1、    肝星狀細胞凋亡及其調控 醫學論文               關鍵詞肝星狀細胞；肝纖維化；凋亡；綜述 目前 認為肝纖維化(HF)發生的中心事件是，由各種慢性肝損傷引起肝星狀細胞(HSC)的激活并轉化為肌成纖維細胞(MF)，從而大量合成各種細胞外基質(ECM)沉積于肝臟，最終導致了HF。在HF恢復期存在廣泛性的HSC凋亡1。作者就近年來有關HSC凋亡及其調控的 研究 進展作一綜述。1  HF逆轉與HSC凋亡本文由中國論文

2、范文收集整理。近10年來，越來越多的臨床及實驗證據表明，HF是可以逆轉的。1997年Saile等通過HSC的體內和體外研究發現，在HSC激活的過程中可以觀察到HSC的凋亡現象，且隨著激活過程的進展，凋亡數目所占的比例也逐漸增加。靜止期沒有凋亡現象；過渡期凋亡比例為8±5；激活期則為18±8。這種HSC凋亡可能是HF過程中一種自身的保護和修復機制。研究表明，在HF恢復期，激活狀態的HSC減少主要通過凋亡機制，而不是表型的轉化。在纖維化逆轉過程中，隨著活化HSC數量減少，ECM合成數量下降，減少了ECM在肝臟中的積聚，基質金屬蛋白酶組織抑制因子(TIMPs)的分泌快速下降，減少

3、了對基質金屬蛋白酶(MMPs)活性的抑制，而MMPs的表達仍維持在HF時的水平，從而導致降解ECM的作用相對增強，HF發生逆轉。Gong等的實驗結果證明,HSC凋亡是轉化依賴性的，即轉化中與激活后的HSC才能發生凋亡并且與激活程度相平行。因此，HSC凋亡的前提是其表型由靜止向激活轉化。2  HSC凋亡途徑 21  Fas(CD95/Apo1)/FasL(CD95L/Apo1L)介導Fas是一種重要的凋亡介質，誘導表達Fas的細胞對FasL發生反應性凋亡。Saile等發現HSC凋亡誘導與FasL有關，HSC在體外激活過程中表達Fas和FasL。在急性肝損傷的恢復過程中，能檢測

4、到HSC凋亡與HSC數量的減少，且二者相平行。HSC和MF暴露于可溶性FasL的試驗證實，MF屬于免疫介導的細胞凋亡。在轉化為MF的過程中，HSC對FasL誘導的凋亡變得敏感，而未被刺激的HSC則表現出抵抗，如果RNA或蛋白質合成被阻斷，MF則對FasL介導的凋亡變得高度敏感，這表明在肝中MF是FasL介導凋亡的靶細胞。肝特異性 自然 殺傷細胞，如陷窩細胞(pit cell,PC)在細胞凋亡過程中可能發揮重要作用，因為這些細胞是FasL的載體。CD95(Fas)拮抗抗體能完全阻斷HSC的凋亡，而CD95(Fas)激動抗體可誘使高達95%的活化HSC進入凋亡并表達p53。研究發現，培養的HSC能

5、抵抗可溶性FasL介導的凋亡，可溶性FasL則強烈誘導肝細胞凋亡2。22  p75/NGF(nerve growth factor,神經生長因子)介導    p75是低親和性的神經生長因子受體(NGFR)，是腫瘤壞死因子(TNF)受體超家族成員，也是神經營養肽家族的一種受體。NGF是它的典型配體。Trim等3發現在靜止狀態的培養大鼠HSC不表達p75，培養7d(活化)和14d(高度活化)則能檢測到p75的表達，且數量呈進行性增加。在纖維化的人肝臟切片上通過平滑肌肌動蛋白(SMA)和p75雙染色，確定p75陽性的HSC也是SMA陽性的HSC。在血清存在的條

6、件下，用100ngml-1 NGF作用24h使激活的HSC凋亡數量比僅用單純血清培養自然凋亡數高15倍，表明NGF誘導的凋亡反應不被存在于血清中的生長因子減弱。同時，100ngml-1 NGF不 影響 HSC增生，而HSC總數減少19%，表明NGF介導的HSC凋亡能使HSC的增生與凋亡失衡，而有利于HSC數量的減少。研究還發現，在硬化肝的纖維化區的肝細胞強烈表達Fas，不表達p75，而激活的HSC極少或不表達Fas，卻強烈表達p75。23  PBR（外周苯二氮卓類受體）/PBRL介導Fisher等研究了一種新的凋亡誘導機制，它涉及到培養的HSC向MF自發激活過程中外周苯二氮卓類受體(

7、PBR)時間依賴性的表達。苯二氮卓類(BZDs)主要有兩個明顯不同的結合位點，一是中央型受體，位于腦，介導抗焦慮、抗驚厥和鎮靜作用；另一是廣泛表達的外周型受體。PBR的相對分子質量為18000，位于線粒體外膜上。靜止的HSC不表達PBR，HSC培養3d后開始表達PBR，79d表達達到高峰，HSC的凋亡也達到高峰，3周后檢測不到PBR的表達，HSC因凋亡而大量消失。表明PBR誘導HSC凋亡對于HSC向MF轉化的調節相當重要，而與MF的消除無關。PBR選擇性配體1(2chlorophenyl)NmethylN(1methylpropyl)3isoquinolinecarboxamide(PK95)

8、和4chlorodiazazepam(Ro54864)劑量依賴地誘導HSC凋亡。PBR配體能在HSC增加半胱氨酸蛋白酶3(caspase3)的活性，不能在PC增加caspase3的活性。因此，有可能使用高親和力、高選擇性的PBR配體，把線粒體作為HF 治療 的新靶點4。3  HSC凋亡的調控 31  蛋白對HSC凋亡的調控311  核因子B（NFB）抑制蛋白（IB） Lang等5研究發現NFB只表達于激活的HSC，能夠抑制TNF介導的活化HSC所發生的凋亡，認為這種作用可能是通過誘導或者上調抗凋亡蛋白Bcl2和Bclx1的表達來實現的。IB能與NFB相關蛋白質家族

9、成員組成的同源或異源二聚體結合，存在于細胞質中，使NFB失活。Lang認為其原因可能與IB能夠掩蓋NFB核定位信號，從而阻止NFB進入核內實現其抗凋亡作用有關。312  CCAAT增強子結合蛋白(C/EBPs)  C/EBPs最初從大鼠肝臟中發現，因其能與啟動子的CCAAT區和多種病毒增強子相結合而命名，屬于bZIP(basic region/leucine zipper)DNA結合蛋白超家族。研究證實，C/EBPs與HSC向脂肪細胞分化及去分化密切相關，并且該基因表達的改變與HSC的激活有因果關系。將C/EBP基因轉染到激活的HSC使其過表達，不僅可使消失的脂滴重新形成，而且SMA由強表達變為陰性，I型前膠原蛋白的產生被抑制了7884%，同時HSC的增生也受到抑制。 關鍵詞:調控,及其,細胞,HSC,凋亡,表達,醫學論文,肝星狀細胞凋亡及其調控 內容摘要:關鍵詞肝星狀細