1、類人膠原蛋白論文：重組E.coli發酵產HLC過程中溫度誘導模式、糖濃度和補料操作方式的優化【中文摘要】本文主要從溫度誘導模式、補料時機、糖濃度以及補料操作方式等方面對重組Escherichia coli BL 21發酵生產類人膠原蛋白(Human-Like Collagen,簡稱HLC)的過程進行優化。在實驗室前期優化出培養階段的最佳溫度為34的基礎上,本部分主要對誘導階段的最佳溫度進行了優化。在培養過程中,當OD(600nm)達到85時,首先對是否升溫至37維持1h進行了考察,實驗結果表明,不將溫度升高至37維持1h時,1h后含抗性質粒菌體的百分比下降為82%,最終的細胞濃度和蛋白濃度分別

2、為69.7gL和6.3gL。而升溫至37時,1h后含抗性質粒菌體的百分比上升為89%,最終的細胞和蛋白濃度分別為65.2gL和7.1gL,蛋白濃度增加了11.9%。所以需要升溫37。然后對具體的溫度誘導模式進行了考察,設置了三種模式：先42維持3h,之后一直39：從42開始,每隔1h程序性降溫1；一直維持42。結果表明,第一種模式下最終的細胞和蛋白濃度分別為65.5gL和7.3gL：第二種模式下分別為68.1gL和6.4gL；第三種模式下分別為62.2gL和9.7gL,第三種.【英文摘要】In this study, the optimization was performed in the

3、fermentation which Escherichia coli BL 21 products Human-Like Collagen:the temperature induction model, the feeding point, glucose concentration and the feeding operation.On the basis of the optimum culture temperature 34which was already optimized, this part was mainly about the induction temperatu

4、re. Whether the transition temperature was necessary or not was studied when the OD (600nm) reached 85, it was showed that the percentage of resistant pla.【關鍵詞】類人膠原蛋白 溫度誘導模式 過渡溫度 糖濃度 補料操作方式【英文關鍵詞】Human-Like Collagen the temperature induction model the transition temperature the glucose concentration

5、 the feeding operation【目錄】重組E.coli發酵產HLC過程中溫度誘導模式、糖濃度和補料操作方式的優化摘要3-5Abstract5-6第一章 緒論10-251.1 膠原蛋白10-171.1.1 膠原蛋白概述10-111.1.2 膠原蛋白的分類11-131.1.3 膠原蛋白的特性13-151.1.4 膠原蛋白的實際應用15-161.1.5 膠原蛋白的發展前景16-171.2 類人膠原蛋白17-201.2.1 類人膠原蛋白概述171.2.2 類人膠原蛋白表達系統17-181.2.3 類人膠原蛋白的優勢18-201.3 高密度發酵20-231.3.1 高密度發酵概述201.3

6、.2 基因工程菌的高密度發酵20-211.3.3 重組大腸桿菌的高密度發酵21-221.3.4 發展與展望22-231.4 溫度誘導模式對重組大腸桿菌的生長和產物形成的影響231.5 糖濃度對重組大腸桿菌高密度發酵的影響231.6 本研究的目的、思路及內容23-251.6.1 研究目的231.6.2 思路與內容23-25第二章 實驗材料及方法25-342.1 實驗材料25-282.1.1 菌種252.1.2 培養基25-262.1.3 主要化學試劑26-272.1.4 主要儀器與設備27-282.2 實驗方法28-342.2.1 菌種培養方法28-292.2.2 分析檢測方法29-34第三章

7、發酵過程中誘導溫度的優化34-433.1 實驗背景34-353.2 實驗內容353.2.1 誘導前過渡溫度的優化353.2.2 誘導階段溫度誘導模式的優化353.3 實驗結果與分析35-423.3.1 誘導前過渡溫度的優化35-393.3.2 誘導階段溫度誘導模式的優化39-423.4 實驗結論42-43第四章 發酵過程中補糖時機的選取及糖濃度的控制43-554.1 實驗背景43-444.2 實驗內容44-454.2.1 補糖時機的選擇44-454.2.2 補料后糖濃度的控制454.3 實驗結果與分析45-544.3.1 補糖時機的選擇45-504.3.2 補料后糖濃度的控制50-544.4 實驗結論54-55第五章 發酵過程中補料操作方式的選擇55-635.1 實驗背景55-565