1、膽固醇測定試劑盒分析性能評估資料山東高密彩虹分析儀器有限公司目錄1概述2膽固醇測定試劑盒及相關(guān)信息3性能評估資料檢測限評估資料線性范圍評估資料可報告范圍評估資料準(zhǔn)確性（回收實驗）評估資料準(zhǔn)確性（方法學(xué)比對）評估資料精密度評估資料干擾實驗評估資料配對差異檢驗劑量效應(yīng)實驗以病人標(biāo)本評價干擾效果實驗穩(wěn)定性評估資料參考值（參考區(qū)間）評估資料4.結(jié)論膽固醇測定試劑盒分析性能評估資料1概述本報告是根據(jù)體外診斷試劑分析性能評估系列指導(dǎo)原則（征求意見稿）的要 求，提交了膽固醇測定試劑盒的分析性能評估資料，對試劑盒涉及的性能指標(biāo)分別進(jìn)行檢測，評估其是否符合設(shè)計研究的要求。本報告對所有的實驗進(jìn)行了總結(jié)，具體數(shù)據(jù)及

2、結(jié)論如下：2膽固醇測定試劑盒及相關(guān)信息膽固醇測定試劑盒批號和規(guī)格用于性能評估的膽固醇測定試劑盒批號分別為* , *, *。本產(chǎn)品設(shè) 計了兩種包裝規(guī)格，只是大小包裝不同，對性能評估結(jié)果沒有影響。因此只對其中一 種規(guī)格進(jìn)行了測定，規(guī)格為：*。校準(zhǔn)品和質(zhì)控品用于性能評估的校準(zhǔn)品為*;質(zhì)控品為*試驗儀器用于性能評估的儀器為*生化分析儀。3性能評估資料檢測限評估資料實驗要求實驗人員應(yīng)熟悉檢測方法與儀器操作；采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持儀 器處于正常狀態(tài)；用于實驗的試劑應(yīng)為同一批號，且在有效期內(nèi)。實驗材料和方法采用5%牛血清白蛋白溶液作為空白樣本，空白樣本應(yīng)不含被測物。在生化 分析儀上連續(xù)檢測20次，記

3、錄檢測結(jié)果。實驗結(jié)果*生化分析儀測定值：批號1：批號2：批號3：結(jié)果:計算20次結(jié)果的均值X與標(biāo)準(zhǔn)差SDo以空白均值加兩倍標(biāo)準(zhǔn)差作為報告方法的檢測限。（X+2SD）平均值1SD2SD檢測限批號1:批號2：批號3：結(jié)論:三批試劑在*生化分析儀上的檢測限為：XXXXXX范圍之間，滿足產(chǎn)品設(shè)計要求。線性范圍評估資料實驗要求（1）實驗操作人員應(yīng)熟悉方法原理與操作，能對樣本進(jìn)行正確處理，確保儀 器工作狀態(tài)正常，采用適當(dāng)?shù)男?zhǔn)品對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。（2）儀器的各項性能指標(biāo)（如精密度）應(yīng)與標(biāo)稱值相符，不存在明顯的攜帶 污染等。（3）應(yīng)使用同批號試劑及校準(zhǔn)品。（4）樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床實驗樣本相似，但不可采用含有對測

4、定方法具有明確 干擾作用物質(zhì)的樣本，如溶血、脂血、黃疸或含有某些特定藥物的樣本。（5）所選用的濃度水平應(yīng)可覆蓋整個預(yù)期測定范圍并包括與臨床有關(guān)的重 要評價濃度，如最小測定濃度或線性范圍的最低限、不同的醫(yī)學(xué)決定水平、最大 測定濃度或線性范圍的高限等。實驗材料和方法采用5%牛血清白蛋白基質(zhì)溶液制備高值線性樣本，進(jìn)行 11個等濃度間隔稀 釋，用編碼代表每個樣本的相對濃度。用連續(xù)整數(shù)（1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11）代表連續(xù)樣本。數(shù)據(jù)處理時用樣本號代替 X值。在同一天內(nèi)用同一批號 和樣本進(jìn)行線性實驗，對所有樣本測定 4次，取其均值進(jìn)行結(jié)果計算和判斷。實驗結(jié)果批號1：線性評價數(shù)據(jù)記錄表（

5、11個濃度水平，重復(fù)測定4次）項目：試劑：樣品：儀器：試劑批號：校準(zhǔn)品/批號：樣本號測定1測定2測定3測定4均值1234567891011操作者:審核者:測定日期:結(jié)果計算:數(shù)據(jù)經(jīng)可用性檢查和精密度檢驗后，進(jìn)行多項式回歸分析，在檢測范圍內(nèi), 本試劑結(jié)果為線性，其直線回歸方程：Y = bO + blXr 值二 2。批號2：線性評價數(shù)據(jù)記錄表（11個濃度水平，重復(fù)測定4次）項目：試劑：樣品：儀器：試劑批號：校準(zhǔn)品/批號：操作者：審核者：測定日期：樣本號測定1測定2測定3測定4均值1234567891011結(jié)果計算:數(shù)據(jù)經(jīng)可用性檢查和精密度檢驗后，進(jìn)行多項式回歸分析，在檢測范圍內(nèi), 本試劑結(jié)果為線性

6、，其直線回歸方程：Y = bO + blXr 值二 2。批號3：線性評價數(shù)據(jù)記錄表（11個濃度水平，重復(fù)測定4次）項目：試齊!J：樣品：儀器：試劑批號：校準(zhǔn)品/批號：操作者：審核者：測定日期：樣本號測定1測定2測定3測定4均值1234567891011結(jié)果計算:數(shù)據(jù)經(jīng)可用性檢查和精密度檢驗后，進(jìn)行多項式回歸分析，在檢測范圍內(nèi), 本試劑結(jié)果為線性，其直線回歸方程：Y = bO + blXr 值二 。結(jié)論:結(jié)論：三個批號的檢定試劑盒在*分析儀器上進(jìn)行的線性性能評估，實驗結(jié) 果表明試劑檢測一級線性范圍為：噂*之間，符合設(shè)計要求。可報告范圍評估資料 實驗要求（1）實驗人員應(yīng)熟悉測定方法與儀器操作。（2

7、）采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持儀器處于正常狀態(tài)。（3）用于評價實驗的試劑應(yīng)為同一批號，并在有效期內(nèi)。實驗材料和方法采用經(jīng)準(zhǔn)確度、精密度和線性實驗合格的同一批試劑，評估5個低濃度水平樣本和3個高濃度水平樣本。（1）低值樣本：將待測樣本（含被分析物）用混合人血清（含被分析物濃度 水平較低）或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液進(jìn)行稀釋，產(chǎn)生接近于方法線性范圍 低限濃度水平的樣本，要求為5個濃度水平，濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的 10%o（2）高值樣本：選取含被測物的高值樣本。使用混合血清或5%牛血清白蛋白 生理鹽水溶液或測定方法要求的稀釋液對高值待測樣本進(jìn)行稀釋，使其接近于線性范圍的上1/3區(qū)域內(nèi)，

8、并記錄稀釋倍數(shù)。至少選用三個高濃度樣本，稀釋倍數(shù) 應(yīng)為方法性能標(biāo)明的最大稀釋倍數(shù)、并適當(dāng)增加或減小稀釋比例。在一次運行中將低值樣本重復(fù)測定10次，高值稀釋樣本重復(fù)測定3次。實驗結(jié)果試劑批號1:可報告范圍（低限）數(shù)據(jù)記錄表濃度1濃度2濃度3濃度4濃度512345678910AVESDCV%濃度2 濃度3123AVE稀釋倍數(shù)還原濃度理論濃度相對偏差（%）濃度1可報告范圍（高限）數(shù)據(jù)記錄試劑批號2：可報告范圍（低限）數(shù)據(jù)記錄表濃度1濃度2濃度3濃度4濃度512345678910AVESDCV%可報告范圍（高限）數(shù)據(jù)記錄濃度1濃度2濃度3123AVE稀釋倍數(shù)還原濃度理論濃度相對偏差（）試劑批號3：可報

9、告范圍（低限）數(shù)據(jù)記錄表濃度1濃度2濃度3濃度4濃度512345678910AVESDCV%可報告范圍（高限）數(shù)據(jù)記錄濃度1濃度2濃度3123AVE稀釋倍數(shù)還原濃度理論濃度相對偏差（）結(jié)果判定：（1）可報告范圍低限：以方法性能標(biāo)示的 CV值為可接受界值，由數(shù)據(jù)中選 取CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平做為可報告范圍低限。（2）可報告范圍高限：選取還原濃度與理論濃度的偏差（%）等于或小于方法 標(biāo)示CV值時的最大稀釋倍數(shù)為方法推薦的最大稀釋倍數(shù)，方法線性范圍的上限與 最大稀釋倍數(shù)的乘積為該方法可報告范圍的高限。結(jié)論：本試劑可報告范圍為：之間。準(zhǔn)確性(回收實驗)評估資料實驗要求(1)實驗人員應(yīng)

10、熟悉測定方法與儀器操作。(2)采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持儀器處于正常狀態(tài)。實驗材料和方法(1)選擇合適濃度的常規(guī)檢測樣本，分為體積相同的3-4份。(2)在其中2-3份樣本中加入不同量的待測物標(biāo)準(zhǔn)，制成 2-3個不同加入濃 度的回收樣本，計算加入的待測物的濃度。(3)在另一份樣本中加入同樣量的無被測物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。采用本試劑待評價方法對回收樣本和基礎(chǔ)樣本進(jìn)行2-3次重復(fù)測定分析，取其均值進(jìn)行計算。實驗結(jié)果：批號1：測定濃度mmol/L加入濃度mmol/L回收濃度mmol/L回收率%基礎(chǔ)樣本分析樣本1分析樣本2批號2：測定濃度mmol/L加入濃度mmol/L回收濃度mmol/L回收率%

11、基礎(chǔ)樣本分析樣本1分析樣本2批號3：測定濃度mmol/L加入濃度mmol/L回收濃度mmol/L回收率%基礎(chǔ)樣本分析樣本1分析樣本2結(jié)論:平均回收率：比例系統(tǒng)誤差：-TEa = 5%lTEa 5%>1%,準(zhǔn)確度（回收試驗）可接受，符合試劑盒設(shè)計2O要求。準(zhǔn)確性（方法學(xué)比對）評估資料實驗要求（1）按照實驗對樣品的要求收集處理病人樣品，樣本貯存時間及條件由被測 組分的穩(wěn)定性而定，盡可能避免使用貯存的樣品。（2）樣品應(yīng)來自于許多病人，并且此病人的疾病對于被測組成的影響應(yīng)該是 已知的，不要使用含有干擾此方法的組分或條件（如溶血）樣品。（3）在具有臨床意義范圍內(nèi)即醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)，評價實驗樣品方

12、法，通 常基本從低于參考范圍的低限到高于參考范圍的高限。分析濃度盡可能在報告的 濃度范圍內(nèi)均勻分布。商品質(zhì)控物或者校準(zhǔn)物可能存在基質(zhì)效應(yīng)，應(yīng)避免使用。實驗材料和方法（1）每天選擇8個臨床病人樣本，按1到8的順序編號。用兩種方法同時進(jìn)行 實驗，按照1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1的樣本順序進(jìn)行 測定。（2）以上實驗至少重復(fù)5天，即至少分析40個不同的臨床病人樣本。每天實 驗必須進(jìn)行校準(zhǔn)和室內(nèi)質(zhì)控。只有在室內(nèi)質(zhì)控合格的情況下，當(dāng)天的實驗室數(shù)據(jù)才 有效。實驗結(jié)果批號1：比對實驗數(shù)據(jù)記錄表日期：項目：實驗方法：比較方法：1樣本實驗方法（丫）比

13、較方法（X）編號結(jié)果1結(jié)果2均值差值結(jié)果1結(jié)果2均值差值12345678910111213141516171819202122232425262728293031323334353637383940批號2：比對實驗數(shù)據(jù)記錄表日期：項目：實驗方法：比較方法：樣本編號實驗方法（Y）比較方法（X）結(jié)果1結(jié)果2均值差值結(jié)果1結(jié)果2均值差值12345678910111213141516171819202122232425262728293031323334353637383940批號3：比對實驗數(shù)據(jù)記錄表日期：項目：實驗方法：比較方法：樣本編號實驗方法（Y）比較方法（X）結(jié)果1結(jié)果2均值差值結(jié)果1結(jié)果2

14、均值差值12345678910111213141516171819202122232425262728293031323334353637383940數(shù)據(jù)處理（1）以五對工作散點圖，同時作一條通過原點，斜率為1的直線。（2）以（五-痰）對（%"+4）/2做偏倚圖，此圖的水平中心線為零。（3）以（Yj -又）對（%+Xi ） /2做偏倚圖。通過散點圖觀察X （比較方法）和Y （實驗方法）是否呈線性關(guān)系。（4）相關(guān)系數(shù)計算：利用所有樣本雙份測定值進(jìn)行相關(guān)系數(shù)計算，如果（或2力），則認(rèn)為X范圍適合，數(shù)據(jù)滿足要求。X的誤差可以由數(shù)據(jù)范圍給以適當(dāng) 補償，并且簡單的線性回歸可以用來評價斜率和截距

15、。（5）回歸計算：利所有樣本雙份測定的有效數(shù)據(jù)，計算兩個方法間的線性回 歸方程：Y=a+bXo（6）偏差估計：在醫(yī)學(xué)決定水平，利用回歸方程計算預(yù)期偏差，預(yù)期偏差Bx=a+（b-l）X ,相對偏差二Bx/X。實驗結(jié)論：根據(jù)試劑設(shè)計要求，預(yù)期偏差、相對偏差均在規(guī)定的可接受范圍之內(nèi)。精密度評估資料實驗要求（1）操作者必須熟悉方法和/或儀器工作原理，了解并掌握儀器的操作步驟 和各項注意事項，能在評估階段維持儀器的可靠和穩(wěn)定。（2）用于評估試驗的樣品一般常采用臨床實驗室收集的穩(wěn)定和冷凍貯存的 血清（漿）庫；當(dāng)實驗室收集的樣品不穩(wěn)定或不易得到時，也可考慮使用穩(wěn)定 的、以蛋白質(zhì)為基質(zhì)的商品物質(zhì)，如校準(zhǔn)品或質(zhì)

16、控品。（3）評估精密度時，應(yīng)至少評估二個濃度水平樣本的精密度。當(dāng)二個濃度的 精密度有顯著差異時，可增加為三個濃度。所選樣本濃度應(yīng)在測量范圍內(nèi)有醫(yī)學(xué) 意義，即至少有一個濃度在醫(yī)學(xué)決定水平左右。再根據(jù)檢驗項目的性質(zhì)在線性區(qū) 間內(nèi)選擇另一個值。實驗材料和方法由同一個或一組操作者在同一臺儀器上進(jìn)行，使用相同的校準(zhǔn)品、相同種類和批 號的試劑。每天做2個批次的測試，每批測試時，對同一樣品作雙份測量，共做20 天。評估結(jié)束時共有40對，即80個測試結(jié)果。從40批次測量中雙份結(jié)果的差值求 出批內(nèi)精密度。從所有80個數(shù)據(jù)計算出批間精密度。實驗結(jié)果 試劑批號1：表1：精密度實驗原始數(shù)據(jù)記錄序號日期批次1批次2結(jié)果

17、1結(jié)果2均值結(jié)果1結(jié)果2均值1234567891011121314151617181920批內(nèi)精密度：表2：批內(nèi)精密度實驗原始數(shù)據(jù)計算測定日批次1批次2土里土里、2（結(jié)果1-箝米1）-< “口一口 刁、L1-21234567891011121314151617181920求和Si2)*0利用表2中的結(jié)果可計算出批內(nèi)精密度 Sr：Sr V 41式中I =檢驗日數(shù)表3：批間精密度實驗原始數(shù)據(jù)記錄序號日期第一批第二批結(jié)果1（均值結(jié)果1）2結(jié)果2（均值結(jié)果2）結(jié)果1（均值-結(jié)果1）:結(jié)果2（均值結(jié)果2）:123456789101112批間精密度Srr ：1314151617181920合計(1)

18、(5)(2)(6)(3)(7)(4)(8)求出均值，公式為：X ZX/n從上表 3 中得出：(1) (2) (3) (4)/n求出批間精密度，公式為：Srr (均值結(jié)果1)2(均值等果2)2 /( n 1)從上表3中得出Srr V(5) (7) (6) (8)/(n 1)式中n =檢驗總數(shù)批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間:批內(nèi)變異系數(shù)：批間標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間:批間變異系數(shù)：試劑批號2：表1：精密度實驗原始數(shù)據(jù)記錄序號日期批次1批次2結(jié)果1結(jié)果2均值結(jié)果1結(jié)果2均值1234567891011121314151617181920批內(nèi)精密度：表2：批內(nèi)精密度實驗原始數(shù)據(jù)計算測定日批次1批次2（結(jié)里

19、 結(jié)果 ）2片果1 結(jié)果2廠1-21234567891011121314151617181920求和2)利用表2中的結(jié)果可計算出批內(nèi)精密度 Sr：式中I =檢驗日數(shù)序號日期第一批第二批結(jié)果1（均值結(jié)果1）2結(jié)果2（均值結(jié)果2）結(jié)果1（均值-結(jié)果1）:結(jié)果2（均值結(jié)果2）:1234567891011121314151617181920合計(1)(5)(2)(6)(3)(7)(4)(8)批間精密度Srr ：求出均值，公式為：X ZX/n從上表 3 中得出：(1) (2) (3) (4)/n求出批間精密度，公式為：Srr (均值結(jié)果1)2(均值等果2)2 /( n 1)從上表3中得出Srr V(5)

20、 (7) (6) (8)/(n 1)式中n =檢驗總數(shù)批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間：批內(nèi)變異系數(shù)：批間標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間：批間變異系數(shù)：試劑批號3：表1：精密度實驗原始數(shù)據(jù)記錄序號日期批次1批次2結(jié)果1結(jié)果2均值結(jié)果1結(jié)果2均值1234567891011121314151617181920批內(nèi)精密度: 表2：批內(nèi)精密度實驗原始數(shù)據(jù)計算測定日批次1批次2（結(jié)果 結(jié)里 ）2（如果1 - 如果2）1-21234567891011121314151617181920求和2)*0利用表2中的結(jié)果可計算出批內(nèi)精密度 Sr：I17S,/ 41式中I二檢驗日數(shù)表3：批間精密度實驗原始數(shù)據(jù)記錄序號日期第一

21、批第二批結(jié)果1（均值結(jié)果1）2結(jié)果2（均值結(jié)果2）結(jié)果1（均值-結(jié)果1）:結(jié)果2（均值結(jié)果2）:1234567891011121314151617181920合計(1)(5)(2)(6)(3)(7)(4)(8)批間精密度Srr ：求出均值，公式為：X ZX/n從上表 3 中得出：(1) (2) (3) (4)/n求出批間精密度，公式為：Srr (均值結(jié)果1)2(均值等果2)2 /( n 1)從上表3中得出Srr V(5) (7) (6) (8)/(n 1)式中n =檢驗總數(shù)批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間：批內(nèi)變異系數(shù)：批間標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間：批間變異系數(shù)：實驗結(jié)論：三批膽固醇測定試劑在*分

22、析儀器上測定的批內(nèi)和批間精密度均符合設(shè)計要求。干擾實驗評估資料對被評估試劑設(shè)計兩種實驗方法進(jìn)行抗干擾性能評估，即“干擾篩查”和“利 用患者標(biāo)本作偏移分析”的方法。(1)干擾篩查評價很多可疑干擾物質(zhì)在相對較高濃度下所產(chǎn)生的干擾，稱為“干擾篩查”。將可疑干擾物質(zhì)加入基礎(chǔ)樣本池,計算實驗樣本相對于對照樣本測量結(jié)果所產(chǎn)生偏倚，稱為“配對差異檢驗” O如果可以觀察到臨床顯著性影響，可以認(rèn)為此種 物質(zhì)為干擾物質(zhì)，需要進(jìn)一步評估干擾物質(zhì)濃度與干擾程度的關(guān)系。(2)利用患者標(biāo)本作偏移分析干擾篩查存在著明顯的局限性，不管篩查實驗如何廣泛，在病人標(biāo)本中都可 能遇到未考慮到的干擾，所以分析相關(guān)病人群體的標(biāo)本，評價標(biāo)

23、本間內(nèi)在的變異 性，可以減少這種情況發(fā)生。采用參考方法或具有低干擾性和高特異性的比較方法，以確定在比較研究中的“真值”。如果某個標(biāo)本中出現(xiàn)一個可重復(fù)的“離群 值”，則說明該標(biāo)本中存在潛在的干擾物質(zhì)。病人標(biāo)本的測量結(jié)果也可用于證實干擾現(xiàn) 象。配對差異檢驗實驗要求評估g/L血紅蛋白和 mg/dl膽紅素對本試劑的干擾。測試組和對照組都以相同方式進(jìn)行檢測，為避免偶然誤差，進(jìn)行多次重復(fù)測 定，且在一個分析批內(nèi)完成。每個標(biāo)本的重測次數(shù)依賴于三個因素：有臨床意義 的最小偏移、批內(nèi)精密度和統(tǒng)計學(xué)要求的檢驗水準(zhǔn)。實驗材料和方法(1 )基礎(chǔ)樣本：選取兩個膽固醇濃度，5mmol/L和12mmol/L的新鮮血清(無溶

24、血、黃疸)，各重復(fù)測試10次，計算各濃度的均值廠方1標(biāo)準(zhǔn)差s；確定兩濃度水平的最大允許干擾值dmax,根據(jù)下表查出各濃度95%置信限時檢測不同的干擾效應(yīng)所需的重復(fù)次數(shù)。d.nax/S與重測次數(shù)對應(yīng)表d /smax重測次數(shù)d /smax重測次數(shù)41122610228187165143(2)測試樣本和對照樣本：(3)按交互順序檢測測試樣本和對照樣本。實驗結(jié)果測定次數(shù)Hb干擾評價低濃度樣本對照高濃度樣本對照12345n測定次數(shù)膽紅素干擾評價低濃度樣本對照高濃度樣本對照12345n均值配對差異實驗結(jié)果干擾物L(fēng)樣本L樣本dobsdcdobsdcHb膽紅素均值均值obs testcontrolI(X X

25、)t ”dobc 的 95% 可信區(qū)間 test control 0.975, n 1 "d sZdc 4二 ,dnul. = 0 (無效假設(shè)規(guī)定的值)結(jié)果解釋和結(jié)論：如果dobsWdc,說明干擾物引起的偏移小于d當(dāng)dobs小于或等于de時，不拒絕無效假設(shè)，認(rèn)為檢測物質(zhì)不是干擾物質(zhì)；1 dobs大于de時，拒絕無效假設(shè)，認(rèn)為檢測物質(zhì)是干擾物質(zhì)。95%當(dāng)95%可信區(qū)間的下限小于或等于d,nax,認(rèn)為檢測物質(zhì)不是干擾物質(zhì)；當(dāng) 可信區(qū)間的下限大于d.nax,可認(rèn)為檢測物質(zhì)是干擾物質(zhì)。結(jié)論:劑量效應(yīng)實驗如果在一個或多個分析物質(zhì)濃度發(fā)現(xiàn)干擾，則可進(jìn)行劑量效應(yīng)實驗以確定干 擾物質(zhì)濃度與干擾程度的

26、關(guān)系。實驗要求：制備5個系列濃度的干擾測試樣本,確定劑量效應(yīng)關(guān)系,每個濃度水平重測3次。評估g/L血紅蛋白和mg/dl膽紅素對本試劑干擾的劑量效應(yīng)。（1）可疑干擾物質(zhì)的最高濃度和最低濃度分別為: （2）根據(jù)配對差異實驗，確定有臨床意義的偏移，即:實驗材料和方法：（1）基礎(chǔ)樣本池同配對差異實驗；（2）干擾物儲存溶液；（3）高值樣本池：用基礎(chǔ)樣本池稀釋干擾物儲存溶液以達(dá)到所需濃度;（4）低值樣本池：其干擾物質(zhì)濃度接近臨床標(biāo)本的平均濃度；（5）按下圖制備中值樣本池、25%濃度樣本池和75%濃度樣本池：（6）在同一批測定中分析所有標(biāo)本，先按濃度升高順序測定標(biāo)本，再按降低順序測定標(biāo)本，再按升高順序測定標(biāo)

27、本;實驗結(jié)果5個系列濃度干擾劑量效應(yīng)實驗結(jié)果序號干擾物濃度；干擾效應(yīng)第1次第2次第3次12345以干擾物質(zhì)濃度為X軸，觀察效果為Y軸，繪制劑量反應(yīng)圖，檢查圖的形狀。結(jié)果解釋和結(jié)論：當(dāng)數(shù)據(jù)呈線性分布時，可應(yīng)用線性最小二乘法回歸分析，計算斜率、截距及剩 余標(biāo)準(zhǔn)差（Sy.x）。在圖上畫出回歸線，可證實它適合此數(shù)據(jù)并且此效應(yīng)為線性。 當(dāng)數(shù)據(jù)呈非線性分布時，任一干擾物質(zhì)濃度下的干擾程度可通過圖直接得到，還可 利用非線性回歸分析的二次多項式模型計算得出。當(dāng)數(shù)據(jù)呈線性分布時，回歸線的斜率代表每單位干擾物產(chǎn)生的偏倚，Y軸的截距代表內(nèi)源性干擾物質(zhì)的濃度。可通過回歸方程式或劑量反應(yīng)圖，估計任一干擾物質(zhì) 濃度下的干

28、擾程度，而不管線性或是非線性關(guān)系。結(jié)論:以病人標(biāo)本評價干擾效果實驗用被評價的實驗方法與比較方法共同分析兩組病人標(biāo)本（實驗組及對照組），從 中尋找不準(zhǔn)確的結(jié)果，以確定是否有干擾及干擾程度。本實驗提供了一種在患者實際樣 本中證實干擾存在的方法。實驗要求（1）實驗標(biāo)本的選擇原則：來自具有相關(guān)疾病的病人標(biāo)本；服用相關(guān)藥物的 病人標(biāo)本；尿毒癥患者的標(biāo)本；具有其他成分的標(biāo)本等。（2）對照標(biāo)本的選擇原則：未服用相關(guān)藥物的病人標(biāo)本；具有可疑干擾物質(zhì) 正常濃度的標(biāo)本；具有相同或相似診斷的病人標(biāo)本；分析物濃度分布與實驗標(biāo)本 相似的標(biāo)本等。（3）比較方法的選擇原則：用對干擾物有低敏感性，具有良好特異性的比較 方法來

29、確定“無干擾”值。實驗材料和方法（1）根據(jù)實驗要求選擇實驗標(biāo)本、對照標(biāo)本，和比較方法；（2）在盡可能短的時間里（通常2小時），使用兩種方法分析每一個標(biāo)本3 次，實驗及對照組的標(biāo)本數(shù)一般都是1020個。（3）若觀察到偏倚，則測量藥物或其他可疑的干擾物質(zhì)的濃度，應(yīng)根據(jù)劑量 效應(yīng)實驗”建立偏倚與干擾物質(zhì)濃度的關(guān)系。實驗結(jié)果實驗標(biāo)本測定結(jié)果樣本實驗方法比較方法XI X2測定1測定2測定3XI測定1測定2測定3X2號1234567891011121314151617181920對照標(biāo)本測定結(jié)果樣本號實驗方法比較方法X3 X4測定1測定2測定3X3測幾: 1測定2測定3X4123結(jié)果比較，評價它們之間是否

30、存在系統(tǒng)偏倚，如果存在系統(tǒng)偏倚，計算實驗組偏 倚的上限與對照組的平均偏倚的差值，此值與干擾標(biāo)準(zhǔn)相比較，以評價是否存在 有臨床意義的干擾。如果可以測量干擾物質(zhì)的濃度，繪制偏倚相對于可疑干擾物質(zhì)濃度圖，以觀 察可疑干擾物質(zhì)的濃度是否與偏倚相關(guān)。結(jié)論:穩(wěn)定性評估資料實驗要求實驗操作人員應(yīng)熟練檢測儀器系統(tǒng)。應(yīng)采用與評價試劑配套的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。穩(wěn)定性評價所采用的試劑應(yīng)是有效期范圍之內(nèi)的同批號試劑。采用經(jīng)準(zhǔn)確度、精密度和線性實驗合格的新配制試劑和穩(wěn)定期末的試劑，在 同次實驗中評估兩個在醫(yī)學(xué)決定水平濃度范圍內(nèi)的樣本。實驗方法對兩個水平的質(zhì)控樣本或新鮮人血清樣本，用兩種不同穩(wěn)定期的試劑在*分析 儀器上同次測

31、定6遍，檢驗兩組平均值之間的一致性；同時測定試劑的空白吸光度值 和試劑空白值。記錄結(jié)果并進(jìn)行計算和判斷。實驗結(jié)果試劑批號1:穩(wěn)定性評價數(shù)據(jù)記錄表試劑盒名稱：樣本名稱：試劑盒批號：樣本批號：實驗項目：樣本采集日期：儀器：試劑保存溫度：試劑廠家：校準(zhǔn)品：校準(zhǔn)品批號：操作者：審核者：測定日期：新配制的工作液穩(wěn)定期末的工作液樣本1樣本2樣本1樣本2測定1測定2測定3測定4測定5測定6均值空白吸光度空白測定值試劑批號2：穩(wěn)定性評價數(shù)據(jù)記錄表試劑盒名稱：樣本名稱：試劑盒批號：樣本批號：實驗項目：樣本采集日期：儀器：試劑保存溫度：試劑廠家：校準(zhǔn)品：校準(zhǔn)品批號：操作者：審核者：測定日期：新配制的工作液穩(wěn)定期末

32、的工作液樣本1樣本2樣本1樣本2測定1測定2測定3測定4測定5測定6均值空白吸光度空白測定值試劑批號3：穩(wěn)定性評價數(shù)據(jù)記錄表試劑盒名稱：樣本名稱：試劑盒批號：樣本批號：實驗項目：樣本采集日期：儀器：試劑保存溫度：試劑廠家：校準(zhǔn)品：校準(zhǔn)品批號：操作者：審核者：測定日期：新配制的工作液穩(wěn)定期末的工作液樣本1樣本2樣本1樣本2測定1測定2測定3測定4測定5測定6均值空白吸光度空白測定值結(jié)果計算和判斷:（1）兩組平均值之間的一致性（t檢驗法）按下式計算t值：加 l）s/ （112 1）S2、ni 112ni n2 2 ni n2式中：XI新配制試劑工作液測量數(shù)據(jù)的平均值X2穩(wěn)定期末試劑工作液測量數(shù)據(jù)的

33、平均值S1新配制試劑工作液測量數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差S2穩(wěn)定期末試劑工作液測量數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差m新配制試劑工作液測量次數(shù)n2穩(wěn)定期末試劑工作液測量次數(shù)注：為了保證平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差的準(zhǔn)確度， ni和0均，6若tV顯著性水平& （通常a =）,自由度為ni + n2-2的臨界值t（ni n 2 2）, 則兩個平均值之間無顯著性差異。（2）試劑空白吸光度和空白測定值：三批被檢試劑的工作液在穩(wěn)定期末均達(dá)到說明書規(guī)定的指標(biāo)。實驗結(jié)論三批被檢試劑的穩(wěn)定性檢測均達(dá)到設(shè)計要求。參考值（參考區(qū)間）評估資料根據(jù)體外診斷試劑分析性能評估系列指導(dǎo)原則（征求意見稿）的要求，對 已有的分析物質(zhì)或分析方法可采用參考值（參考區(qū)間）轉(zhuǎn)移。有三種方法可用于參考值（參考區(qū)間）轉(zhuǎn)移可接收性的評價。（1）參考值（參考區(qū)間）轉(zhuǎn)移可接收性可以通過對首次適宜參考值研究的相關(guān)要素的檢查來進(jìn)行評估，包