1、關于毒扁豆堿對老年癡呆大鼠的空間記憶能力的影響    【摘要】  目的：探討毒扁豆堿對老年癡呆大鼠的空間記憶能力的影響，為老年癡呆病人的臨床治療提供新的治療思路。方法：健康成年雄性大鼠48只，隨機分為癡呆組、毒扁豆堿對照組、毒扁豆堿治療組、空白對照組。運用大鼠穹窿海馬切斷術建立癡呆模型，術后第8天開始腹腔注射毒扁豆堿，連續1周，然后各組進行Morris水迷宮測試。結果：空間探索實驗結果顯示，大鼠各象限游泳距離占總距離百分率和跨越各象限平臺相應位置次數占總次數百分率，毒扁豆堿治療組均有明顯提高()。定位航行實驗提示毒扁豆堿處理后的癡呆大

2、鼠尋找水下平臺時間明顯縮短。結論：癡呆大鼠經過毒扁豆堿治療后，空間記憶能力出現明顯好轉，提示毒扁豆堿對癡呆大鼠具有一定的改善作用。 Nature is the glass reflecting truth.  【關鍵詞】  毒扁豆堿; 老年癡呆; 大鼠; Morris水迷宮隨著全世界步入老齡化社會，老年癡呆的發病率目前呈現進行性遞增的趨勢。由于此病影響患者的認知功能、記憶功能、語言功能、視空間功能、社會生活能力、個人生活自理能力和情感人格等，給家庭和社會帶來很大負擔。因此，WHO已將老年癡呆癥定為21世紀5大重點疾病之一1。

3、尋找治療老年癡呆癥的有效藥物，成為世界醫學界的研究熱點之一。研究指出2，在老年癡呆的早期，膽堿功能缺乏的癥狀早于其它任何癥狀，AD特征之一的神經元凋亡也主要發生在膽堿神經元(醫藥學/臨床醫學論文 )。從治療角度看，美國FDA批準上市治療AD的藥物均為膽堿酯酶抑制劑3，因而研究和開發新的具有更好療效的膽堿酯酶抑制劑是當前治療和預防老年癡呆的有效手段。毒扁豆堿是從非洲的毒扁豆種子中提出的生物堿，是一種可逆性膽酯酶抑制劑，但有關毒扁豆堿對老年癡呆大鼠的空間記憶能力的研究卻鮮有報道，本實驗擬對此展開研究。1 材料和方法1.1 動物及分組選用成年雄性SD大鼠200220g(購至武漢大

4、學實驗動物中心)。動物隨機分為4組：老年癡呆組、毒扁豆堿組、毒扁豆堿治療組以及空白對照組。The best of friends must part.  1.2 試劑論文分為專題型、論辯型、綜述型和綜合型四大類  毒扁豆堿購置美國sigma公司。Manners make the man.  1.3 模型制備Politeness costs nothing and gains everything.  實驗動物無巴比妥鈉(40 mg/kg)常規麻醉，大鼠立體定位儀定位，無菌操作下沿顱頂中線作長2 cm切口。于前囟后2

5、.0 mm，中線右側旁0.5 mm處用牙科鉆打開右側顱骨，仔細剝開硬腦膜暴露大腦皮質， 按照大鼠腦立體定位圖譜4，用特制的寬2 mm刀片于前囟后2 mm， 中線右側1 mm處置刀于腦表面，然后降刀4.1 mm，并向外向內各移動1和0.5 mm。最后再降刀 1 mm外移 1.5 mm， 此時上下抽動刀片15次， 依次切斷(單側) 扣帶回、 胼胝體干、背側穹窿海馬傘，制作AD動物模型, 于術后第 8天開始腹腔注

6、射注射毒扁豆堿 100 ug/kg，每天3次，連續 給藥 3 d后進行Morris水迷宮行為訓練。One ploughs, another sow; who will reap  1.4 Morris 水迷宮行為能力測試定位航行實驗 水池分為 I、II 、III 、IV4個象限。在第3象限放置平臺，浸潤在水下約1cm高度。實驗前 1 d 將大鼠放入水池( 不含平臺) 自由游泳2 min熟悉水迷宮環境，試驗歷時5

7、60;d ，每天分上午，下午兩個時間段，每段分別訓練4次，每個時間段分別從池壁4個起始點將大鼠面向池壁放入水池， 記錄每次找到平臺的時間 (逃避潛伏期，escape latency )和游泳路徑。如大鼠在120 s 內找不到平臺，由實驗者將其引上平臺，潛伏期記為120 s，每次間隔4 min讓大鼠休息，再行下次試驗。Good counsel never comes too late.  1.5 空間探索實驗  在第 5天下午第 5次訓練時拆除水下平臺，&#

8、160;然后任選一個入水點將大 鼠面向池壁放入水中， 測其120 s內在各象限的游泳距離及占總距離的百分率和120s內跨越各象限平臺相應位置次數及占總次數的百分率，并記錄大鼠120s 內搜索平臺的路線圖。1.6 統計學分析采用SPSS13.0 進行兩兩比較及t檢驗。2 結果論文包括學年論文、畢業論文、學位論文、科技論文、成果論文等.  2.1 大鼠行為能力Early mistakes are the seeds of future trouble.  各組大鼠在Morris水迷宮中定向航行試驗結

9、果見圖1，空白對照組和毒扁豆堿陰性對照組的大鼠平均逃避潛伏期逐漸縮短，而癡呆組的大鼠則喪失學習記憶能力，平均逃避潛伏期無改變。而給予毒扁豆堿的癡呆大鼠，平均逃避潛伏期時間明顯縮短(P<0.05)。說明經過毒扁豆堿治療的癡呆大鼠，空間記憶學習能力明顯提高。圖1 各組大鼠尋找平臺潛伏期對比2.2 空間探索試驗拆去水下平臺后，以原站臺象限(III象限)的活動時間和穿梭次數為指標，模型組在第3象限的活動時間顯著縮短，穿越站臺次數明顯降低。而給予毒扁豆堿治療的癡呆大鼠，則在第3象限的活動時間有明顯增加，穿越站臺次數也有顯著的增加，說明毒扁豆堿可明顯改善癡呆大鼠的行為能力，見表1

10、。表1 各實驗組動物第3象限活動時間與穿越平臺次數論文包括學年論文、畢業論文、學位論文、科技論文、成果論文等.  3 討論老年癡呆的患病率目前已升至威脅老年人生命的第3位。中樞尤其是海馬等與學習和記憶相關的區域中，神經遞質乙酰膽堿發現是參與學習，記憶功能重要的神經遞質。 研究發現：老年癡呆患者大腦內的乙酰膽堿的活性明顯降低，運用可透過血腦屏障的膽堿酯酶抑制劑可增加腦內乙酰膽堿的含量，增強突觸間的傳遞，改善患者的學習和記憶能力，因而尋找有效的膽堿酯酶抑制劑對老年癡呆的治療具有重要的研究價值5。毒扁豆堿可以抑制體內膽堿酯酶的活力，是一種副交感神經興奮劑，可顯

11、著增加大腦內部的乙酰膽堿水平，因而理論上可改善老年癡呆的癥狀，而本實驗的研究結果提示，毒扁豆堿可明顯的改善老年癡呆大鼠的空間記憶學習能力。研究指出，嗎啡能夠抑制大鼠對水迷宮任務的回憶;這種抑制作用可能與嗎啡抑制中樞膽堿能遞質系統功能有關,毒扁豆堿通過加強膽堿能遞質系統的活動,從而對抗嗎啡誘導而在嗎啡所致的記憶喪失，說明毒扁豆堿對學習和記憶的影響遠超過我們的想象。綜上所述，毒扁豆堿給予后可顯著的增加老年癡呆大鼠的空間學習能力和記憶能力，其機制可能是通過增加大腦中樞神經遞質乙酰膽堿的含量而得以實現的，但具體的機制如何，仍有待進一步的研究。【參考文獻】  1Musiai 

12、;A, Baida M, Malawska. Recent developments in eholinesterases inhibitors for Alzheimer's disease treatment. Current Medicinal Chemistry, 2007, 14: 26542679.2 Kalesnykas G，Puolivali J， Si

13、rvio J， et al. Cholinergic neurons in the basal forebrain of aged female mice. Brain Res, 2004, 1022.3 Jacobsel1 JS. Alzheimer's disease: an overview of current and emerging therapeutic strategies. Curt Top