1、GMS 一六胺銀-GROCOTT'S改良法目的：鑒別真菌。原理：真菌細胞壁的粘多糖成分被氧化形成醛基。醛基與硝酸銀反應(yīng)，再將銀還原成可見的金屬形式。對照：含有真菌的組織。由曲霉病和肺結(jié)核病的組織塊是首選的。固定：10%甲醛技術(shù)：4-5m石蠟切片。設(shè)備：酸清洗玻璃器皿，染色缸，微波爐。試齊I：2%銘酸：三氧化銘 Chromium trioxide 10.0 gm蒸儲水 Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6個月。警告：腐蝕性酸，可能致癌，避免接觸和吸入。1% 偏重亞硫酸鈉 Sodium Metabisulfite:偏重亞硫酸鈉 Sodium metabisul

2、fite 5.0 gm蒸儲水 Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6個月。5%硼砂：四硼酸鈉 Sodium borate 5.0 gm蒸儲水 Distilled water 100.0 ml混合溶解，保存期6個月。六胺銀備用液：3%六亞甲基四胺Methenamine（四氮六甲圜 hexamethylenetetramine）100.0 ml5% 硝酸銀 Silver nitrate 5.0 ml混合，盛于酸清洗過的棕色瓶中，冷藏，保存期3個月。警告：腐蝕性，可能致癌。工作液：六胺銀備用液 Stock Silver Methen. 25.0 ml蒸儲水 Distill

3、ed water 25.0 ml5% 硼砂 Borax 2.5 ml使用前新鮮配制，用后丟棄。0.5%氯化金：氯化金 Gold chloride 0.5 gm蒸儲水 Distilled water 100.0 ml混合溶解，盛于酸清洗過的瓶中，冷藏，保存期 1年。警告：避免接觸和吸入。0.2%亮綠：亮綠 Light green SF yellow. 0.2 gm蒸儲水 Distilled water 100.0 ml冰醋酸 Glacial acetic acid 0.2 ml混合溶解。保存期6個月。警告：避免接觸和吸入。安全：穿戴手套、護目鏡和白大衣。保持所有打開蓋的熱溶液于通風(fēng)櫥中。避免接

4、觸和吸入染料和化學(xué)品。銘酸：對皮膚和粘膜有腐蝕性，高度毒性，影響靶器官為腎。致癌物質(zhì)。偏重亞硫酸鈉：侵入途徑為攝入，能引起胃腸道不適，對皮膚、眼睛和粘膜有刺激性。硝酸銀：劇烈的皮膚和眼睛刺激，氧化劑。攝入將導(dǎo)致嚴重的胃腸道不適。可能致 癌：可疑的月中瘤發(fā)生因素。硫代硫酸鈉：攝入毒性。能引起胃刺激，接觸對皮膚、眼睛和呼吸系統(tǒng)有刺激性。亮綠SF Yellowish :可能致癌。程序：1 .脫蠟至無水酒精。2 . *2% 銘酸微波高火 45 seconds ,放置 5 minutes。3 .流水沖洗蒸儲水稍洗。4 . 1% 偏重亞硫酸鈉溫室1 minute。5 .流水沖洗，蒸儲水稍洗3 change

5、s 06 . *六胺銀工作液微波高火70seconds ,在熱溶液中搖動玻片，直至組織應(yīng)呈褐紙袋 色。7 .蒸儲水稍洗2 changes。8 . 0.5% 氯化金1 minute 或直至灰色。9 .蒸儲水稍洗。10 . 5% Hypo, 3 minutes.11 .流水沖洗，蒸儲水稍洗。12 .亮綠液 1 minute.13 .蒸儲水稍洗。14 .脫水、透明和封固。*傳統(tǒng)方法：5% 銘酸60 C水浴1 hour o銀液：60° C水浴1 hour或直至棕色。結(jié)果：真菌：黑色背景：綠色注思：1 .如果銘酸變褐色是需要更換，傳統(tǒng)方法 5%銘酸勝于2%,高濃度的銘酸容易在微 波處理時引起組

6、織掉片。2 .如果微生物不變黑色，檢查：a.銘酸是否新鮮。b.偏重亞硫酸鈉是否新鮮。c.硼砂是否新鮮fo3 .如果銀液出現(xiàn)混蝕或在染色缸上出現(xiàn)銀鏡時，重新配制溶液。參考文獻：Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed, 1980, pp243-246, Battelle Press, OhioLuna L, Manual of Histologic Staining Methods of the AFIP, 3rd Ed,1968, pp230-231, McGraw-Hill,NYCrookham

7、,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the HistopathologyLaboratory, 2nd ED, 1991, Anatech程序卡GMS - METHENAMINE SILVER, GROCOTT'S, MODIFIED對照：含有真菌的組織。由曲霉病和肺結(jié)核病的組織塊是首選的。技術(shù)：4-5m石蠟切片。程序：1 .脫蠟至無水酒精。2 . *2% 銘酸微波高火 45 seconds ,放置 5 minutes。3 .流水沖洗蒸儲水稍洗。4 . 1% 偏重亞硫酸鈉溫室1 minute。5 .流水沖洗，蒸儲水稍洗3 changes 06 .

8、*六胺銀工作液微波高火70seconds ,在熱溶液中搖動玻片，直至組織應(yīng)呈褐紙袋 色。7 .蒸儲水稍洗2 changes。8 . 0.5% 氯化金1 minute 或直至灰色。9 .蒸儲水稍洗。10 . 5% Hypo, 3 minutes.11 .流水沖洗，蒸儲水稍洗。12 .亮綠液 1 minute.13 .蒸儲水稍洗。14 .脫水、透明和封固。*傳統(tǒng)方法：5% 銘酸60 C水浴1 hour 0銀液：60° C水浴1 hour或直至棕色。結(jié)果：真菌：黑色背景：綠色安全：所有打開蓋的熱溶液于通風(fēng)櫥中。避免接觸和吸入染料和化學(xué)品。2%銘酸：三氧化銘 Chromium trioxid

9、e 10.0 gm蒸儲水 Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6個月。警告：腐蝕性酸，可能致癌，避免接觸和吸入。1%偏重亞硫酸鈉：偏重亞硫酸鈉 Sodium metabisulfite 5.0 gm蒸儲水 Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6個月。5%硼砂：四硼酸鈉 Sodium borate 5.0 gm蒸儲水 Distilled water 100.0 ml混合溶解，保存期6個月。六胺銀備用液：3%六亞甲基四胺Methenamine（四氮六甲圜 hexamethylenetetramine）100.0 ml5% 硝酸銀 Silver

10、 nitrate 5.0 ml混合，盛于酸清洗過的棕色瓶中，冷藏，保存期 3個月警告：腐蝕性，可能致癌。工作液：六胺銀備用液 Stock Silver Methen. 25.0 ml蒸儲水 Distilled water 25.0 ml5% 硼砂 Borax 2.5 ml使用前新鮮配制，用后丟棄。0.5%氯化金：氯化金 Gold chloride 0.5 gm蒸儲水 Distilled water 100.0 ml混合溶解，盛于酸清洗過的瓶中，冷藏，保存期 1年。警告：避免接觸和吸入。0.2%亮綠：亮綠 Light green SF yellow. 0.2 gm蒸儲水 Distilled wa

11、ter 100.0 ml冰醋酸 Glacial acetic acid 0.2 ml混合溶解。保存期6個月。5%硝酸銀備用液：硝酸銀 Silver nitrate 25.0 gm蒸儲水 Distilled water 500.0 ml用酸清洗過的瓶。冷藏，保存期6個月。警告：腐蝕性，可能致癌。日期：技師：使用限期：3%六亞甲基四胺六亞甲基四胺Methenamine 30.0 gm蒸儲水 Distilled water 1000.0 ml用酸清洗過的瓶。冷藏，保存期6個月。警告：避免接觸和吸入。日期：技師：使用限期：1%偏重亞硫酸鈉：偏重亞硫酸鈉 Sodium metabisulfite 5.0

12、 gm蒸儲水 Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6個月。警告：避免接觸和吸入。日期：技師：使用限期：1%偏重亞硫酸鈉日期：技師：六胺銀備用液：3%六亞甲基四胺（四氮六甲圜 hexamethylenetetramine）100.0 ml5% 硝酸銀 Silver nitrate 5.0 ml混合，盛于酸清洗過的棕色瓶中，冷藏，保存期 3個月警告：腐蝕性，可能致癌。日期：技師：使用限期：5%硼砂：四硼酸鈉 Sodium borate 5.0 gm蒸儲水 Distilled water 100.0 ml混合溶解，保存期6個月。日期：技師：使用限期：2%銘酸：三氧化銘 Chromium trioxide 10.0 gm蒸儲水 Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6個月。警告：腐蝕性酸，可能致癌，避免接觸和吸入。日期：技師：使用限期：2%銘酸日期：技師：0.5%氯化金：氯化金 Gold chloride 0.5 gm蒸儲水 Distilled water 100.0 ml混合溶解，盛于酸清