1、乳酸菌的乳酸菌的分離分離篩選篩選2012年4月16日Page 2n乳酸菌的分類n乳酸菌的篩選n乳酸菌的應用Page 3第一部分、乳酸菌的分類第一部分、乳酸菌的分類運動性運動性：通常不運動，有的能 夠運動,具有周生鞭毛。營養類型營養類型：化能異氧型需氧情況需氧情況：微好氧性1 1、乳桿菌屬（、乳桿菌屬（Lactobacillus）形態：形態：細胞呈長或細長桿狀、彎曲形短桿狀,一 般成鏈狀排列Page 4 形態形態：細胞呈球形或卵圓形，成對或成鏈排列 運動性運動性：一般不遠動 營養類型營養類型：化能異養型 需氧情況需氧情況：兼性厭氧型2、鏈球菌屬（鏈球菌屬（Streptococcus）Page 5

2、 形態：形態：細胞球形或豆狀，成 對或成鏈排列 運行性：運行性：不運動 營養類型：營養類型：化能異養型 需氧情況：需氧情況：兼性厭氧型3 3、明串珠菌屬（、明串珠菌屬（Leuconostoc）Page 6形態：形態：細胞呈多樣形態：Y字形、 V字形、彎曲狀、勺形，典 形形態為分叉桿菌運行性：運行性：不運動營養類型：營養類型：化能異養型需氧情況：需氧情況：專性厭氧4 4、雙歧桿菌屬（、雙歧桿菌屬（Bifidobacterium ）Page 7 形態：形態：細胞球形，成對或四聯狀 排列 運行性：運行性：不運動 營養類型：營養類型：化能異養型 需氧情況：需氧情況：兼性厭氧5 5、片球菌屬（、片球菌屬

3、（Pediococcus）Page 8第二部分、乳酸菌的篩選 乳酸菌絕大多數都是厭氧菌或兼性厭氧的化能營養菌。生長繁殖于厭氧或微好氧、礦物質和有機營養物豐富的環境中。具體如下： （1）與動物相關分布：乳汁、消化道、糞便等； （2）與植物相關分布：花蜜、樹液、植物殘骸、果實損傷部位等； （3）發酵食品：泡菜、醬油、發酵肉制品等； （4）乳酸飲料：酸奶等。 一、乳酸菌的分布一、乳酸菌的分布Page 9 （一）溶鈣圈法（一）溶鈣圈法 利用一些產酸類細菌在含CaCO3的培養基上產生CaCO3溶解圈，從而篩選出這些產酸類細菌，可用于乳酸菌的篩選。 其中培養基中加入CaCO3的作用是： 鑒別能產生酸的細菌

4、； 中和產生的酸，以維持培養基的PH。二、篩選方法二、篩選方法Page 10 1 1、乳酸菌篩選培養基（、乳酸菌篩選培養基（MRS培養基）培養基） 配方（1L）: 蛋白胨 10.0g，牛肉膏 10.0g，酵母提取物 5.0g，K2HPO4 2.0g，檸檬酸三銨 2.0g，乙酸鈉 5.0g，葡萄糖 20.0g，吐溫80 1.0mL，MgSO47H2O 0.5g，MnSO44H2O 0.25g配制：1.調PH至6.26.4；2.稱取20g CaCO3加入到100mL蒸餾水中，制成CaCO3乳濁液；3.將MRS培養基和CaCO3乳濁液分開滅菌；4.倒平板前，待培養基融化冷卻后，平板上加入一定量的Ca

5、CO3乳濁液，晾干了以后再接種。Page 11 樣品預處理梯度稀釋至10-6選擇合適的稀釋度涂布37培養48h挑選產生溶鈣圈的菌落反復在MRS培養基上劃線挑起單菌落染色，經鏡檢確認為純種挑選革蘭氏陽性單菌落試管穿刺4冰箱保存。2、篩選過程、篩選過程Page 12（二）溴甲酚綠指示劑法（二）溴甲酚綠指示劑法1 1、培養基：、培養基：MRS培養基（含溴甲酚綠酒精溶液）2 2、篩選過程、篩選過程：同上，不同之處是稀釋涂布后長出菌落，挑取使溴甲酚綠變色的菌落。Page 13（三）幾種乳酸菌篩選舉例（三）幾種乳酸菌篩選舉例 樣品來源：市售酸奶 培養基： M17改良培養基 培養溫度：42 需氧情況：兼性厭

6、氧 篩選方法：常規的稀釋涂布 和劃線分離1、嗜熱鏈球菌、嗜熱鏈球菌Page 142、 保加利亞乳桿菌保加利亞乳桿菌 樣品來源：市售酸奶 培養基：牛肉浸膏 1.5，酵母浸膏 0.5，葡萄糖 3.0，檸檬酸三銨 0.2，七水硫酸鎂 0.02，瓊脂 1.5，pH 5.1。 培養溫度：42 需氧情況：兼性厭氧 篩選方法：常規的稀釋涂布和劃線分離法Page 15 樣品來源：嬰兒新鮮糞便 培養基：MRS培養基、NPNL培養基 、TYP培養基、 PTYG培養基 培養溫度：37 需氧情況：嚴格厭氧 篩選方法：常規的稀釋涂布和劃線分離法3、 雙歧桿菌雙歧桿菌Page 16第三部分、第三部分、乳酸菌的應用乳酸菌的

7、應用 1、乳酸菌在食品、飲料中的應用 （1）酸奶；（2）乳酸飲料；（3）釀造調味品中的應用；（4）功能性食品的開發；（5）防腐、保鮮；（6）肉制品加工；（7）腌漬物等。Page 172、乳酸菌在醫藥中的應用（1）乳酸菌素；（2）-氨基丁酸(GABA)Page 183、開發可降解的聚乳酸塑料Page 19 （1）聚乳酸（PLA）簡介 聚乳酸是以微生物發酵產物乳酸為單體用化學合成方法聚合而成的一種高分子材料，它無毒、無刺激性。 聚乳酸制品廢棄后在土壤或水中，30天內會在微生物、水、酸和堿的作用下徹底分解成CO2和H2O，不會對環境產生污染，因而是一種完全可生物降解的材料。Page 20目前聚乳酸的

8、生產和制備主要有： （2）聚乳酸的生產過程直接聚合法；間接法；聚合法。Page 21（3）聚乳酸的應用醫用領域：如生產一次性輸液用具、免拆型手術縫合線、骨科用固定件及手術器件、醫用支架、生物導管等；包裝材料：目前，各種包裝材料是聚乳酸最大、最有潛力的應用市場。適合于加工一次性飯盒以及其他食品、飲料等外包裝材料等；纖維：聚乳酸纖維是由聚乳酸經常規紡絲工藝制得的生物合成纖維，可制成復絲、單絲、短纖維、針織物、非織造布等，還可用作建筑材料、農業用材等。 Page 22 PLA作為一個新型的醫用、生物可降解塑料在我國有廣闊的市場發展前景。生物降解塑料大多數是天然高分子與常用塑料復合體系，或基于天然高分子(主要是淀粉、纖維素)的改性。 PLA合成直鏈脂肪族聚酯，在醫用領域是