1、精選課件1 藥品檢驗工作的基本程序一般為取藥品檢驗工作的基本程序一般為取樣、藥物的鑒別、藥物的檢查、藥物樣、藥物的鑒別、藥物的檢查、藥物含量的測定、檢驗報告。含量的測定、檢驗報告。 回顧：藥品檢驗工作的基本程序回顧：藥品檢驗工作的基本程序1精選課件2 取樣的基本原則？取樣的基本原則？ 均勻、合理。均勻、合理。 藥物藥物鑒別鑒別的目的？的目的？ 判斷藥物及其制劑的真偽判斷藥物及其制劑的真偽。 藥物藥物檢查檢查的目的？的目的？ 純度純度 藥物含量測定？藥物含量測定？ 主要有效成分的含量。主要有效成分的含量。 2精選課件3n鑒別試驗鑒別試驗(identification test)：根據藥物：根據藥

2、物的分子結構、理化性質，采用化學、物的分子結構、理化性質，采用化學、物理化學或生物學方法來判斷藥物的真偽理化學或生物學方法來判斷藥物的真偽n藥物的鑒別試驗包括：藥物的鑒別試驗包括：性狀性狀和和鑒別鑒別n一般鑒別實驗：是指依據某一類藥物的一般鑒別實驗：是指依據某一類藥物的共同的共同的化學結構化學結構或相同的或相同的理化特性理化特性，通，通過過化學反應化學反應來鑒別藥物的來鑒別藥物的真偽真偽。n專屬鑒別實驗專屬鑒別實驗：是證實某一種藥物的依是證實某一種藥物的依據。據。n根據一類藥物中每一種藥物化學結構的根據一類藥物中每一種藥物化學結構的差異及理化特性，選用某些特有的靈敏差異及理化特性，選用某些特有

3、的靈敏的定性反應，來鑒別藥物的真偽的定性反應，來鑒別藥物的真偽。精選課件4 取樣的基本原則？取樣的基本原則？ 均勻、合理。均勻、合理。 藥物藥物鑒別鑒別的目的？的目的？ 判斷藥物及其制劑的真偽判斷藥物及其制劑的真偽。 藥物藥物檢查檢查的目的？的目的？ 純度純度4精選課件5藥物檢查需要解決以下四個問題？1、什么是雜質什么是雜質？2、藥物中雜質從哪里來？、藥物中雜質從哪里來？3、雜質如何分類？、雜質如何分類？4、雜質的檢查方法有哪些？如何計算、雜質的檢查方法有哪些？如何計算?5精選課件6什么是雜質？n1.有毒副作用的物質 n2. 本身無毒副作用，但影響藥物的穩定性和療效的物質n3.本身無毒副作用，

4、也不影響藥物的穩定性和療效，但影響藥物的科學管理的物質 藥物純度藥物純度藥物的純凈程度藥物的純凈程度6精選課件7藥物檢查需要解決以下四個問題？1、什么是雜質？、什么是雜質？2、藥物中雜質從哪里來藥物中雜質從哪里來？3、雜質如何分類？、雜質如何分類？4、雜質的檢查方法有哪些？如何計算、雜質的檢查方法有哪些？如何計算?7精選課件8雜質的來源 生產中引入生產中引入原料原料中間體中間體副產物副產物降解產物降解產物 貯藏過程中產生貯藏過程中產生水解水解氧化氧化分解分解異構化異構化8精選課件9藥物檢查需要解決以下四個問題？1、什么是雜質？、什么是雜質？2、藥物中雜質從哪里來？、藥物中雜質從哪里來？3、雜質

5、如何分類雜質如何分類？4、雜質的檢查方法有哪些？如何計算、雜質的檢查方法有哪些？如何計算?9精選課件10雜質的分類雜質的分類依雜質來源分類：依雜質來源分類： 一般雜質：含義，品種一般雜質：含義，品種特殊雜質：含義特殊雜質：含義依雜質毒性分類：依雜質毒性分類：依雜質理化性質分類：依雜質理化性質分類：信號雜質信號雜質毒性雜質毒性雜質有機雜質有機雜質無機雜質無機雜質殘留溶劑殘留溶劑10精選課件11藥物檢查需要解決以下四個問題？1、什么是雜質？、什么是雜質？2、藥物中雜質從哪里來？、藥物中雜質從哪里來？3、雜質如何分類？雜質如何分類？4、雜質的檢查方法有哪些？如何計算雜質的檢查方法有哪些？如何計算?1

6、1精選課件12雜質限量：指藥物中所含雜質的最大允許量，雜質限量：指藥物中所含雜質的最大允許量，通常用百分之幾或百萬分之幾（通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表示）來表示12精選課件1313藥物的雜質檢查法藥物的雜質檢查法1. 1.限量檢查法限量檢查法 （Limit TestLimit Test） 對照法對照法2.2.定量檢查法定量檢查法精選課件14雜質限量的計算雜質限量的計算100%(%)供試品量雜質的最大允許量雜質限量100%(%)供試品量標準溶液體積標準溶液濃度雜質限量%100(%)ScVL14精選課件15練習題：練習題：1. 1.臨臨床所用藥物的純度與化學品及試劑純床所用藥物的純度與

7、化學品及試劑純度的主要區別是度的主要區別是A. A. 所含雜質的生理效應不同所含雜質的生理效應不同B. B. 所含有效成分的量不同所含有效成分的量不同 C. C. 所含雜質的絕對量不同所含雜質的絕對量不同D. D. 化學性質及化學反應速度不同化學性質及化學反應速度不同E. E. 所含有效成分的生理效應不同所含有效成分的生理效應不同15精選課件162 2在藥物生在藥物生產過程中引入雜質的途徑為產過程中引入雜質的途徑為 A. A. 原料不純或部分未反應完全的原料造成原料不純或部分未反應完全的原料造成 B. B. 合成過程中產生的中間體或副產物分離不凈造成合成過程中產生的中間體或副產物分離不凈造成

8、C. C. 需加入的各種試劑產生吸附，共沉淀生成混晶等需加入的各種試劑產生吸附，共沉淀生成混晶等造成造成 D. D. 所用金屬器皿及裝置等引入雜質所用金屬器皿及裝置等引入雜質 E. E. 由于操作不妥，日光曝曬而使產品發生分解引入由于操作不妥，日光曝曬而使產品發生分解引入的雜質的雜質 討論討論16精選課件173.檢查維生素C中的重金屬時，若取樣量為1.0g，要求含重金屬不得過百萬分之十，問應吸取標準鉛溶液（每1ml0.01mg的Pb）多少ml？A. 0.2ml B. 0.4ml C2mlD. 1ml E. 20ml17精選課件18ml 110100 . 1101066cSLV18精選課件194

9、.4.谷氨酸鈉中重金屬的檢查谷氨酸鈉中重金屬的檢查取本品取本品1.0g1.0g，加水，加水23ml23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖溶解后，加醋酸鹽緩沖液（液（pH3.5pH3.5）2ml2ml，依法檢查，與標準鉛溶液，依法檢查，與標準鉛溶液(10(10g Pb/ml)g Pb/ml)所呈顏色相比較，不得更深，所呈顏色相比較，不得更深，重金屬限量為百萬分之十，求取標準鉛溶液重金屬限量為百萬分之十，求取標準鉛溶液多少毫升？多少毫升？CSLV)(0 . 110100 . 1101066ml19精選課件20討論討論5.5.藥物純度藥物純度符符合規定系指（）。合規定系指（）。A.A.含量符合藥典的規定含量符

10、合藥典的規定B.B.純度符合優級純試劑的規定純度符合優級純試劑的規定C.C.絕對不存在的雜質絕對不存在的雜質D.D.對患者無不良反應對患者無不良反應E. E.雜質含量不超過限度規定雜質含量不超過限度規定20精選課件21阿司匹林的質量標準阿司匹林的質量標準n阿司匹林阿司匹林nAsipilinAsipilinnAspirinAspirinnC9H8O4 180.16C9H8O4 180.16精選課件22n本品為本品為2-(2-(乙酰氧基乙酰氧基) )苯甲酸。含苯甲酸。含C9H8O4C9H8O4不得少于不得少于99.599.5。n【性狀性狀】 本品為白色結晶或結晶性粉本品為白色結晶或結晶性粉末；無臭

11、或微帶醋酸臭，味微酸；遇濕末；無臭或微帶醋酸臭，味微酸；遇濕氣即緩緩水解。氣即緩緩水解。n本品在乙醇中易溶，在氯仿或乙醚中溶本品在乙醇中易溶，在氯仿或乙醚中溶解，在水或無水乙醚中微溶；在氫氧化解，在水或無水乙醚中微溶；在氫氧化鈉溶液或碳酸鈉溶液中溶解，但同時分鈉溶液或碳酸鈉溶液中溶解，但同時分解。解。O HOOOC H3精選課件23【鑒別鑒別】 （1 1）取本品約）取本品約0.1g0.1g，加水，加水10ml10ml，煮沸，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液放冷，加三氯化鐵試液1 1滴，即顯紫堇滴，即顯紫堇色。色。（2 2）取本品約）取本品約0.5g0.5g，加碳酸鈉試液，加碳酸鈉試液10ml10ml

12、，煮沸煮沸2 2分鐘后，放冷，加過量的稀硫酸，分鐘后，放冷，加過量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并發生醋酸的臭氣。即析出白色沉淀，并發生醋酸的臭氣。（3)3)本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜譜( (光譜集光譜集209209圖圖) )一致一致。精選課件24n【檢查檢查】溶液的澄清度溶液的澄清度 取本品取本品0.50g0.50g，加溫熱至約加溫熱至約4545的碳酸鈉試液的碳酸鈉試液10ml10ml溶解溶解后，溶液應澄清。后，溶液應澄清。 精選課件25n游離水楊酸游離水楊酸 取本品取本品0.10g0.10g，加乙醇，加乙醇lmllml溶溶解后，加冷水適量使成解后，加冷水

13、適量使成50ml50ml，立即加新制，立即加新制的稀硫酸鐵銨溶液的稀硫酸鐵銨溶液 取鹽酸溶液取鹽酸溶液(9100)1ml(9100)1ml，加硫酸鐵銨指示液，加硫酸鐵銨指示液2ml2ml后，后，再加水適量使成再加水適量使成100m11ml100m11ml，搖勻；，搖勻；3030秒鐘秒鐘內如顯色；與對照液內如顯色；與對照液( (精密稱取水楊酸精密稱取水楊酸0.1g0.1g，加水溶解后，加冰醋酸加水溶解后，加冰醋酸1ml1ml，搖勻，再加水，搖勻，再加水使成使成1000ml1000ml，搖勻；精密量取，搖勻；精密量取lmllml，加乙醇，加乙醇lmllml、水、水48ml48ml與上述新制的稀硫酸

14、鐵銨溶液與上述新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml1ml，搖勻，搖勻) )比較，不得更深比較，不得更深(0.1(0.1) )。 精選課件26n易炭化物易炭化物 取本品取本品0.5g0.5g，依法檢查，依法檢查( (附錄附錄 K)K)，與對照液，與對照液( (取比色用氯化鈷液取比色用氯化鈷液0.25ml0.25ml、比、比色用重鉻酸鉀液色用重鉻酸鉀液0.25ml0.25ml、比色用硫酸銅液、比色用硫酸銅液0.40ml0.40ml，加水使成，加水使成5m1)5m1)比較，不得更深。比較，不得更深。n熾灼殘渣熾灼殘渣 不得過不得過0.10.1( (附錄附錄 N) N)。n重金屬重金屬 取本品取本品1.0g1.

15、0g，加乙醇，加乙醇23ml23ml溶解后，溶解后，加醋酸鹽緩沖液加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml(pH3.5)2ml，依法檢查，依法檢查( (附附錄錄 H H第一法第一法) )，含重金屬不得過百萬分之十。，含重金屬不得過百萬分之十。精選課件27n【含量測定含量測定】取本品約取本品約0.4g0.4g，精密稱定，加中，精密稱定，加中性乙醇性乙醇( (對酚酞指示液顯中性對酚酞指示液顯中性)20ml)20ml溶解后，加溶解后，加酚酞指示液酚酞指示液3 3滴，用氫氧化鈉滴定液滴，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol(0.1molL)L)滴定。每滴定。每lmllml氫氧化鈉滴定液氫氧化鈉滴定液(0.1mol

16、(0.1molL)L)相相當于當于18.02mg18.02mg的的C9H8O4C9H8O4。n【類別類別】 解熱、消炎鎮痛藥解熱、消炎鎮痛藥。n【貯藏貯藏】 密封，在干燥處保存密封，在干燥處保存。n【制劑制劑】（1 1）阿司匹林片）阿司匹林片n （2 2）阿司匹林腸溶片）阿司匹林腸溶片n （3 3）阿司匹林栓）阿司匹林栓精選課件28 取樣的基本原則？取樣的基本原則？ 均勻、合理。均勻、合理。 藥物藥物鑒別鑒別的目的？的目的？ 判斷藥物及其制劑的真偽判斷藥物及其制劑的真偽。 藥物藥物檢查檢查的目的？的目的？ 純度純度 藥物含量測定？藥物含量測定？ 主要有效成分的含量。主要有效成分的含量。 28精

17、選課件29藥物的含量測定藥物的含量測定精選課件30基本內容基本內容一、概述一、概述二、容量分析法二、容量分析法三、光譜分析法三、光譜分析法四、色譜分析法四、色譜分析法 練習與思考練習與思考精選課件31 藥品的含量測定藥品的含量測定是指 含量測定含量測定精選課件32測定藥物含量的方法(1)容量分析法： 儀器設備簡單、易于操作、不需要使用化學對照品，成本低、速度較快，其準確度和精密度都較高。(2)儀器分析法： 當組分復雜、干擾成分較多難于用容量分析法測定含量時，選用專屬性較高的儀器分析方法。精選課件33二、容量分析法（滴定分析法）（一）概念及特點（一）概念及特點n將已知濃度的標準溶液由滴定管滴加到

18、被將已知濃度的標準溶液由滴定管滴加到被測藥物的溶液中，至與被測藥物反應完全測藥物的溶液中，至與被測藥物反應完全（通過適當方法指示），然后根據標準溶液（通過適當方法指示），然后根據標準溶液的濃度和被消耗的體積，按的濃度和被消耗的體積，按化學計量關系化學計量關系計計算出被測藥物的含量算出被測藥物的含量 2022-3-8精選課件34指示劑顯示指示劑顯示終點到達終點到達C滴定滴定B+ B（標準物）（標準物） A（被測物）（被測物）A傳統分析方法；傳統分析方法；主要用于主成分含量較高的試樣主要用于主成分含量較高的試樣分析分析；特點：簡單、準確、費用低。特點：簡單、準確、費用低。精選課件35幾個基本術語幾

19、個基本術語n滴定液滴定液(標準溶液標準溶液)：已知準確濃度的試劑：已知準確濃度的試劑n化學計量點：被測物與標準物按化學計化學計量點：被測物與標準物按化學計量關系完全反應的點。量關系完全反應的點。n指示劑：用以指示滴定終點的試劑指示劑：用以指示滴定終點的試劑 n滴定終點：指示劑顏色變化的點。滴定終點：指示劑顏色變化的點。n終點誤差：由于滴定終點和化學計量點終點誤差：由于滴定終點和化學計量點的差異所引起的相對誤差的差異所引起的相對誤差.精選課件36按藥典規定，精密標定的滴定液（如鹽酸按藥典規定，精密標定的滴定液（如鹽酸及其及其濃度）正確表示為濃度）正確表示為nA.鹽酸滴定液（鹽酸滴定液（0.152

20、mol/L）nB.鹽酸滴定液（鹽酸滴定液（0.1524mol/L）nC.鹽酸滴定液（鹽酸滴定液（0.152M/L）nD.0.1524M/L鹽酸滴定液鹽酸滴定液nE.0.152mol/L鹽酸滴定液鹽酸滴定液 答案：答案：B精選課件37例題：滴定分析中，一般利用指示劑的突變來判例題：滴定分析中，一般利用指示劑的突變來判斷化斷化學計量點的到達，在指示劑變色時停止滴定，這學計量點的到達，在指示劑變色時停止滴定，這一點一點為：為：nA.化學計量點化學計量點nB.滴定分析滴定分析nC.滴定等當點滴定等當點nD.滴定終點滴定終點nE.滴定誤差滴定誤差 答案：答案：D精選課件38（二）容量分析法的分類按化學反

21、應類型分類按化學反應類型分類n1.酸堿滴定法酸堿滴定法:測定物質酸堿度計算酸堿測定物質酸堿度計算酸堿的含量。的含量。n2.沉淀滴定法沉淀滴定法:主要測定鹵素及銀的含量。主要測定鹵素及銀的含量。n3.配位滴定法（絡合滴定法）配位滴定法（絡合滴定法）:測定金屬測定金屬離子的含量。離子的含量。n4.氧化還原滴定法：測定氧化還原性物質氧化還原滴定法：測定氧化還原性物質的含量。的含量。n 非水滴定法非水滴定法精選課件391.1.直接滴定直接滴定: :2.2.返滴定法：返滴定法：3.3.置換滴定法：置換滴定法：4.4.間接滴定法：間接滴定法：精選課件402.2.返滴定法返滴定法： 待測物質與滴定劑反應很慢

22、，或待測物是固待測物質與滴定劑反應很慢，或待測物是固體時，反應不能立刻完成。可以先準確加入過量體時，反應不能立刻完成。可以先準確加入過量的標準溶液，使之與待測物質反應完全后，再用的標準溶液，使之與待測物質反應完全后，再用另一種標準溶液滴定剩余的標準溶液。另一種標準溶液滴定剩余的標準溶液。例：例：Al3+ 過量過量EDTA Zn2+或或Cu 2+標液返滴定。標液返滴定。例：例：CaCO3 過量過量HCl NaOH標液返滴定。標液返滴定。精選課件413.3.置換滴定法置換滴定法： 沒有定量關系或有副反應時，可以先用適當沒有定量關系或有副反應時，可以先用適當試劑與待測物反應，使其定量地置換為另一種物

23、試劑與待測物反應，使其定量地置換為另一種物質，再用適當的標準溶液滴定這種物質。質，再用適當的標準溶液滴定這種物質。例：例：K2Cr2O7 滴定滴定NaS2O3K2Cr2O3 過量過量KI I2 NaS2O3 滴定。滴定。精選課件424.4.間接滴定法間接滴定法： 不能與滴定劑反應，可以通過另外的化學反不能與滴定劑反應，可以通過另外的化學反應以滴定法間接完成。應以滴定法間接完成。例：例：Ca2+ 的測定。的測定。 Ca2+ CaC2O4 H2SO4溶解溶解 C2O42- 用用KMnO4滴定滴定精選課件43例：例：TVc/I2=8.806mg/mL即：中國藥典規定，每即：中國藥典規定，每1mL碘滴

24、定液（碘滴定液（0.05 mol/L）相當）相當于于8.806 mg的維生素的維生素C。（四）容量分析法的計算問題（四）容量分析法的計算問題 1. 1.滴定度滴定度（T T）：）： 每每1 1mlml規定濃度的滴定液相當于被測物規定濃度的滴定液相當于被測物質的質量質的質量( (mg)mg)精選課件44 2. 2.滴定度的計算滴定度的計算 aAaA（待測物）（待測物） + + bB bB（滴定液）（滴定液） cC cC + + dD dD a ba b T/MT/M 1 1c cT = ca/bMc：滴定液濃度：滴定液濃度 (mol/L)M：被測物分子量：被測物分子量精選課件45例：用碘量法測定

25、維生素例：用碘量法測定維生素CM(CCM(C6 6H H8 8OO6 6) )176.13176.13的含量時，碘滴定液的摩爾濃度的含量時，碘滴定液的摩爾濃度為為0.05mol/L0.05mol/L（以（以I I2 2為單元），化學反應為單元），化學反應式如下：式如下：滴定度滴定度( (T T )=?)=? T T = 8.806 8.806mg/mLmg/mL C C6 6H H8 8OO6 6I I2 2C C6 6H H6 6OO6 6+2HI+2HI精選課件463.3.百分含量的計算百分含量的計算 WW：供試品取樣量供試品取樣量 設至終點時，消耗滴定液體積為設至終點時，消耗滴定液體積為

26、V mlV ml則藥物理論質量為則藥物理論質量為V VT T供試品取樣量實測藥物質量含量100WTFV100%濃度校正因數濃度校正因數規定規定實際實際CCF（1 1）直接滴定法（用滴定液直接滴定被測藥物）直接滴定法（用滴定液直接滴定被測藥物）精選課件47例題：非那西丁含量測定：精密稱取本品0.3630g加稀鹽 酸 回 流 1 小 時 后 ， 放 冷 ， 用 亞 硝 酸 鈉 液（0.1010mol/L）滴定，用去20.00m1。每1ml亞硝酸鈉液（0.1mol/L）相當于17.92mg的C10H13O2N。計算非那西丁的含量為？%72.99%10010003630. 01 . 01010. 00

27、0.2092.17%非那西丁精選課件48例：精密稱取青霉素鉀供試品0.4021g，按藥典規定用剩余堿量法測定含量。先加入氫氧化鈉液(0.1mol/L)25.00ml，回滴時消耗0.1015mol/l的鹽酸液14.20ml，空白試驗消耗0.1015mol/l的鹽酸液24.68ml。求供試品的含量，每1ml氫氧化鈉液(0.1mol/L)相當于37.25mg的青霉素鉀。 %54.98%10010004021. 01 . 01015. 020.1468.2425.37%）（青霉素鉀精選課件49（2 2）間接滴定法）間接滴定法1 1）生成物滴定法）生成物滴定法 藥物藥物 + A B 滴定滴定滴定劑滴定劑

28、）（含量含量100WFTVV0 2 2）剩余滴定法（回滴法）剩余滴定法（回滴法） 藥物藥物 + A（定、過量）（定、過量） 剩余的剩余的 A + B （回滴）（回滴）V 空白試空白試驗驗V0WW司可巴比妥鈉司可巴比妥鈉=0.1022g=0.1022g，cBr2=0.05mol/LcBr2=0.05mol/L，cNa2S2O3cNa2S2O30.1mol/L0.1mol/L；V1=15.73mlV1=15.73ml，V0=23.21mlV0=23.21ml；MMC12H17N2NaO3C12H17N2NaO3=260.27=260.27，FNa2S2O3FNa2S2O31.0381.038。司可

29、巴比妥鈉的含量測定司可巴比妥鈉的含量測定1.1.計算滴定度；計算滴定度；2.2.計算百分含量。計算百分含量。精選課件51精選課件52光譜分析法光譜分析法 紫外紫外可見分光光可見分光光度法度法 UVVis 原子吸收分光光原子吸收分光光度法度法 AAS 熒光分析法熒光分析法 二、光譜分析法二、光譜分析法精選課件53（一）紫外（一）紫外- -可見分光光度法可見分光光度法 靈敏度高，可達靈敏度高，可達10-4g/ml 10-7g/ml 1. 特點特點 準確度高，準確度高，RSD（%）為為2% 5%5% 儀器價格低廉，操作簡單，易普及，應用廣泛儀器價格低廉，操作簡單，易普及，應用廣泛 2. 2. 朗伯朗

30、伯- -比耳定律比耳定律 A = ECLA = ECL 吸收系數：摩爾吸收系數吸收系數：摩爾吸收系數 研究分子結構研究分子結構 百分吸收系數百分吸收系數 含量測定含量測定%11cmE吸收光譜范圍：紫外：吸收光譜范圍：紫外：200200400nm400nm 可見：可見：400400760nm760nm 精選課件543.3.儀器的校正和檢定儀器的校正和檢定 吸收度準確性的檢定：吸收度準確性的檢定：重鉻酸鉀的硫酸溶液，規定波重鉻酸鉀的硫酸溶液，規定波 長處測定長處測定 ，應符合，應符合P P9191表表1 1中規定中規定 %11cmE 波長的校正：波長的校正：汞燈中的幾根較強的譜線或用儀器自身汞燈中

31、的幾根較強的譜線或用儀器自身 所帶的氘燈的特定譜線為參照進行校正所帶的氘燈的特定譜線為參照進行校正雜散光的檢查：雜散光的檢查：一定濃度的碘化鈉和亞硝酸鈉溶液，一定濃度的碘化鈉和亞硝酸鈉溶液， 規定波長處測定規定波長處測定透光率透光率，應符合應符合P91表表2 中規定中規定精選課件554. 4. 對溶劑的要求對溶劑的要求: : 含雜原子的有機溶劑通常具有很強的含雜原子的有機溶劑通常具有很強的末端吸收末端吸收它們的使用范圍均不能小于截止使用波長它們的使用范圍均不能小于截止使用波長 石英石英吸收池、吸收池、空氣空氣為空白為空白 (nm) (nm) 溶劑溶劑 + 吸收池吸收池A 220 220240

32、240 0.40 0.40 241 241250 250 0.20 0.20 251 251300 300 0.10 0.10 300 300以上以上 0.050.05精選課件565. 5. 測定方法測定方法確定波長確定波長 要求供試品溶液的要求供試品溶液的A A應在應在0.30.30.70.7 狹縫調整狹縫調整 精選課件57 RXRXRXRXAACCCCAALCELCEAARXRX%1cm1%1cm1供試品溶液的吸光度供試品溶液的吸光度對照品溶液的吸光度對照品溶液的吸光度供試品溶液的濃度供試品溶液的濃度對照品溶液的濃度對照品溶液的濃度LCEALCEARcmRXcmX%11%115. 5. 測

33、定方法測定方法1 1）對照品比較法：）對照品比較法：條件：條件：A. A. 待測物與對照品在相同條件下測定待測物與對照品在相同條件下測定B. B. 待測物與對照品濃度相近待測物與對照品濃度相近精選課件58標標示示量量片片標標示示含含量量片片實實測測含含量量標標示示量量供供100WWD/ C供試品取樣量供試品取樣量實測藥物質量實測藥物質量含量含量供供100WDC 片數總片重制劑：制劑：原料藥：原料藥：稀釋倍數取樣量取樣量平均片重平均片重片粉量片粉量精選課件59100g/ml g/100ml %11%11%11LEACLEACCLEAcmcmcm）（）（2 2）吸收系數法（絕對法）吸收系數法（絕對

34、法）吸光度吸光度百分吸收系數百分吸收系數液層厚度，液層厚度，cmcm，如無特，如無特別注明，別注明，L L=1cm=1cm可在手冊或文獻中查到可在手冊或文獻中查到精選課件60鹽酸氯丙嗪（規格鹽酸氯丙嗪（規格1ml:10mg1ml:10mg，E E1%1%1cm1cm915)915)的含的含量測定：精密量取本品量測定：精密量取本品5ml5ml，置，置200ml200ml量瓶中，量瓶中，用鹽酸溶液（用鹽酸溶液（9100091000）稀釋至刻度，搖勻；）稀釋至刻度，搖勻；精密量取精密量取2ml2ml，置，置100ml100ml量瓶中，用鹽酸溶液量瓶中，用鹽酸溶液（9100091000）稀釋至刻度，搖

35、勻，在）稀釋至刻度，搖勻，在254nm254nm波波長處測定吸光度為長處測定吸光度為0.4690.469。計算其百分含量。計算其百分含量。精選課件613 3）計算分光光度法：）計算分光光度法： 多種，具體按每種藥物規定的方法進行多種，具體按每種藥物規定的方法進行 如：如：V VA A的三點校正法的三點校正法4 4）比色法）比色法 加入顯色劑后，按照對照品比較法測定。加入顯色劑后，按照對照品比較法測定。 影響顯色因素很多，故需注意平行操作。影響顯色因素很多，故需注意平行操作。 空白溶劑：溶劑空白溶劑：溶劑+ +顯色劑，同法處理顯色劑，同法處理精選課件62三、色譜分析法三、色譜分析法 特點：高靈敏

36、度、特點：高靈敏度、 高效能、高速度、應用廣泛高效能、高速度、應用廣泛 按分離原理：吸附；分配；離子交換；排阻色譜按分離原理：吸附；分配；離子交換；排阻色譜分類分類 按分離方法：按分離方法：PCPC；TLCTLC；柱色譜；柱色譜；GCGC；HPLCHPLC 根據混合物中各組分的根據混合物中各組分的色譜行為差異色譜行為差異，先，先行分離后再在線或離線對各組分逐一進行分析的行分離后再在線或離線對各組分逐一進行分析的方法，方法，是分離分析混合物的最有力手段是分離分析混合物的最有力手段。精選課件63 1. 1. 對儀器一般要求對儀器一般要求 固定相種類、流動相組分、檢測器類型不得任意改變固定相種類、流

37、動相組分、檢測器類型不得任意改變 其他均可適當改變其他均可適當改變 色譜圖色譜圖2020分鐘分鐘內記錄完畢內記錄完畢 2. 2. 系統適用性試驗系統適用性試驗 色譜柱的色譜柱的理論板數理論板數：n n = 5.54( = 5.54(t tR R / /WWh/2h/2) )2 2 分離度分離度：R R = 2 = 2（t tR2R2 t tR1R1)/()/(WW1 1 + + WW2 2); ); 應大于應大于1.51.5 重復性重復性：對照液連續進樣：對照液連續進樣5 5次，峰面積次，峰面積RSDRSD2.02.0 拖尾因子拖尾因子：T T = = WW0.05h0.05h/2/2 應在應

38、在0.9 0.9 5 5 1.05 1.05 流出方向流出方向（一）（一）HPLCHPLC法法精選課件64（1 1）內標法加校正因子測定供試品中主成分含量）內標法加校正因子測定供試品中主成分含量對照品對照品+ +內標物內標物對照溶液，進樣，測定，計算校正因子對照溶液，進樣，測定，計算校正因子 3. 3. 在含量測定中的應用在含量測定中的應用ssRRAcAcf ）校正因子（供試品供試品+ +內標內標供試品溶液，進樣，測定供試品和內供試品溶液，進樣，測定供試品和內標物質的峰面積或峰高，計算含量標物質的峰面積或峰高，計算含量%100%WVDCX含量sSXXCAAfC）含量（精選課件65 （2 2）外

39、標法測定供試品主成分含量）外標法測定供試品主成分含量供試品供試品供試品溶液供試品溶液對照品對照品對照品溶液對照品溶液RXRXAACC）含量（進樣，測定，計算含量進樣，測定，計算含量 %100 %100%WDAACWDCRXRX含量缺點：不易準確控缺點：不易準確控制進樣量，宜用定制進樣量，宜用定量環進樣量環進樣精選課件661. 1. 對對GCGC儀器一般要求儀器一般要求 載載 氣：氣：氮氣氮氣 色譜柱：色譜柱：填充柱或毛細管柱填充柱或毛細管柱 填充柱：內徑填充柱：內徑2 24mm4mm，長，長1 110m10m，內裝吸附劑，內裝吸附劑 高分子多孔小球或涂漬固定液的載體高分子多孔小球或涂漬固定液的

40、載體 毛細管柱：內徑毛細管柱：內徑0.20.20.5mm0.5mm，長，長1010100m100m，一，一 般為空心柱，內壁或載體經涂漬或交聯般為空心柱，內壁或載體經涂漬或交聯 固定液固定液檢測器：檢測器：氫火焰離子化檢測器氫火焰離子化檢測器色譜圖：色譜圖：3030分鐘內記錄完畢分鐘內記錄完畢 （二）（二）GCGC法法色譜適用性實驗、色譜適用性實驗、測定法：同測定法：同HPLCHPLC精選課件67 第二節第二節 樣品分析的前處理方法樣品分析的前處理方法 第一節第一節 定量分析樣品的前處理方法定量分析樣品的前處理方法 一、概述一、概述 1. 1.結構特征與分析方法之間的關系結構特征與分析方法之間

41、的關系(2)(2)含金屬有機藥物含金屬有機藥物 (1)(1)含鹵素有機藥物含鹵素有機藥物 R-X R-X （F F，Cl, Br, I Cl, Br, I ）鹵素與脂肪鏈相連鹵素與脂肪鏈相連 R-X 結合較不牢固，不需有機破壞結合較不牢固，不需有機破壞含金屬有機藥物含金屬有機藥物 R-O-Me，有機酸或酚的金屬鹽，有機酸或酚的金屬鹽/配位化合物；配位化合物； 結合不牢固，可直接測定結合不牢固，可直接測定 有機金屬藥物有機金屬藥物 R-Me ，結合牢固，適當處理后測定結合牢固，適當處理后測定 鹵素與芳環相連鹵素與芳環相連 Ar-X 結合牢固，結合牢固， 需需/不需有機破壞不需有機破壞泛影酸泛影酸

42、三氯叔丁醇三氯叔丁醇富馬酸亞鐵富馬酸亞鐵硬脂酸鎂硬脂酸鎂醋酸苯汞醋酸苯汞精選課件682. 2. 藥物分析中常用的分析方法藥物分析中常用的分析方法經有機破壞的分析方法經有機破壞的分析方法不經有機破壞的分析方法不經有機破壞的分析方法精選課件69二、不經有機破壞的分析方二、不經有機破壞的分析方法法 終點：終點： 鄰二氮菲鄰二氮菲(+Fe3+)溶于熱稀礦酸溶于熱稀礦酸Fe2+鈰量法鈰量法Ce4+Fe3+指示劑指示劑:鄰二氮菲鄰二氮菲 (+Fe2+)紅色紅色淡藍色淡藍色（一）直接測定法（一）直接測定法 例如：富馬酸亞鐵的含量測定例如：富馬酸亞鐵的含量測定精選課件70（二）經水解后測定法（二）經水解后測定

43、法 CCl3-C(CH3)2-OH + 4NaOH (CH3)2CO +3NaCl + HCOONa +2H2O NaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 AgNO3 + NH4SCN AgSCN + NH4NO3 Mg(C17H35COO)2 + H2SO4 MgSO4 + 2C17H35COOH H2SO4 + 2NaOH Na2SO4 + 2H2O 1. 1. 堿水解后測定法堿水解后測定法適用于適用于X X與脂肪鏈相連的鹵代烷烴與脂肪鏈相連的鹵代烷烴例如：三氯叔丁醇的含量測定例如：三氯叔丁醇的含量測定 2. 2. 酸水解后測定法酸水解后測定法 例如：硬脂酸鎂的含量測定例如：硬脂

44、酸鎂的含量測定 精選課件71（三（三）經還原分解后測定法經還原分解后測定法 COOHIIINHCOCH3CH3CONHCOOHH2NNH2+ 11NaOH + 3Zn+ 3NaI + 2CH3COONa + 3NaZnO2 + 3H2O NaI + AgNO3 AgI + NaNO3 指示劑：曙紅鈉指示劑：曙紅鈉終點：黃終點：黃紅紅適用于適用于Ar-IAr-I的藥物的藥物 例如：泛影酸的含量測定例如：泛影酸的含量測定精選課件72三、經有機破壞的分析方法三、經有機破壞的分析方法凱氏定氮法凱氏定氮法34244442)(SOHN42NHSONHHSONHNaOHSOH 藥藥物物含含堿滴定堿滴定酸酸吸

45、收液吸收吸收液吸收/ 金屬原子、鹵素等與金屬原子、鹵素等與C C結合牢固者，必須有機破壞結合牢固者，必須有機破壞藥物分析中常用的有機破壞的方法有藥物分析中常用的有機破壞的方法有 干法破壞干法破壞濕法破壞濕法破壞 ( (一一) )濕法破壞濕法破壞H H2 2SOSO4 4-HNO-HNO3 3法法H H2 2SOSO4 4-HClO-HClO4 4法法H H2 2SOSO4 4- -硫酸鹽法硫酸鹽法H H2 2SOSO4 4-H-H2 2O O2 2,HNO,HNO3 3-KMnO-KMnO4 4法等法等精選課件73（二）干法破壞（二）干法破壞 2.2.氧瓶燃燒法氧瓶燃燒法測定測定吸收吸收無機離

46、子無機離子有機藥物有機藥物、含含吸收液吸收液、燃燒、燃燒 2OSePSX適用于含鹵素、適用于含鹵素、S S、P P等有機藥物分析的前處理，也等有機藥物分析的前處理，也用于某些藥物中用于某些藥物中SeSe及砷鹽的檢查及砷鹽的檢查1. 1. 高溫熾灼法高溫熾灼法 加加無水無水Na2CO3、硝酸鎂、氫氧化鈣、硝酸鎂、氫氧化鈣或或ZnO以助灰化以助灰化精選課件74 1） 儀器裝置儀器裝置 500ml, 1000ml, 2000ml, 磨口、硬質磨口、硬質 玻璃錐形瓶玻璃錐形瓶 2 2）稱樣）稱樣 固體樣；液體樣；固體樣；液體樣；軟膏類樣品軟膏類樣品要求要求3） 燃燒分解操作法燃燒分解操作法 4） 吸收

47、液的選擇吸收液的選擇 用于用于X、S、Se等的鑒別、檢查、等的鑒別、檢查、含量測定時多數是含量測定時多數是H2O或或H2O-NaOH；少數為少數為H2O-NaOH-H2O2.精選課件75應用示例：碘苯酯的測定應用示例：碘苯酯的測定精選課件76第三節第三節 藥品質量標準分析方法驗證藥品質量標準分析方法驗證均需對分析方法進行驗證均需對分析方法進行驗證驗證內容驗證內容：準確度、精密度、專屬性、檢測限、：準確度、精密度、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性定量限、線性、范圍和耐用性目的：證明采用的方法適合于相應檢測要求。目的：證明采用的方法適合于相應檢測要求。起草藥品質量標準起草藥品質量標準生產

48、工藝變更生產工藝變更制劑組分改變制劑組分改變原分析方法修訂原分析方法修訂精選課件77一、準確度一、準確度加加入入量量測測得得量量回回收收率率100 是指用該方法是指用該方法測定結果與真實值接近的程度測定結果與真實值接近的程度，用用回收率回收率表示表示（一）含量測定方法的準確度（一）含量測定方法的準確度 1. 1. 原料藥：可用已知純度對照品或供試品進行測原料藥：可用已知純度對照品或供試品進行測定；或與已知準確度的另一方法測定的結果進行定；或與已知準確度的另一方法測定的結果進行比較比較精選課件782. 2. 制劑：考察制劑：考察其他組分和輔料對回收率的影響其他組分和輔料對回收率的影響用用含已知量

49、被測物含已知量被測物的的制劑各組分混合物（包括制劑各組分混合物（包括制劑輔料）制劑輔料）進行測定，回收率計算同原料藥進行測定，回收率計算同原料藥向制劑中加入已知量的被測物進行測定向制劑中加入已知量的被測物進行測定與已知準確度的另一方法測定的結果進行比較與已知準確度的另一方法測定的結果進行比較精選課件79（二）具體做法：測定高、中、低三個濃度，（二）具體做法：測定高、中、低三個濃度，n=3, n=3, 共共9 9個個數據來評價回收率數據來評價回收率；用用UVUV和和HPLCHPLC法時，一般回收率可達法時，一般回收率可達9898.0%.0%102102.0%.0%；容量；容量法可達法可達99.7

50、%99.7%100.3%100.3%精選課件80回收率試驗回收率試驗精密稱取鹽酸小檗堿約精密稱取鹽酸小檗堿約40mg 40mg ，按處方比例加入，按處方比例加入其它組分和輔料，其它組分和輔料，用適量沸騰的用適量沸騰的 0. 05mol/L H0. 05mol/L H2 2SOSO4 4 溶解。放冷溶解。放冷置室溫，定量轉移至置室溫，定量轉移至250ml 250ml 量瓶中，并稀釋至刻度。過濾，棄量瓶中，并稀釋至刻度。過濾，棄去初濾液，取續濾液去初濾液，取續濾液 5.00ml 5.00ml 于于100ml 100ml 量瓶中并稀釋至刻度，量瓶中并稀釋至刻度，按所選定的方法計算回收率按所選定的方法

51、計算回收率。測定結果見下表。測定結果見下表。三波長分光光度法測定連蒲雙清片中鹽酸小檗堿的含量三波長分光光度法測定連蒲雙清片中鹽酸小檗堿的含量 100%(%)純品加入量加入純品后的測得量回收率精選課件81回收率試驗回收率試驗取連蒲雙清片粉適量（約相當于鹽酸小檗堿取連蒲雙清片粉適量（約相當于鹽酸小檗堿40mg)40mg)，精密稱取，精密加入鹽酸小檗堿約，精密稱取，精密加入鹽酸小檗堿約40mg40mg ，用，用0.05mol/L 0.05mol/L H H2 2SOSO4 4 溶解。放冷置室溫，定量轉移至溶解。放冷置室溫，定量轉移至250ml 250ml 量瓶中，并稀釋量瓶中，并稀釋至刻度。過濾，棄

52、去初濾液，取續濾液至刻度。過濾，棄去初濾液，取續濾液 5.00ml 5.00ml 于于100ml 100ml 量瓶量瓶中定容，中定容，按所選定的方法計算回收率按所選定的方法計算回收率。測定結果見下表。測定結果見下表。三波長分光光度法測定連蒲雙清片中鹽酸小檗堿的含量三波長分光光度法測定連蒲雙清片中鹽酸小檗堿的含量 100%-(%)純品加入量加入前的測得量加入純品后的測得量回收率精選課件822.2. 相對標準偏差相對標準偏差( (RSDRSD) ) 1. 1. 標準偏差標準偏差（SDSD或或S S） 112nxxSnii%100 xSRSDx二、精密度二、精密度（一）精密度表示方法（一）精密度表示

53、方法精選課件83（二）驗證內容（二）驗證內容 1. 1. 重復性重復性 在相同條件下在相同條件下, ,由由一個分析人員一個分析人員測定所測定所得結果的精密度得結果的精密度. . 2.2. 中間精密度中間精密度 在同一個實驗室，在同一個實驗室，不同時間由不不同時間由不同分析同分析 人員用不同設備人員用不同設備測定結果的精密度測定結果的精密度。 3.3. 重現性重現性 在在不同實驗室由不同分析人員不同實驗室由不同分析人員測定結測定結果的精果的精 密度。密度。（三）數據要求（三）數據要求均應報告標準偏差、相對標準偏差和可信限均應報告標準偏差、相對標準偏差和可信限精選課件84三、專屬性三、專屬性指在其

54、他成分指在其他成分( (如雜質、降解產物、輔料等如雜質、降解產物、輔料等) )可可能存在下，采用的方法能準確測定出被測物的特能存在下，采用的方法能準確測定出被測物的特性性 鑒別、雜質檢查、含量測定鑒別、雜質檢查、含量測定方法，均應考察方法，均應考察其專屬性其專屬性 （一）鑒別反應（一）鑒別反應 應能與其它共存的物質或相似化合物區分，應能與其它共存的物質或相似化合物區分，不含被測組分的樣品均應呈現負反應。不含被測組分的樣品均應呈現負反應。精選課件85（二）含量測定和雜質測定（二）含量測定和雜質測定 色譜法和其他分離法，應附代表性的圖譜，色譜法和其他分離法，應附代表性的圖譜，以說明專屬性。以說明專

55、屬性。 圖中應注明各組分的位置，色譜法中分離度應圖中應注明各組分的位置，色譜法中分離度應符合要求。符合要求。 在能獲得雜質的情況下，可加到試樣中，考察在能獲得雜質的情況下，可加到試樣中，考察對結果的干擾。對結果的干擾。 在雜質和降解物不能獲得的情況下，可用已驗在雜質和降解物不能獲得的情況下，可用已驗證方法或藥典方法進行對照；也可用對試樣加速證方法或藥典方法進行對照；也可用對試樣加速破壞的方法，比較兩種方法。破壞的方法，比較兩種方法。精選課件86 四、檢測限（四、檢測限（LODLOD) ) 是指試樣中被測物能被檢測出的是指試樣中被測物能被檢測出的最低濃度或最低濃度或量量，是限度檢驗指標。它無需準

56、確定量，只要指，是限度檢驗指標。它無需準確定量，只要指出高于或低于該規定的濃度或量即可。出高于或低于該規定的濃度或量即可。1. 1.目視法目視法 用含已知濃度被測物的試樣進行分用含已知濃度被測物的試樣進行分析，目視確定能被可靠地檢測出的被測物的最析，目視確定能被可靠地檢測出的被測物的最低濃度或量，常用于顯色鑒別法，低濃度或量，常用于顯色鑒別法，TLC TLC 2.2.當用當用GCGC和和HPLCHPLC法時，一般以法時，一般以S/NS/N2 2或或3 3時的時的相應濃度來確定檢測限。相應濃度來確定檢測限。精選課件87 五、定量限（五、定量限（LOQLOQ) ) 是指樣品中是指樣品中被測物能被被

57、測物能被定量測定定量測定的最低量的最低量，其測定結果應具一定準確度和精密度。其測定結果應具一定準確度和精密度。 雜質和降解產物進行定量測定時，要求雜質和降解產物進行定量測定時，要求LOQLOQ。常用信噪比法確定定量限，一般以常用信噪比法確定定量限，一般以S/N=10S/N=10時相應時相應的濃度進行測定。的濃度進行測定。精選課件88 六、線性六、線性是指在設計的范圍內，測試結果與試樣中被是指在設計的范圍內，測試結果與試樣中被測物濃度或量直接呈測物濃度或量直接呈正比正比關系的關系的程度程度。 回歸方程的回歸方程的相關系數（相關系數（r r）越接近越接近1 1，表明線性越，表明線性越好好 可用一貯

58、備液經精密稀釋，或分別精密稱樣，可用一貯備液經精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列（至少制備一系列（至少5 5份）供試液進行測定，以響應份）供試液進行測定，以響應值對濃度作圖，建立回歸方程，求出值對濃度作圖，建立回歸方程，求出r r。 如如UVUV：制備一個標準系列，濃度點：制備一個標準系列，濃度點n =5n =5 A=0.3-0.7 A=0.3-0.7 建立回歸方程建立回歸方程C = aA + bC = aA + b， r r0.99990.9999精選課件89七、范圍七、范圍 如如原料藥和制劑含量測定原料藥和制劑含量測定：應為測試濃度的：應為測試濃度的80%80%1 120%20%制劑含量

59、均勻度檢查制劑含量均勻度檢查：應為測試濃度的：應為測試濃度的70%70%130%130%。溶出度或釋放度中的溶出量測定溶出度或釋放度中的溶出量測定：應為限度的：應為限度的20%20%。是指達到一定精密度、準確度和線性、測是指達到一定精密度、準確度和線性、測試方法適用的高低限度或量的區間。試方法適用的高低限度或量的區間。精選課件90 八、耐用性八、耐用性是指在測定條件有小的變動時，是指在測定條件有小的變動時，測定結果測定結果不受影響的承受程度不受影響的承受程度。典型典型的變動因素有：被測溶液的穩定性、樣品的變動因素有：被測溶液的穩定性、樣品提取次數、時間等。提取次數、時間等。HPLCHPLC變動

60、因素有：流動相組成與變動因素有：流動相組成與pHpH，色譜柱，色譜柱，柱溫，流速等。柱溫，流速等。GCGC變動因素有：色譜柱，固定相，擔體、柱溫、變動因素有：色譜柱，固定相，擔體、柱溫、進樣口和檢測器溫度等。進樣口和檢測器溫度等。 精選課件91 分析方法效能指標的具體應用分析方法效能指標的具體應用：1. 1. 用于鑒別試驗：只要求專屬性、耐用性用于鑒別試驗：只要求專屬性、耐用性2. 2. 用于原料藥中雜質測定和制劑中降解產物測定的方法：用于原料藥中雜質測定和制劑中降解產物測定的方法： 用于定量：除檢測限不要求外，其余指標均要求。用于定量：除檢測限不要求外，其余指標均要求。 限度檢查：只要求檢測