg/Ll增殖分化培養基增殖分化培養基MS+GA1mg/L+IBA0.2mg/L+BA1mg/L+MS+GA1mg/L+IBA0.2mg/L+BA1mg/L+蔗糖蔗糖3030g+g+瓊脂瓊脂7 7g/Lg/Ll生根培養基生根培養基1/21/2MS+IBA0.2mg/L+MS+IBA0.2mg/L+活性炭活性炭3 3g/L+g/L+蔗糖蔗糖2020g+g+瓊脂瓊脂7 7g/Lg/L第一節第一節 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養技術培養技術第十二頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養草莓花藥愈傷組織草莓花藥愈傷組織,再生再生(zishng)植株植株,花藥植株花藥植株第一節

10、第一節 花藥花藥(huyo)和花粉培養技術和花粉培養技術第十三頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養2、花粉、花粉(hufn)培養培養l花粉培養成苗途徑與花藥培養比較花粉培養成苗途徑與花藥培養比較: 相同點相同點：l胚狀體成苗途徑、愈傷組織再分化成苗途徑胚狀體成苗途徑、愈傷組織再分化成苗途徑 不同點不同點：l花粉培養：花粉培養： 需進行需進行(jnxng)花粉的分離花粉的分離 特殊的花粉誘導培養特殊的花粉誘導培養第一節第一節 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養技術培養技術第十四頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養花粉培養花粉培養(piyng)過過程程取花蕾（鏡檢）取花蕾（鏡檢）預培養數

11、天預培養數天取花藥取花藥消毒消毒分離花粉分離花粉第一節第一節 花藥和花粉培養花藥和花粉培養(piyng)技術技術接種接種培養培養愈傷組織發生愈傷組織發生第十五頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養二、培養基二、培養基第一節第一節 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養技術培養技術基本基本(jbn)培養培養基基激素激素(j s)種種類和濃度類和濃度蔗糖濃度蔗糖濃度第十六頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養（一）基本（一）基本(jbn)培養基：培養基：第一節第一節 花藥花藥(huyo)和花粉培養技術和花粉培養技術lMSMS和和H H培養基：培養基：適合適合(shh)(shh)雙子葉植物花藥培養

12、；雙子葉植物花藥培養；lB5B5培養基：培養基：適合豆科和十字花科花藥培養；適合豆科和十字花科花藥培養；lN6N6培養基：培養基：適合禾谷類作物的花藥培養。適合禾谷類作物的花藥培養。第十七頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養第一節第一節 花藥花藥(huyo)和花粉培養技術和花粉培養技術u 細胞分裂素細胞分裂素可促進可促進(cjn)(cjn)胚狀體形成；胚狀體形成； 生長素生長素可誘導愈傷組織形成。可誘導愈傷組織形成。u 細胞分裂素與生長素比值高細胞分裂素與生長素比值高時可誘時可誘導愈傷組織分化苗導愈傷組織分化苗（二）激素（二）激素(j s)種類和濃度種類和濃度第十八頁，共二十六頁。醫學專題

13、-花藥和花粉培養p較高較高濃度濃度蔗糖可誘導花粉蔗糖可誘導花粉(hufn)(hufn)形成形成愈傷組織愈傷組織；p較低較低 濃度濃度蔗糖可使愈傷組織分化成蔗糖可使愈傷組織分化成苗苗。第一節第一節 花藥和花粉培養花藥和花粉培養(piyng)技術技術（三）蔗糖（三）蔗糖(zhtng)濃度濃度第十九頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養三、單倍體植株三、單倍體植株(zhzh)染色體加倍的方法染色體加倍的方法第一節第一節 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養技術培養技術l單倍體植物天然發生單倍體植物天然發生(fshng)的途徑：的途徑：孤雌生殖孤雌生殖孤雄生殖孤雄生殖無配子生殖無配子生殖第二十頁，共

14、二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養單倍體植株單倍體植株(zhzh)染色體加倍的方染色體加倍的方法法1、自然加倍自然加倍2、人工人工(rngng)加倍加倍：用秋水仙素溶液浸苗、處理愈用秋水仙素溶液浸苗、處理愈傷組織和用含傷組織和用含0.4%0.4%秋水仙素的羊毛脂涂抹單倍體秋水仙素的羊毛脂涂抹單倍體植株的頂芽、腋芽，可得到能結實的二倍體植株。植株的頂芽、腋芽，可得到能結實的二倍體植株。3、愈傷組織反復愈傷組織反復繼代培養繼代培養，可得到二倍體植株。，可得到二倍體植株。第一節第一節 花藥和花粉培養花藥和花粉培養(piyng)技術技術第二十一頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養第二節第二節 花藥

15、和花粉花藥和花粉(hufn)培養的應用培養的應用 -單倍體植株育種單倍體植株育種1 1、誘導形成單倍體，快速獲得純系，縮短育種周、誘導形成單倍體，快速獲得純系，縮短育種周期；期；2 2、有利于篩選隱性突變體，提高選擇效率、有利于篩選隱性突變體，提高選擇效率; ;3 3、有利于隱性基因、有利于隱性基因(jyn)(jyn)控制性狀的選擇控制性狀的選擇4 4、快速獲得自交系的超雄株、快速獲得自交系的超雄株第第5章章 花藥花藥(huyo)和花粉培養和花粉培養第二十二頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養大大縮短育種大大縮短育種(y zhng)周期周期第二節第二節 花藥和花粉花藥和花粉(hufn)培養

16、的應用培養的應用第二十三頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和花粉培養l(1)花藥培養是器官培養，花粉培養屬細胞培養。花藥培養是器官培養，花粉培養屬細胞培養。l(2)花藥培養一般選擇花粉的單核期進行接種。花藥培養一般選擇花粉的單核期進行接種。l(3)花藥培養包括：選擇材料花藥培養包括：選擇材料-消毒消毒-接種培養接種培養-愈合組織生成愈合組織生成-分化出單倍體植株。分化出單倍體植株。l(4)花粉的發育途徑包括：營養細胞發育、生殖細胞發育、花粉的發育途徑包括：營養細胞發育、生殖細胞發育、營養和生殖細胞同時發育及花粉均等分裂發育。營養和生殖細胞同時發育及花粉均等分裂發育。l(5)花粉培養包括花粉的分離花粉培養包括花粉的分離-預處理預處理-培養過程。培養過程。l(6)胚胎培養包括：幼胚培養、成熟胚培養、胚珠培養、子房培養胚胎培養包括：幼胚培養、成熟胚培養、胚珠培養、子房培養和胚乳和胚乳(pi r)培養等。培養等。l(7)胚胎的培養的意義。胚胎的培養的意義。第第5章章 花藥花藥(huyo)和花粉培養和花粉培養本章本章(bn zhn)小結：小結：第二十四頁，共二十六頁。醫學專題-花藥和