1、實驗四 家兔動脈血壓的神經(jīng)、體液調(diào)節(jié)【目的要求】1、學(xué)習(xí)直接測定和記錄家兔動脈血壓的急性實驗方法2、觀察神經(jīng)，體液因素對心血管活動的影響【基本原理】在生理情況下，人和其它哺乳動物的血壓處于相對穩(wěn)定狀態(tài)，這種相對穩(wěn)定是通過神經(jīng)和體液因素的調(diào)節(jié)而實現(xiàn)的，其中以頸動脈竇主動脈弓壓力感受性反射尤為重要。此反射既可在血壓升高時降壓，又可在血壓降低時升壓，反射的傳入神經(jīng)為主動脈神經(jīng)與竇神經(jīng)。家兔的主動脈神經(jīng)為獨立的一條神經(jīng)，也稱減壓神經(jīng)，易于分離和觀察其作用。在人、犬等動物，主動脈神經(jīng)與迷走神經(jīng)混為一條，不能分離。反射的傳出神經(jīng)為心交感神經(jīng)、心迷走神經(jīng)和交感縮血管纖維，心交感神經(jīng)興奮，其末梢釋放去甲腎上腺

2、素，去甲腎上腺素與心肌細胞膜上的b受體結(jié)合，引起心臟正性的變時變力變傳導(dǎo)作用，心迷走神經(jīng)興奮，其末梢釋放乙酰膽堿，乙酰膽堿與心肌細胞膜上的M受體結(jié)合，引起心臟負性的變時變力變傳導(dǎo)作用，交感縮血管纖維興奮時釋放去甲腎上腺素，后者與血管平滑肌細胞的a-受體結(jié)合引起阻力血管的收縮。 本實驗應(yīng)用液壓傳遞系統(tǒng)直接測定動脈血壓。即由動脈插管、測壓管道及壓力換能器相互連通，其內(nèi)充滿抗凝液體，構(gòu)成液壓傳遞系統(tǒng)。將動脈套管插入動脈內(nèi)，動脈內(nèi)的壓力及其變化，可通過密閉的液壓傳遞系統(tǒng)傳遞壓力，通過壓力換能器將壓力變化轉(zhuǎn)換為電信號，用微機生物信號采集處理系統(tǒng)記錄動脈血壓變化曲線。 【預(yù)習(xí)要求】 1儀器設(shè)備知識：RM6

3、240微機生物信號采集處理系統(tǒng)的使用方法。 2實驗理論 實驗動物知識參見第三章第一節(jié) 生理科學(xué)實驗常用實驗動物的種類；第四章第一節(jié) 動物實驗的基本操作、第四節(jié) 實驗動物手術(shù)；統(tǒng)計學(xué)知識參見第5章第四節(jié) 常用統(tǒng)計指標和方法；生理學(xué)教材有關(guān)動脈血壓的調(diào)節(jié)。檢索全文數(shù)據(jù)庫中的相關(guān)研究論文，檢索方法參見第五章第五節(jié)。 3預(yù)繪制實驗原始數(shù)據(jù)記錄表格和統(tǒng)計表格。 【材料】 家兔，動脈插管，血壓換能器，生物信號采集處理系統(tǒng)，200g/L氨基甲酸乙酯，1000U/ml的肝素，0.1g/L去甲腎上腺素，10-2g/L乙酰膽堿。 【動物與器械】 家兔、麻醉箱，兔手術(shù)臺，常用手術(shù)器械，止血鉗（4把）、眼科鑷、支架、

4、雙凹夾、壓力傳感器，保護電極，氣管插管，動脈插管、動脈夾、三通管、注射器（1ml、5ml、20ml），乳膠管，20%25%氨基甲酸乙酯、肝素（200U/ml），腎上腺素（1：5000），乙酰膽堿（1：10000），紗布、棉球、生理鹽水，生物機能實驗系統(tǒng)【方法與步驟】 1實驗系統(tǒng)連接及參數(shù)設(shè)置 （1）頸動脈血壓測量記錄裝置。將血壓換能器固定于鐵支柱上，其位置應(yīng)與心臟在同一平面。 （2）壓力換能器輸出線接微機生物信號處理系統(tǒng)第4通道（亦可選擇其它通道）。（3）微機生物信號處理系統(tǒng)參數(shù)設(shè)置： RM6240系統(tǒng)：點擊“實驗”菜單，選擇“循環(huán)”或“自定義實驗項目”菜單中的“兔動脈血壓調(diào)節(jié)”。系統(tǒng)進入該實

5、驗信號記錄狀態(tài)。儀器參數(shù)：4通道時間常數(shù)為直流，濾波頻率100Hz，靈敏度12Kpa，采樣頻率800Hz，掃描速度 500ms/div。連續(xù)單刺激方式，刺激強度510V，刺激波寬2ms，刺激頻率30 Hz。 2、實驗儀器的準備 打開計算機采集系統(tǒng)，接通壓力傳感器。從顯示器的“實驗項目”中找出“家兔血壓的調(diào)節(jié)”實驗。 3、連通液導(dǎo)系統(tǒng)并制壓 4、動物準備（1）麻醉：家兔稱重，由耳緣緩慢注射20氨基甲酸乙脂5mlkg。（2）固定：將家兔背位固定在手術(shù)臺上，用剪毛剪將頸部和劍突部的被毛剪去即可手術(shù)。（3）手術(shù)：沿頸部正中線作一長57厘米的皮膚切口，用止血鉗分離皮下結(jié)締組織，再向下分離氣管和血管神經(jīng)束

6、頸部神經(jīng)與頸總動脈位于氣管外側(cè)，用止血鉗先將血管神經(jīng)束腹面的肌肉和結(jié)締組織分離，再用左手拇指和食指輕輕捏住分離的肌肉和皮膚，稍向外翻，即可將血管神經(jīng)束翻于食指之上，然后用彎頭止血鉗分離頸動脈約厘米，穿線備用（注意：再分離頸總動脈及穿線時，切勿損傷與其伴行的神經(jīng)；在頸總動脈近甲狀腺處有甲狀腺前動脈，分離時應(yīng)稍靠其下，以免損傷）用同樣方法分離另一側(cè)頸總動脈，穿線備用輕輕提起右側(cè)頸總動脈下的備用線，即可清楚看到3條粗細不同的神經(jīng)，迷走神經(jīng)最粗，白色，一般位于外側(cè)，易識別；交感神經(jīng)較細，略顯灰色，一般位于內(nèi)側(cè)；減壓神經(jīng)最細，常與交感神經(jīng)貼在一起識別準確后，用玻璃分針縱向小分離順序由細到粗，神經(jīng)分離2厘

7、米，即可穿線備用。（4）氣管插管法：用止血鉗由頸部正中線將肌肉結(jié)締組織分離，暴露出氣管在氣管下方用鑷子穿一線，打一活結(jié)，在喉頭下23厘米處的氣管上作一“”形切口，將氣管插管向心方向插入氣管中并用線結(jié)扎，并將多余的線系在氣管插管的分叉處固定，以免滑脫。（5）動脈插管法：在分離出來后右側(cè)頸動脈的遠心端（盡量靠近頭端）用棉線將動脈結(jié)扎，在頸總動脈近心端用動脈夾將動脈夾住與兩者之間另穿一線，打一活結(jié)備用在遠心端結(jié)扎線下方用剪膜剪在動脈上作一斜形切口，向心臟方向插入動脈插管，用備用線將插管尖端固定于動脈管內(nèi)，并將余線結(jié)扎于插管的側(cè)枝上以防滑脫注意插管與血管方向一致，防止扭轉(zhuǎn)或插管尖端刺破動脈管壁。5、實

8、驗觀察與記錄：實驗裝置準備妥當(dāng)，手術(shù)完畢后，慢慢放開動脈夾，即可看到少量血自頸總動脈沖向動脈插管，隨后可按照以下實驗項目進行觀察與描記。（1）記錄正常血壓曲線。調(diào)節(jié)掃描速度與增益，可以明顯地觀察的心室射血與主動脈回縮形成的壓力變化與收縮壓、舒張壓的讀數(shù)。有時可以觀察到血壓曲線隨呼吸變化，心搏為一級波，呼吸波為二級波。然后將掃描速度調(diào)慢。（2）輕輕提起對側(cè)完好頸總動脈的備用線，阻斷動脈內(nèi)血流，觀察并記錄血壓的變化。（3）用手指壓迫頸內(nèi)動脈和頸外動脈的分叉處，觀察血壓的變化。（4）刺激減壓神經(jīng)用中等強度的電刺激通過保護電極刺激減壓神經(jīng)，記錄血壓變化，然后進行雙結(jié)扎剪斷，再分別刺激中樞端和外周端。記

9、錄血壓變化。 （5）用同樣強度刺激迷走神經(jīng)，雙結(jié)扎剪斷一側(cè)迷走神經(jīng)分別刺中樞端和外周端，記血壓變化再結(jié)扎并剪斷另一側(cè)迷左神經(jīng)，并觀察對比剪斷迷走神經(jīng)，前后呼吸頻率與深度的變化（6）耳緣注射腎上腺素0.20.3ml，記錄BP變化（7）耳緣注射乙酰膽堿0.20.3ml，記錄BP變化6、整理實驗記錄，并將實驗結(jié)果打印。【注意事項】1、每項實驗后，需將血壓基本恢復(fù)后，再進行下一項實驗2、隨時注意插管位置，特別在掙扎時，避免扭轉(zhuǎn)而阻塞血流或刺破血管3、隨時注意動物麻醉情況，若掙扎厲害時可補少量麻醉劑兔動脈血壓的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)一、實驗準備：     實驗器械

10、和藥品：、血壓換能器、塑料動脈插管、試管夾、雙凹夾、鐵支柱、動脈夾、三通管、保護電極、兔手術(shù)臺、哺乳動物手術(shù)器械、照明燈、注射器（1毫升、2毫升、10毫升）、有色絲線、紗布、棉花、20%氨基甲酸乙酯、0.5%肝素(或5%檸檬酸鈉)0.01%腎上腺素、0.01%去甲腎上腺素。注意：動脈插管稍長。MedLab系統(tǒng)二、理論復(fù)習(xí)：     血壓的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)。三、參數(shù)設(shè)置：（一）RM6240系統(tǒng)：點擊“實驗”菜單，選擇“循環(huán)”或“自定義實驗項目”菜單中的“兔動脈血壓調(diào)節(jié)”。系統(tǒng)進入該實驗信號記錄狀態(tài)。儀器參數(shù)：4通道時間常數(shù)為直流，濾波頻率100Hz，

11、靈敏度12Kpa，采樣頻率800Hz，掃描速度 500ms/div。連續(xù)單刺激方式，刺激強度510V，刺激波寬2ms，刺激頻率30 Hz。（二）實驗內(nèi)容1.正常血壓曲線。2.夾閉右側(cè)頸總動脈。3.刺激減壓神經(jīng)：（1）刺激完整減壓神經(jīng) （2）刺激減壓神經(jīng)中樞端  （3）刺激減壓神經(jīng)外周端。4.刺激迷走神經(jīng)外周端。（三）注意事項：1.分離減壓神經(jīng)注意：減壓神經(jīng)要從向心端開始往頭端分離，避免損傷神經(jīng)，分離時不使神經(jīng)上帶有結(jié)締組織膜，分離后滴加生理鹽水以防干燥，穿2根線備用。2.連接儀器：注意避免動脈插管滑出。3.夾閉頸總動脈時勿牽拉動脈（夾閉，血壓增高；牽拉，血壓下降）。4.刺激

12、減壓神經(jīng)，如神經(jīng)損傷，向頭端移動（與減壓神經(jīng)放電移動方向相反）。5.刺激右側(cè)迷走神經(jīng)末梢端，血壓.心率變化更為明顯。三、實驗報告要求：（10分）1.實驗結(jié)果：    各種影響因素引起動脈血壓變化曲線圖。（不要求觀察定量變化）2.實驗討論：（各1分）1）夾閉頸總動脈，血壓升高：夾閉頸總動脈頸動脈竇血壓下降頸動脈竇壓力感受器受到刺激減弱竇神經(jīng)傳入沖動   心迷走中樞（抑制）迷走神經(jīng)傳出沖動減少心跳加快.加強心輸出量增多         &#

13、160;                                                 &#

14、160;             減少心交感中樞（興奮）                        小靜脈收縮回心血量增多 血壓升高交感神經(jīng)傳出沖動增多                    交感縮血管中樞（興奮）                    小動脈收縮外周阻力增大 2）刺激完整減壓神經(jīng)及其中樞端均可引起血壓下降，而刺激該神經(jīng)外周端基本不變：兔減壓神