1、植物細胞滲透勢的測定一、實驗目的1、觀察植物組織在不同濃度溶液中細胞質壁分離的產生過程。2、掌握測定植物組織滲透勢勢的方法。二、實驗原理（一）、滲透勢是水勢的組分之一，是指由于細胞內溶質顆粒的存在而使水勢下降的數值，純水的滲透勢為零，溶液的滲透勢為負值。植物細胞的滲透勢是植物的一個重要生理指標，對于植物的水分代謝、生長及抗性都具有重要的意義。常用于測定植物細胞與組織水勢的方法有質壁分離法、冰點降低法、蒸汽壓降低法等。成熟植物細胞水勢的組成：W=Ws+Wp1.3籀質勢/滲透勢由于溶液中溶質顆粒的存在而使水勢降低的值。純水的溶質勢為0,溶液的滲透勢可根據Van'tHoffEquation計

2、算：¥s=-RTiC2.。p壓力勢壓力勢是指外界（如細胞壁）對細胞的壓力而使水勢增大的值。一般情況下細胞處于膨脹狀態，原生質體壓迫細胞壁產生膨壓，而細胞壁反過來反作用于原生質體使產生壓力勢。當發生質壁分離時，p=0,這時里=Ws（二）、質壁分離法實驗原理：生活細胞的原生質膜是一種選擇透性膜，可以看作是半透膜，它對于水是全透性的，而對于一些溶質如蔗糖的透性較低。因此當把植物組織放在一定濃度的外液中，組織內外的水分便可通過原生質膜根據水勢梯度的方向而發生水分的遷移，當外液濃度較高時（高滲溶液），細胞內的水分便向外滲出，引起質壁分離；而在外液濃度低時（低滲溶液），外液中的水則進入細胞內。當

3、細胞在一定濃度的外液中剛剛發生質壁分離時（初始質壁分離,質壁分離僅在細胞角隅處發生），細胞的壓力勢等于零，細胞的滲透勢等于細胞的水勢，也就等于外液的滲透勢。該溶液即稱為細胞或組織的等滲溶液，其濃度稱為等滲濃度。三、實驗器材及試劑1、實驗儀器：顯微鏡，載玻片及蓋玻片，鐐子，刀片2、實驗試劑：1mol/L蔗糖溶液：配成0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60mol/L的蔗糖溶液各2ml3、實驗材料：洋蔥鱗莖四、實驗步驟1、分別配制0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60mol/L的蔗糖溶液各2ml于稱量

4、瓶中，混勻,編號。2、用鐐子撕取帶有色素的洋蔥鱗莖表皮，分別放入不同濃度蔗糖溶液中(4-5片/瓶)，使其完全浸沒，約15min。3、自高濃度依次取出洋蔥表皮放在載玻片上，加一滴原容易，加蓋玻片，于低倍顯微鏡下觀察。4、統計50個細胞，如果有50%發生質壁分離，就認為從此濃度發生質壁分離。5、 確定一個引起半數以上細胞原生質剛剛從細胞壁角隅上分離的濃度和不引起質壁分離的最高濃度，洋蔥鱗莖細胞發生質壁分離的等滲濃度即為兩極限濃度的平均值。6、記錄結果并將結果代入公式；-小fRTiCI式中：-3S為細胞滲透勢；R為氣體常數=0.083X05L.Pa/mol.K;T為熱力學溫度，單位K；即273+t，

5、t為實驗溫度，單位是；i為解離系數，蔗糖為1；C1為等滲溶液的質量摩爾濃度，單位是mol/kg。C1=C2X1000/(1000Xp-MBC2)注意C1與C2的轉換。五、實驗結果通過本次實驗，最后確定在視野中剛剛找到一半的細胞原生質從細胞壁的角隅處上分離的濃度為：0.50mol/l。對其濃度進行修正為：質量摩爾濃度(mol/kg)C1=C2<1000/(1000X廠MBC2)=(0.475x1000)/(1000x1.0653342.3x0.475)=0.526mol/kg所以，洋蔥莖下表皮的細胞質液的滲透勢為：¥s=-RtiC=0.083X1X0.526X(273+20)X105=1.28MPa六、實驗結果分析1、本次實驗中，由于撕下的洋蔥下表皮普遍較厚，通常是由幾層疊在一起的，這在一定程度上影響了在顯微鏡下的觀察，特別是確定大約一半的細胞發生了質壁分離，并很難確定發生質壁分離的程度。2、在撕下的洋蔥下表皮帶有色素的細胞較少，這在一定程度上對確定剛好發生質壁分離的濃度也有偏差。3、撕取楊蔥鱗莖表皮較后的原因也與撕取的速度有關，所以在撕取時因盡量迅速，且由于浸入溶液的先后不同，導致時間有所差異。七、實驗注意事項1 蔗糖溶液一定要混合均勻；2 表皮組織必須完全浸沒