1、精密度精密度S Sr準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度E Er選擇性選擇性標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍線性范圍靈敏度靈敏度檢出限檢出限吸收峰：吸收峰：曲線上吸光度最大的地方，它所對(duì)應(yīng)的波長稱最大吸收曲線上吸光度最大的地方，它所對(duì)應(yīng)的波長稱最大吸收波長（波長（maxmax）。）。谷：谷：峰與峰之間吸光度最小的部位，該處的波長稱最小吸收波長峰與峰之間吸光度最小的部位，該處的波長稱最小吸收波長（minmin）。）。肩峰肩峰（shoulder peakshoulder peak）：在一個(gè)吸收峰旁邊產(chǎn)生的一個(gè)曲折。）：在一個(gè)吸收峰旁邊產(chǎn)生的一個(gè)曲折。末端吸收末端吸收（end absorptionend absorption）：只

2、在圖譜短波端呈現(xiàn)強(qiáng)吸收而不）：只在圖譜短波端呈現(xiàn)強(qiáng)吸收而不成峰形的部分。成峰形的部分。1.1.吸收峰吸收峰 2.2.谷谷 3.3.肩峰肩峰 4.4.末端吸收末端吸收 根據(jù)物質(zhì)分子對(duì)200760nm這一范圍的光的吸收特性建立起來的定性、定量和結(jié)構(gòu)分析的方法。 朗伯朗伯比耳定律數(shù)學(xué)表達(dá)式比耳定律數(shù)學(xué)表達(dá)式 A-lg（It/I0)= b c 式中式中A A：吸光度；描述溶液對(duì)光的吸收程度；：吸光度；描述溶液對(duì)光的吸收程度； b b：液層厚度：液層厚度( (光程長度光程長度) )，通常以，通常以cmcm為單位；為單位； c c：溶液的摩爾濃度，單位：溶液的摩爾濃度，單位molLmolL； ：摩爾吸光系

3、數(shù)，單位：摩爾吸光系數(shù)，單位LmolLmolcmcm；透光率透光率T T : : 描述入射光透過溶液的程度描述入射光透過溶液的程度: : T = I t/ I0吸光度吸光度A A與透光率與透光率T T的關(guān)系的關(guān)系: : A lg T 吸光系數(shù)的幾種表示方法吸光系數(shù)的幾種表示方法CbA abCA bCEA1%1cm MaE10 101%1cm摩爾吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù)在數(shù)值上等于在數(shù)值上等于濃度為濃度為1 mol/L、液層厚度為、液層厚度為1cm時(shí)該溶液在某一波長下的吸光度；時(shí)該溶液在某一波長下的吸光度；吸光系數(shù)吸光系數(shù)a(Lg-1cm-1）相當(dāng)于）相當(dāng)于濃度為濃度為1 g/L、液層厚度為、液層厚

4、度為1cm時(shí)該溶液在某一波長下的吸光度；時(shí)該溶液在某一波長下的吸光度；比吸光系數(shù)指物質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為比吸光系數(shù)指物質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%，液層厚度為，液層厚度為1cm時(shí)該時(shí)該溶液在某一波長下的吸光度。溶液在某一波長下的吸光度。某一溶液在測量波長下透光率值為0.100. (a)該溶液的吸光度是多少？ (b)如果該溶液的濃度是0.02g/L,并在1CM的比色皿中測量透光率，在測定波長下，該化合物的比吸收系數(shù)是多少？ (c)如果該化合物的分子量為100，它的摩爾吸光系數(shù)是多少？ (d)計(jì)算該溶液在5CM的比色皿中所預(yù)期的透光度？ 紫外紫外可見分光光度計(jì)基本組成可見分光光度計(jì)基本組成 光源光源單色器單色器樣

5、品室樣品室檢測器檢測器顯示顯示1. 1. 光源光源 在整個(gè)紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有在整個(gè)紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。 可見光區(qū)：鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在可見光區(qū)：鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在3503501000 nm1000 nm。 紫外區(qū)：氫、氘燈。發(fā)射紫外區(qū)：氫、氘燈。發(fā)射160160375 nm375 nm的連續(xù)光譜。的連續(xù)光譜。 將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出一任將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出一任 波長單色光的光學(xué)系統(tǒng)。波長單色光的

6、光學(xué)系統(tǒng)。 2.2.單色器單色器3. 3. 樣品室樣品室 樣品室放置各種類型的吸收池樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和相應(yīng)的池架附件。吸（比色皿）和相應(yīng)的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池兩種。收池主要有石英池和玻璃池兩種。在紫外區(qū)須采用石英池，可見區(qū)一在紫外區(qū)須采用石英池，可見區(qū)一般用玻璃池。般用玻璃池。4. 4. 檢測器檢測器 利用光電效應(yīng)將透過吸收池的利用光電效應(yīng)將透過吸收池的光信號(hào)變成可測的電信號(hào)，常用的光信號(hào)變成可測的電信號(hào)，常用的有光電池、光電管或光電倍增管。有光電池、光電管或光電倍增管。5. 5. 結(jié)果顯示記錄系統(tǒng)結(jié)果顯示記錄系統(tǒng) 檢流計(jì)、數(shù)字顯示、微機(jī)進(jìn)行檢流計(jì)、數(shù)字顯示

7、、微機(jī)進(jìn)行儀器自動(dòng)控制和結(jié)果處理。儀器自動(dòng)控制和結(jié)果處理。原子吸收與分子吸收 氣相色譜氣相色譜 - - 用氣體作流動(dòng)相用氣體作流動(dòng)相液相色譜液相色譜 - - 用液體作流動(dòng)相用液體作流動(dòng)相按流動(dòng)相所處的狀態(tài)分類按流動(dòng)相所處的狀態(tài)分類氣氣固色譜固色譜氣氣液色譜液色譜液液固色譜固色譜液液液色譜液色譜色譜法的分類色譜法的分類超臨界流體色譜超臨界流體色譜一、色譜流出曲線或色譜圖一、色譜流出曲線或色譜圖 以檢測器對(duì)組分的響應(yīng)信號(hào)為縱坐標(biāo)，流出時(shí)間以檢測器對(duì)組分的響應(yīng)信號(hào)為縱坐標(biāo)，流出時(shí)間( (或流或流出體積出體積) )為橫坐標(biāo)作圖所得的曲線，這種曲線即稱為色譜流出為橫坐標(biāo)作圖所得的曲線，這種曲線即稱為色譜

8、流出曲線，也稱色譜圖。曲線，也稱色譜圖。 Rf (t, V) Rf (t, V)二、色譜流出曲線構(gòu)成：二、色譜流出曲線構(gòu)成：由由基線和色譜峰基線和色譜峰組成。組成。基基 線：指線：指僅有流動(dòng)相通過而沒有待測物，檢測器響應(yīng)信號(hào)隨僅有流動(dòng)相通過而沒有待測物，檢測器響應(yīng)信號(hào)隨流出時(shí)間的變化流出時(shí)間的變化，穩(wěn)定的基線應(yīng)是一條水平直線。，穩(wěn)定的基線應(yīng)是一條水平直線。色譜峰：在色譜峰：在基線上突起的部分基線上突起的部分，它是由引入流動(dòng)相中被測物引，它是由引入流動(dòng)相中被測物引起的。起的。描述色譜峰三種參數(shù)峰高(或峰面積) 峰的大小區(qū)域?qū)挾?峰的形狀保留值 峰的位置 (時(shí)間t、體積v) 色譜峰色譜峰高斯分布曲

9、線高斯分布曲線 色譜流出曲線可以得到那些信息？1.1.樣品含最少組分樣品含最少組分( (峰個(gè)數(shù)峰個(gè)數(shù)) ) 2.2.根據(jù)色譜峰的保留值可以進(jìn)行定性分析根據(jù)色譜峰的保留值可以進(jìn)行定性分析3.3.根據(jù)色譜峰的面積或峰高可以進(jìn)行定量分析根據(jù)色譜峰的面積或峰高可以進(jìn)行定量分析4.4.根據(jù)色譜峰的位置和區(qū)域?qū)挾瓤蓪?duì)色譜柱效根據(jù)色譜峰的位置和區(qū)域?qū)挾瓤蓪?duì)色譜柱效能進(jìn)行評(píng)價(jià)能進(jìn)行評(píng)價(jià) 通常用通常用R Rs s = 1.5 = 1.5 作為相鄰兩色譜峰完全分開的指標(biāo)作為相鄰兩色譜峰完全分開的指標(biāo) R R=0.8=0.8：兩峰的分離程度可達(dá)：兩峰的分離程度可達(dá)89%89%；R R=1=1：分離程度：分離程度98

10、%98%；R R=1.5=1.5：達(dá)：達(dá)99.7%99.7%（相鄰兩峰完全分離的標(biāo)準(zhǔn)）。（相鄰兩峰完全分離的標(biāo)準(zhǔn)）。 R=0.75 R=1 R=1.5 R=0.75 R=1 R=1.5意義意義: :分離度是色譜圖中相鄰兩峰分離程度的量度分離度是色譜圖中相鄰兩峰分離程度的量度 分離度 此外還配有自動(dòng)進(jìn)樣及數(shù)據(jù)處理等輔助裝置。此外還配有自動(dòng)進(jìn)樣及數(shù)據(jù)處理等輔助裝置。 色譜柱是液相色譜的心臟部件，它包括色譜柱是液相色譜的心臟部件，它包括柱管柱管與與固定相固定相兩部分。兩部分。 柱管材料有玻璃、不銹鋼、鋁、銅及內(nèi)襯光柱管材料有玻璃、不銹鋼、鋁、銅及內(nèi)襯光滑的聚合材料的其他金屬。玻璃管耐壓有限，故滑的聚

11、合材料的其他金屬。玻璃管耐壓有限，故金屬管用得較多。金屬管用得較多。 一般色譜柱長一般色譜柱長1030cm，內(nèi)徑為，內(nèi)徑為45mm，凝膠色譜柱內(nèi)徑凝膠色譜柱內(nèi)徑312mm，制備柱內(nèi)徑較大，可，制備柱內(nèi)徑較大，可達(dá)達(dá)25mm 以上。以上。 例例: :已知混合物中乙基苯、鄰二甲苯、間二甲苯的峰面積和校正因子見下表已知混合物中乙基苯、鄰二甲苯、間二甲苯的峰面積和校正因子見下表, ,死時(shí)間為死時(shí)間為0.5min,0.5min,用歸一化法測定混合物中的乙基苯、鄰二甲苯、間二甲苯用歸一化法測定混合物中的乙基苯、鄰二甲苯、間二甲苯的含量。的含量。乙基苯鄰二甲苯間二甲苯保留時(shí)間3.005.009.00A (mVmin)140120105fis0.960.970.98解：乙基苯 =1400.96/(1400.96+1200.97+1050.98)=38.0%同理，求出鄰二甲苯i=32.9% 間二