1、細(xì)胞因子、抗體檢測技術(shù)細(xì)胞因子、抗體檢測技術(shù)劉劉 新新 建建衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點實驗室衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點實驗室背景知識背景知識n研究細(xì)胞因子對闡明機(jī)體免疫應(yīng)答及其調(diào)節(jié)機(jī)制、免疫相關(guān)疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律和指導(dǎo)臨床治療均具有重要意義。n抗體具有高特異性、高親和力等特點，目前已廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、微生物學(xué)、腫瘤學(xué)、遺傳學(xué)以及分子生物學(xué)等各個領(lǐng)域。 該試劑盒是基于np30抗獨特型抗體可替代蟲源性 抗原的特性研制而成的。在國內(nèi)、外均屬率先應(yīng)用生 物技術(shù)制備抗原代替?zhèn)鹘y(tǒng)蟲源抗原。已證實np30檢測 的血吸蟲抗體屬短程抗體，治療后陰轉(zhuǎn)較快，具有療 效考核價值。 該試劑盒的診斷效能多項指標(biāo)均已達(dá)到或超過經(jīng) 典抗體

2、檢測法，較以前病原學(xué)檢查和免疫學(xué)檢測方法 更為簡便快速。僅用一滴血，20分鐘即可判讀結(jié)果， 不需其他儀器設(shè)備，便于在基層、現(xiàn)場使用。本試劑 盒已在血吸蟲流行區(qū)已應(yīng)用近120萬人次。 間接間接elisaelisa法）法）1.樣本的收集；2.包被抗原；3.封閉；4.加稀釋的待檢樣品；5.加酶標(biāo)抗抗體； 6.加底物顯色；7.終止反應(yīng)。（三）封閉（三）封閉 封閉封閉(blocking)(blocking)是繼包被之后用高濃是繼包被之后用高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。封閉度的無關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙，就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙，從而排斥從而排斥

3、elisaelisa后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。附。 常用封閉劑：常用封閉劑：0.05%-0.5%0.05%-0.5%的的bsa; 10%bsa; 10%的小牛血清或的小牛血清或1%1%明膠明膠; ;脫脂奶粉脫脂奶粉, ,比較價廉，比較價廉，可以高濃度使用（可以高濃度使用（5%5%）。）。 即酶標(biāo)記的抗體（或抗原）是即酶標(biāo)記的抗體（或抗原）是elisaelisa中關(guān)鍵的試劑中關(guān)鍵的試劑（七）結(jié)果判定（七）結(jié)果判定間接間接elisaelisa法法1.樣本的收集；2.包被抗原；3.封閉；4.加稀釋的待檢樣品；5.加酶標(biāo)抗抗體； 6.加底物顯色；7.終止反應(yīng)。n內(nèi)容：實驗?zāi)康摹嶒炘怼嶒灢牧稀嶒灢襟E、實驗結(jié)果、討論與分析n要求：只接受紙質(zhì)、手寫體紙質(zhì)、手寫體報告。樣本收集包被抗原封 閉加入待檢樣品，1