1、安腦平沖湯對腦出血大鼠胃泌素生長抑素表達的影響    安腦平沖湯對腦出血大鼠胃泌素、生長抑素表達的影響周德生【sup】1【/sup】，朱婷【sup】1【/sup】，張熙【sup】2【/sup】，胡華【sup】1【/sup】，高曉峰【sup】1【/sup】，陳暉【sup】1【/sup】（1.湖南中醫藥大學第一附屬醫院神經內科，湖南 長沙 410007；2.湖南中醫藥大學病理教研室，湖南 長沙 410007）摘 要：目的：通過觀察安腦平沖湯對大鼠腦出血后血清中胃泌素（gastrin）和生長抑素（Somatostatin）表達的影響，探討安腦平沖湯對腦出血后引

2、發急性胃粘膜病變的防治作用。方法：將120只SD大鼠隨機分為假手術組、模型組、安腦平沖湯組、雷尼替丁組。模型組、安腦平沖湯組、雷尼替丁組組內又分為24h、48h、3天、5天、7天共5個時間點，在腦立體定位儀下采用型膠原酶制備大鼠腦出血模型，觀察大鼠腦出血后胃粘膜的病理變化，Elisa法檢測血清中GAS、SS的表達。結果：與模型組比較，安腦平沖湯組和雷尼替丁組胃粘膜損傷程度降低（P0.05）；安腦平沖湯組、雷尼替丁組胃泌素水平較模型組均有明顯下降（P0.05）；安腦平沖湯組生長抑素水平較模型組和雷尼替丁組均有明顯升高（P0.05）。結論：安腦平沖湯可能通過抑制胃泌素的表達，促進生長抑素的表達而發

3、揮減輕腦出血后急性胃粘膜損傷的作用。關鍵詞：腦出血；安腦平沖湯；急性胃粘膜病變；GASSS中圖分類號：R285 文獻標識碼：A 文章編號：1673-7717（2011）04-0795-04Abstract:Objective:To study the effect of Annaopingchong Decoction on the expression of serum gastrin and somatostatin in intracerebral hemorrhage rat, To discussion preventive and therapeutic effects on An

4、naopingchong Decoction treatment acute gastric mucosal lesion in intracerebral hemorrhage rat.Method: 120 SD rats were randomly divided into 4 group:Sham-operated group，Model group, Treatment group with Annaopingchong Decoction, Ranitidine group. They were prepared at 24h, 48h, 3d, 5d and 7d, respec

5、tively after operation, The models were established by injecting collagenase type stereotaxicall. the pathological changes of gastric mucosal were observed on Intracerebral hemorrhage in rats, The expression of Serum GAS, SS were analyzed by Elisa.Results:Compared with model group,The degree of gast

6、ric mucosal injury was lower in Treatment group with Annaopingchong Decoction and Ranitidine group （P0.05） Compared with model group, The level of Gastrin was decreased in Annaopingchong Decoction group and Ranitidine group （P0.05）Compared with model group and Ranitidine group, The level of Somatost

7、atin in Annaopingchong Decoction group was increased（P0.05）.Conclusion:Annaopingchong Decoction can affect the expression of gastrin and somatostatin, Reduce the acute gastric mucosal injury after cerebral hemorrhage.Key words:Cerebral Hemorrhage Annaopingchong Decoction Acute gastric mucosal lesion

8、 Gastrin Somatostatin急性胃黏膜病變是急性腦卒中的一個嚴重并發癥，常與腦卒中的嚴重程度有關，腦卒中病情越危重，急性胃黏膜損傷出血發病率就越高，程度也越重，在臨床處理上有一定困難，合并有消化道出血的患者預后亦差，病死率可達半數以上。胃黏膜攻擊因子和保護因子失衡是急性胃黏膜病變發病的重要機制，許多臨床研究表明在急性腦出血時生長抑素和胃泌素的表達與急性胃黏膜損傷有關。因此探討腦出血后急性胃黏膜損傷的防治措施在臨床上有重要意義。1 材料與方法1.1 動物清潔級健康Sprague Dawley（SD）雄性大鼠，體重（200±20g），共120只。湖南中醫藥大學實驗動物中心提

9、供。每籠6只，大鼠飼養環境保持通風、恒溫、安靜，定期更換墊料，消毒籠具。1.2 藥物與試劑安腦平沖湯（生龍骨30g，生牡蠣30g，懷牛膝15g，黑梔子12g，生大黃9g，黃芩12g，鉤藤12g，青木香12g，澤瀉12g，蟬蛻6g，柴胡6g，甘草6g），均購自湖南中醫藥大學附屬一醫院藥劑科。水煎煮后濃縮成1.1g/mL，貯于冰箱備用。鹽酸雷尼替丁膠囊：規格0.15 g粒，由福建古田藥業有限公司提供（批號：081202）。以生理鹽水配制成混懸液（0.5 mgmL）。型膠原酶（北京中杉金橋生物技術公司），大鼠血清胃泌素、生長抑素ELISA試劑盒（美國R&Dsystems Estradiol

10、Elisa測定試劑盒）無水乙醇（安徽安特生物化學有限公司），蘇木精伊紅染色液（上海化學試劑站）。1.3 儀器腦立體定位儀（淮北正華生物公司）,微量進樣器（上海安亭微量進樣器廠）,多管架自動平衡離心機（上海天創儀器制造公司）,LEICA DM LB【sub】2【/sub】型雙目顯微鏡（德國LEICA公司產）,石蠟切片機（英國Shandon公司產）,Motic B【sub】5 【/sub】顯微攝像系統（麥克奧迪實業集團公司）,Thermo Multiskan Spectrum spectrophotometer酶標儀。1.4 方法胃組織損傷評分方法：對每張切片隨機選取5個視野，每個視野按病變嚴重程

11、度分級：0正常，1上皮細胞損傷和腺體破壞，2黏膜的出血性損傷和不超過黏膜下層的壞死，3超過黏膜下層的壞死和潰瘍。5個視野得分累計為其組織學損傷積分【sup】4【/sup】。2 結 果2.1 神經功能缺損評分造模后假手術組未見神經功能缺損癥狀，模型組、安腦平沖湯組、雷尼替丁組大鼠均見不同程度的神經功能缺損癥狀，各組間神經功能缺損評分比較無顯著性差異（P0.05）見表1。表1 腦出血大鼠造模后神經功能缺損評分表注：與模型組相比，#P0.05；與安腦平沖湯組相比，P0.05。2.2 大體標本觀察2.3 腦出血大鼠胃組織病理組織學觀察HE染色顯示假手術組未見胃組織損傷表現見圖1；模型組黏膜上皮壞死脫落

12、，腺體破壞，潰瘍形成見圖2；安腦平沖湯組部分腺上皮細胞輕度水腫，腺體排列欠整齊見圖3；雷尼替丁組胃黏膜上皮細胞灶性壞死伴腺上皮細胞水腫見圖4。2.4 腦出血大鼠胃組織損傷評分情況在24h時間點，模型組、安腦平沖湯組、雷尼替丁組均可見組織損傷，但損傷評分無顯著性差異（P0.05）；在其余各個時間點，安腦平沖湯組與模型組相比，雷尼替丁組與模型組相比，損傷評分有所下降，差異有顯著性意義（P0.05）見表2。2.5 腦出血大鼠血清中GAS的表達假手術組胃泌素無明顯變化，模型組胃泌素含量明顯升高，以72h為高峰，有顯著性差異（P0.05），24h時間點，雷尼替丁組、安腦平沖湯組GAS水平與模型組相比均有

13、所下降，雷尼替丁組與模型組差異有顯著性意義（P0.05），安腦平沖湯與模型組差異無顯著性意義（P0.05）；其余各時間點安腦平沖湯組、雷尼替丁組與模型組相比，胃泌素含量下降顯著，差異有顯著性意義（P0.05）見表3。2.6 腦出血大鼠血清中SS的表達在48h、72h、5天、7天各個時間點安腦平沖湯與模型組、雷尼替丁組相比，生長抑素水平均有所升高，差異有顯著性意義（P0.05）；雷尼替丁組與模型組相比，差異無顯著性意義（P0.05）；雷尼替丁組與安腦平沖湯相比，差異有顯著性意義（P0.05）見表4。3 討 論現代醫學認為SS對胃腸道消化吸收及其他內分泌細胞起普遍性抑制作用。具有抑制胃酸、胃蛋白酶

14、和胃泌素的分泌，刺激黏膜分泌，黏膜細胞蛋白質合成，抑制肥大細胞脫顆粒，保護胃黏膜屏障的作用【sup】5【/sup】，并有助于胃腸道黏膜微循環改善及黏膜修復【sup】6【/sup】；GAS有刺激胃酸分泌，促進胃腸黏膜增生，促使胃蛋白促胰液素、胰液、膽汁中水和鹽等分泌的作用【sup】7【/sup】。腦出血后下丘腦或垂體的直接或間接損壞，導致機體交感神經興奮，兒茶酚胺水平增高，消化道血管平滑肌收縮，胃壁血流量減少，刺激胃壁G細胞分泌胃泌素，胃酸分泌增高，H【sup】+【/sup】反彌散，最后導致胃黏膜的糜爛【sup】8【/sup】；加之機體處于應激狀態，內分泌改變，生長抑素對胃泌素調節發生紊亂【su

15、p】【/sup】9-10。因此腦出血并發急性胃黏膜病變較常見。表2 胃組織損傷評分注:與模型組相比,P0.05，#P0.05與安腦平沖湯組相比,P0.05。表3 腦出血大鼠胃泌素含量（ng/L）注:與假手術組相比, *P0.05與模型組相比,P0.05，#P0.05與安腦平沖湯組相比,P0.05。表4 腦出血大鼠生長抑素含量（g/L）注:與假手術組相比, *P0.05與模型組相比,P0.05，#P0.05與安腦平沖湯組相比,P0.05，P0.05。 腦出血中醫為出血中風，臟腑功能失調，氣血逆亂,是中風病基本病機，尤其與肝、脾、沖脈密切相關。腦出血后急性胃黏膜病變為中風后變癥，在中醫屬“胃脘痛”

16、、“吐血”、“嘔血”等范疇。葉天士臨證指南醫案云：“肝為起病之源，胃為傳病之所”，指出肝失疏泄，肝氣橫逆犯脾，肝胃不和，氣機紊亂則發病。故腦出血者并發急性胃黏膜病變的病因多為肝陽上亢，肝火橫逆，乘犯陽明燥金之地，絡破肉腐為瘍而發病。血證論云:“以沖脈麗于陽明。沖氣逆，則陽明之氣，隨逆故也。”沖氣上沖，胃腑之氣亦失其息息下行之常，或亦轉而上逆，而出現胃脘痛、嘔血等氣逆諸癥【sup】11【/sup】。安腦平沖湯功能鎮肝熄風、平沖降逆、寧血安腦。方中懷牛膝、生龍骨、生牡蠣潛降沖脈為君藥，生大黃通降陽明，黑梔子、澤瀉清利三焦，血海寧靜，神府得安，更佐以黃芩、蟬蛻、青木香清肅肺氣，鉤藤、柴胡清疏肝氣，甘

17、草調和陰陽，師氣機升降得復。另外，生龍骨、生牡蠣制酸護膜，生大黃、黑梔子、黃芩、青木香清胃涼血止血，懷牛膝、生大黃、蟬蛻并能活血化瘀止血，早期灌胃對消化道黏膜屏障功能起積極保護作用。故能達到降逆制酸、止血、促進潰瘍愈合目的。本實驗結果顯示，安腦平沖湯組大鼠胃組織損傷評分較模型組減低，血清GAS和SS的表達在48h、72h、5天、7天時間點與模型組相比，差異均有統計學意義，表明安腦平沖湯可以降低腦出血大鼠GAS的水平，促進SS的表達，對胃黏膜的損傷有一定的抑制作用，這一作用可能是通過下調GAS的表達和促進SS的表達兩個方面來實現的。本研究為安腦平沖湯臨床治療腦出血并發急性胃黏膜病變提供了理論依據

18、。參考文獻1 Rosenberg GB.Collgenose-induced intracerebral hemorrhage in ratJ.Stroke,1990,21:801.2 包新民,斯舒云.大鼠腦立體定位圖譜M.北京：人民衛生出版社,1991: 26-27.3 Bederson JB,Pitts LH,Tsuji M,et al.Rat middle cerebral artery occlusion:evaluation of the model and development of a neurologic examinationJ.Stroke,1986,17（3）:472-476.4 劉業成,齊志偉,馬遂，等.急性缺血性腦卒中時胃黏膜細胞凋亡和胃屏障損傷的關系J.中國醫學科學院學報,2008,3（2）:149-151.5 尹常高,李洪利,張偉棟.生長抑素及其受體與消化道疾病的研究J.醫學綜述,2006,12（24）:1485-1487.6