1、Qubit® 3.0熒光定量儀操作與維護規程一、目的使Qubit® 3.0熒光定量儀能夠正確和正常的使用，保證系統的正常運行的準確性和精密度，以獲得準確可靠的檢驗結果。二、適用范圍可用于定量的DNA,RNA, micro RNA和蛋白質,使用高度敏感和準確的熒光技術量子位定量分析三、工作原理Qubit®熒光定量儀采用熒光染料與特異性的靶分子結合。這些熒光染料只有與這些靶分子結合時才會發射熒光信號，即使在濃度很低時。Qubit®3.0熒光定量儀比傳統的紫外吸光法更加準確。以往的紫光吸光法不具選擇性，測量260nm所有分子的吸光值包含DNA，RNA，蛋白質，

2、游離核苷酸或多余的鹽離子。此外，紫外分光光度計的靈敏度不足，無法完成低濃度DNA和RNA的精確定量。使用Qubit®熒光定量儀，將大大提升準確性。因為Qubit®分析試劑盒里的熒光染料只與樣品中的特異分子結合DNA,RNA或蛋白，避免不準確測量帶來的重復工作四、職責實驗室負責該系統的日常維護保養，包括每周保養，以及需要時的保養工作。1.保證儀器設備在計量有效期內使用，并配合完成計量相關工作。2.負責儀器設備的正確使用、妥善保管和精心維護。3.負責儀器設備的日常保養、定期校準。五、儀器特點1.快速和高度精確的定量的 DNA，RNA 和蛋白質樣品少于 5 秒。2.高水平的準確性

3、只有 1 20 L 的樣品，甚至用很稀的樣品3.使用染料選擇性的雙鏈 Dna、 RNA 或蛋白質樣品中的污染物的影響降至最低。4.大型、 先進的彩色觸摸屏為簡單工作流導航的。5.以圖形方式顯示達 20 的數據點6. 可以個性化儀器用戶界面將顯示只有常用的化驗六、使用要求1.不要在陽光直射下操作儀器2.樣品處理過程中需帶無粉橡膠手套3. 在室溫使用的儀器(22-28ºC)4.測量之前已經進行校準七、操作指南儀器外觀觸摸屏USB 驅動器端口電源插口USB電纜接口樣品室7.1儀器開啟和關閉1. 該儀器在平坦的地方,水平,干燥的表面2. 將提供的電源線的一端插入Qubit® 3.0

4、熒光計3. 電源線另一端附加適當的插頭適配器的，插在合適的電源上4. 儀器自動開啟,首先顯示閃屏,然后主屏幕5. 要關閉Qubit® 3.0熒光計，直接拔下電源7.2儀器開機后，主屏幕自動顯示，可以在屏幕上選擇以下功能：1.選擇一個定量測定：dsDNA, RNA, oligo (ssDNA), 蛋白質,或離子球2.選擇熒光計模式3.訪問以前保存的數據4.系統設置 7.3屏幕設置（Instrument settings）1.睡眠模式2.亮度設置3.日期時間設置4.恢復設置5.語言設置7.3.1設置睡眠模式：a.系統默認為10分鐘進入睡眠模式，如要調整該項，在屏幕上點擊“Sleep mo

5、de”b.點擊文本框中得數字，然后更改，儀器設置范圍為160分鐘c.設置好后點擊保存返回設置界面7.3.2設置亮度a.屏幕上點擊“Brightness”b. 移動滑塊按鈕向上或向下調整顯示器的亮度c. 設置好后點擊保存返回設置界面7.3.3設置時間日期a.屏幕上點擊“Date/Time”b.選著日期時間格式然后進入下一步c.點擊相應的文本框進行設置d.設置完成后點擊保存返回設置界面7.3.4恢復設置：恢復出廠設置，刪除所有保存的數據,用戶定義的儀器設置和定制的化驗，該選項請慎重選擇7.3.5語言設置a.屏幕上點擊“Language”b. 選擇相應的選項c.點擊保存返回設置界面7.4校準儀器工作

6、原理是先使用標準濃度的試劑生成熒光值和濃度二維坐標軸，檢測時測出溶液的熒光值，然后根據熒光值來換算濃度，所以進行測驗時需要選擇新校準或使用以前保存的校準（如該功能第一次使用或更換檢測試劑盒就需重新校準）點選需要檢測的項目，進入下一級目錄點選試驗，如第一次選擇會直接提示進行校準，如以前進行過校準，則會提示使用以前的或新進行校準，這里選擇進行校準出現下面界面，將試劑盒中用于校準的標準品1#放入樣品室，點擊“Read standard”，大約3秒，讀取完成進入到下一步，放入標準品2#，點擊“Read standard”（蛋白質校準還需放入標準品3#）。 校準完成后可以不將標準品2#取出直接檢測濃度，

7、查看校準是否成功。如果校準成功,軟件顯示讀取標準的屏幕,顯示熒光與濃度圖。在熒光與濃度圖:標準數據點被一條線連接。（圓圈表示正確的標準）如果校驗不成功,軟件顯示“校準誤差”消息，需重新進行校準7.5樣品檢測將樣品與反應液混合（混合方案具體見試劑盒）孵化一段時間（DNA和RNA為2分鐘，蛋白質需要15分鐘）在閱讀標準屏幕,點擊運行樣本7.5.3在樣本體積屏幕,選擇樣本體積和單位a. 觸摸+和-按鈕在方向盤上選擇樣本體積添加到試驗管(1 - 20µL)。b. 從下拉菜單中,選擇的單位輸出樣本的濃度 將樣品管插入到樣品室,關上蓋子,然后點擊讀取管。大約需要3秒 7.5.5在屏幕上就會顯示所

8、需檢測的濃度多個樣品檢測：a.相同體積和濃度單位：只需更換樣品室中樣品管，點擊讀取管b.不同體積和濃度單位：重復上訴步驟更改體積和濃度單位檢測濃度存在一定范圍，如超出檢測范圍會顯示“超出范圍”7.5.7可以點擊屏幕上左右箭頭進入體積濃度設置界面和熒光與濃度圖1.空心圓表示進行校準的標準品2.大的灰色圓圈代表最新樣品3.藍色圓圈代表在檢測范圍內4.黃色圓圈代表在拓展范圍內5.紅色圓圈代表在儀器檢測范圍外7.6熒光模式可以選擇熒光模式來作為mini熒光計使用（光源通道藍色 (470 nm) 或紅色 (635 nm) ）主界面點擊“Fluorometer”，進入下一級，選擇相應的選項放入樣品，點擊讀取管選擇藍光時，顯示的結果有藍光和紅光檢測數值，選擇紅光時，只顯示紅光的檢測數值7.7數據管理Qubit® 3.0機子本身可以存儲1000樣本數據，對保存的數據，可以進行以下操作：a.針對每個樣本查看詳細的數據b.重命名數據文件c.可以保存數據，導出到USB存儲器或電腦中d.刪除數據文件從濃度檢測界面、熒光與濃度圖界面、主屏幕點擊“Data” 出現數據屏幕,點擊想查看的數據集點擊想要查看的數據，就會出現以下詳細的數據列表如需更改數據顯示名稱，在詳細數據界面點擊數據