1、 第41卷第1期2002年2月復旦學報(自然科學版Journal of Fudan University (Natural Science Vol. 41No. 1Feb. 2002文章編號:042727104(2002 0120089203萱草(Hemerocallis hybrida 再生植株過程中根的誘導王曉娟1, 金1, 沈延松2, 蔣如敏1, 陳家寬1(1. 復旦大學生命科學學院生物多樣性與生態工程教育部重點實驗室, 上海200433;2. 上海四季花木生態、科技發展有限公司, 上海200051摘要:利用1/2MS 培養基作為基本培養基, 附加不同濃度的NAA 作為外源激素, 分別對

2、萱草愈傷組織塊和無根再生苗進行根的發生誘導試驗, 結果愈傷組織上均不易生根; 而無根再生苗根的誘導效果較好, 特別是在含有0. 075mg/L NAA 的培養基上, 生根數量和生根率均最佳. 為工廠化生產提供了相關的技術資料. 關鍵詞:萱草; 愈傷組織; 組織培養; 根中圖分類號:Q 813. 1文獻標識碼:A萱草(Hemerocallis hybri da 是一種重要的花境植物, . . 45株, . , 是一項目前被廣泛應用. , 僅見有少量簡短的報道13, 而未見到有關觀賞型萱. 本研究擬從萱草快繁生產商品化優良種苗的目的出發, 在已成功地獲得了愈傷組織的基礎上, 研究在大規模組織培養情

3、況下, 萱草無根再生苗根的發生誘導, 獲取相關的技術參數, 為大規模組織培養提供技術參數.1材料與方法供試材料:本研究選用從荷蘭引進的優良萱草品種(Hemerocallis hy 2bri da Stella D Oro 通過組織培養成功獲得的愈傷組織塊和無根再生苗作為材料.培養基的設置:根據前人的經驗15,1/2MS 基本培養基是誘導生根的優良培養基, 附加適量的生長素將促進生根的速度和增加根的數量6,7. 因而本試驗選用1/2MS 培養基作為基本培養基, 分別附加0, 0. 025,0. 05,0. 075,0. 1mg/L 的NAA 共5個濃度梯度進行較細致對比研圖1萱草愈傷組織塊、無根

4、再生苗和生根苗究. 采用125mL 的三角瓶分裝, 每瓶50mL 培養基, 每瓶內分別接種4棵Fig. 1Callus , re 2grown shoot無根再生苗和愈傷組織塊(圖1 . without root and shoot with re 2培養條件:接種后置于組織培養室內22恒溫培養, 每天光照10h , grown root of 光照強度為25. 125. 3mol m -2. s -1Hemerocallis hybrida收稿日期:2001205217基金項目:上海市科技興農重點攻關項目(20005212, 女, 博士后; 通訊聯系人陳家寬教授. 作者簡介:王曉娟(1972

5、 90復旦學報(自然科學版 第41卷2結果與討論2. 1萱草愈傷組織生根試驗中根發生的情況本研究結果發現, 愈傷組織塊在5種生根培養基中均不生根; 無根再生苗上如形成愈傷組織, 也不易生根; 只有不發生愈傷組織的無根再生苗較易生根, 表明本試驗萱草組織培養過程中再生植株的生根情況可能受再生苗中積累的內含激素有關. 根的發生主要集中在再生苗的根基部, 大部分根發自切口處, 新生根一般白色或淺黃色, 根長23cm (圖1 , 沿三角瓶作平行生長. 2. 2萱草無根再生苗誘導生根試驗中生長素濃度的調控無根再生苗在經過18d 的培養后, 生根率達到80. 9%96. 3%.作為外源生長素添加的較低濃度

6、的NAA , 對萱草無根再生苗的生根效果具有顯著的促進作用, 但在不同的濃度下效果有所差異. 由表1結果可知, 以1/2MS +0. 075mg/L NAA 培養基上誘導生根率效果最好:從接種后的第8天以后, 生根率以大約每2天20%的速度遞增, 到第16天時達到平臺區, 到第18天可達到96. 3%的生根率, 因而易于批量化生產. 建議在工業化生產中收獲培養到1618d 的再生苗進入下一步的移栽.表1不同NAA 質量濃度下生根誘導率的試驗結果Tab. 1Results of the root inductivity in different concentration of NAA%t /d

7、00250. 72. 22. 211. 011. 025. 746. 361. 880. 99. 411. 522. 348. 971. 286. 387. 810. 013. 340. 057. 876. 784. 495. 64. 46. 67. 427. 259. 675. 792. 696. 31. 46. 89. 634. 264. 482. 283. 695. 90750. 16810121416182. 3萱草無根再生苗誘導生根試驗中根的數量變化由表2可知, 不同的培養基上萱草無根再生苗的發根率不同, 而且每一無根再生苗上的生根數量也存在著顯著差異. 從實驗結果看, 在第18天的

8、發根植株中, 以1/2MS +0. 075mg/L NAA 誘導生根的效果最好, 生根數5株-1的植株達到58. 0%, 說明萱草無根再生苗根的誘導以1/2MS +0. 075mg/L NAA 為最佳的配方. 一般而言, 生根數量越高的植株其苗的素質好, 移栽成活率也高. 至于萱草再生植株中以每株幾條根為好, 我們將在移栽實驗中作進一步的研究. 2. 4萱草商品化快繁過程中相關參數的確定陳宗禮等8的研究認為, 采用組織培養技術進行商品化快繁, 其商品苗總產量與再生小苗誘導生根之間存在重要聯系:(1 再生植株誘導生根的周期; (2 再生植株誘導生根率; (3 有效生根苗在總生根苗中所占比率; (

9、4 一年內再生植株誘導生根苗的代數. 由我們的實驗結果可確定萱草采用體外培養技術進行商品化生產中部分技術參數范圍如下:(1 萱草再生植株誘導生根的周期為1618d ; (2 萱草再生植株的誘導生根率達90%以上; (3 生根數以平均3株-1等條件為有效生根苗, 則萱草的有效生根苗占總生根苗的80%左右. (4 一年內無根再生苗誘導生根的代數大約為2022代/年(1618d/代 , 這是萱草在本培養條件下的最低繁殖代數. 以上參數表明, 在本條件下萱草的生根試驗完全符合工廠化生產的要求. 第1期王曉娟等:萱草(Hemerocallis hybrida 再生植株過程中根的誘導表2不同NAA 質量濃

10、度下生根株數和生根數量的變化Tab. 2Number of the induced shoots and roots in different concentration of NAA培養基每株生根數2121/2MS344638132108431218106114231812641311213322723024103181831181511167212211156110562118178524149610781111342024111021171471817183410118724162526187826212120322315216132058691110251822302315202119

11、1925381322207191511766712639731369013913691不同天數的生根株數總誘導株數/%N 1820. 027. 320. 913. 618. 217. 215. 615. 620. 531. 115. 125. 623. 38. 127. 957. 611. 58. 458. 08. 610. 017. 18. 655. 7511/2MS +0. 025mg/L NAA234511/2MS +0. 05mg/L NAA234511/2MS +0. 075511/2MS +0. 1mg/L NAA2345表示第18天各種生根數不同的株數占第18天生根的總株數的比例

12、. N 18參考文獻:1黃濟明. 幾種花卉的組織培養J.植物生理學通訊, 1983, (3 :44248.2倪新, 馬毓. 多倍體萱草的組織培養及其繁殖J.園藝學報, 1984, 11(3 :2022205. 3楊乃博. 雜種大花萱草的試管繁殖J.植物生理學通訊, 1985, (5 :39.4黃純真. 應用組織培養方法獲得四種花木試管植物的初步試驗J.植物生理學通訊, 1980, (6 :37240. 5盧天玲, 黃壽先. 黃花菜組織培養簡報J.植物生理學通訊, 1981, (6 :49250.6陳小蘭, 胡瓊華, 王紅霞. 金百合的離體快速繁殖J.植物生理學通訊,2000, 36(4 :33

13、4.7王紅霞, 胡瓊華, 陳小蘭. 通江百合的離體快速繁殖J.植物生理學通訊, 2000, 36(2 :132.8陳宗禮, 劉建玲, 延志蓮, 等. 植物快繁中有效快繁速度與商品苗總產量的計算與控制J.西北植物學報, 1999, 19(3 :4222427.(下轉第96頁 96復旦學報(自然科學版 第41卷G enetic Mode of N asal ShapesCHE N Li , LI Hui , XI A Y uan 2min , J I N Li , LU Da 2ru(Modern Center f or A nthropologic , School of L if e Scie

14、nces , Fudan U niversity , S hanghai , China , 200433Abstract :Among all human characteristics , facial features were found to be one of the most genetic 2related features. Nasal shapes are classified in pedigrees and random populations. It is found that 4characters (nasal root height , hard nasal b

15、ridge shape , soft nasal bridge shape , nasal tip trend are all monogene controlled. Partial correlation analysis and principle component analysis show that there is correlation among these 4characters.K eyw ords:nasal shapes ; genetic mode ; gene frequencies ; pedigree analysis ; Jinhui , Shanghai

16、; partial correlation analysis ; principle component analysis(上接第91頁hybridaWANG X iao 2juan 1, J I N Liang 1, SHE N Y an 2song 2, J I ANG Ru 2min 1, CHE N Jia 2kuan 1(1. Minist ry of Education Key L aboratory f or Biodiversity Science and Ecological Engineering , School of L if e Sciences , Fudan U

17、niversity , S hanghai 200433, China ; 2. S hanghai Four Seasons Horticultural&Environmental Technology Co. , L td. S hanghai 200051, China Abstract :1/2MS culture media containing different concentration of NAA were used to regenerate roots from Hemerocallis hybrida calli and re 2grown shoots without roots. The results showed that no roots were regenerated fromcalli while a large number of roots were induced from re 2grown shoots