1、體外放射分析自測題一、名詞解釋1、體外放射分析2、RIA標(biāo)準(zhǔn)品3、標(biāo)準(zhǔn)曲線4、交叉反應(yīng)5、非特異性結(jié)合率6、標(biāo)記抗原比活度7、放射化學(xué)純度8、零標(biāo)準(zhǔn)管結(jié)合率9、免疫放射分析二、專業(yè)名詞中英文互譯1、體外放射分析2、放射免疫分析3、標(biāo)準(zhǔn)曲線4、交叉反應(yīng)5、比活度6、競爭性蛋白結(jié)合分析7、化學(xué)發(fā)光免疫分析8、labeled antigen9、radiochemical purity10、radiorecaptor assay11、separation technique12、quality control13、immunoradiometric assay,IRMA三、填空題1、體外放射分析中最常

2、用的放射性核素是（），半衰期（）使用（）儀器對(duì)（）射線進(jìn)行放射性測量，用14C或3H做標(biāo)記時(shí)，則用（）儀器對(duì)（）射線進(jìn)行放射性測量。2、RIA必備條件（）（）（）（）（）3、RIA中要求標(biāo)記抗原應(yīng)具備條件是（）（）（）4、RIA 中標(biāo)記抗原一般要求放射化學(xué)純度應(yīng)大于（）5、RIA 中特異性抗體要求是（）（）()6、放免試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)中，精密度可用（）（）（）來表示，準(zhǔn)確度用（）表示7、標(biāo)準(zhǔn)品定量一定精確，應(yīng)與被測物屬（），其（）及（）相同8、IRMA和IRA法主要不同是：IRMA核素標(biāo)記（），反應(yīng)系統(tǒng)是（）9、RRA測定原理與RIA 基本相同，不同點(diǎn)是RRA（）10、CPBA是一種以（）代替抗

3、體或受體作為結(jié)合劑，對(duì)激素等生物活性物質(zhì)進(jìn)行定量分析的技術(shù)。11、非放射性免疫分析除了具有放射性免疫分析的（）和（）外，還克服了（）以及（）的缺點(diǎn)。四、選擇題（一）A 型題1、有關(guān)RIA反應(yīng)中所需抗血清濃度哪項(xiàng)說法正確A、抗血清濃度越高越好B、抗體滴度越高越好C、抗體的稀釋度增高會(huì)使測量范圍增寬D、抗體濃度增高將提高測量靈敏度E、以稀釋度曲線中B%為30-50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的抗血清稀釋度為宜2、下列體外放射分析中，哪種方法相對(duì)靈敏度更高、特異性更強(qiáng)A、競爭性結(jié)合蛋白分析B、放射免疫分析C、放射受體分析D、免疫放射分析E、酶放射分析3、RIA中如果標(biāo)記抗原的比活度降低課引起A、抗原-抗體復(fù)合物放射性

4、測量計(jì)數(shù)增高B、測量靈敏度提高C、測量靈敏度降低D、所有抗原蛋白量減少E、標(biāo)記物化學(xué)量減少4、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)QC內(nèi)容不包括A、測定零標(biāo)準(zhǔn)管結(jié)合率B、測定非特異性結(jié)合率C、測定標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸參數(shù)D、作批間質(zhì)控E、各實(shí)驗(yàn)室之間按照同意評(píng)價(jià)方案和方法比較分析5、有關(guān)ORMA，下列說法錯(cuò)誤的是A、適用于短肽和半抗原測定B、反應(yīng)速度快C、靈敏度高D、特異性強(qiáng)E、穩(wěn)定性好6、用TRFIA法測定血清性激素水平時(shí)候所使用的測量儀器是A、g井型計(jì)數(shù)器B、時(shí)間分辨熒光測定儀C、液體閃爍計(jì)數(shù)器D、分光光度儀E、紫外線吸收儀7、對(duì)出診懷疑甲亢者，為進(jìn)一步診斷，應(yīng)先考慮用哪種檢查A、甲狀腺攝131I測定B、99mTc甲狀腺顯像

5、C、抗甲狀腺藥物實(shí)驗(yàn)性研究D、血清相關(guān)激素測定E、甲狀腺激素抑制試驗(yàn)8、下列分析方法不屬于體外放射分析范疇的是A、RIAB、IRMAC、CLIAD、CPBAE、RRA9、在IRMA 中，雙位點(diǎn)法通常稱為A、夾心法B、競爭法C、飽和法D、非競爭法E、非飽和法10、在體外放射分析中，受體與配體、抗原與抗體、底物與酶之間產(chǎn)生特異性結(jié)合，產(chǎn)生結(jié)合的共同基礎(chǔ)是A、免疫反應(yīng)B、化學(xué)反應(yīng)C、分子識(shí)別D、化學(xué)偶聯(lián)E、化學(xué)吸附11、在IRMA 中引入生物素和親和素技術(shù)的作用主要是A、提高分析系統(tǒng)的特異性B、形成放大效應(yīng)C、用放射性核素標(biāo)記親和素穩(wěn)定性好。靈敏度高D、因?yàn)橛H和素的每個(gè)分子都可以結(jié)合一個(gè)抗體分子，形

6、成放大級(jí)E、生物素和親和素的親和力較抗原抗體結(jié)合反應(yīng)低12、IRMA（單克隆抗體固相夾心法）基本原理是A、適用于多肽和蛋白質(zhì)大分子物質(zhì)的物質(zhì)B、要求抗原少于兩個(gè)抗原決定簇C、要求抗原少于10個(gè)抗原決定簇D、僅適用小分子物質(zhì)測定E、用于測定抗體濃度13、在體外放射分析的生物樣品制備中基本要求是A、反復(fù)凍融和溶血B、去除放射性毒物C、保持樣品待測成分的原有活性和濃度不變D、了解樣品的物理化學(xué)性質(zhì)E、提取被測的物質(zhì)14、在體外放射分析的分離方法中，分離劑不包括哪項(xiàng)A、免疫分離試劑B、固相分離試劑C、化學(xué)分離試劑D、物理分離試劑E、競爭分離試劑15、哪種指標(biāo)不是腫瘤標(biāo)志物A、CEAB、CA50 CA1

7、9-9C、AFPD、PSAE、TSH16、在體外放射分析質(zhì)量控制中，精密度圖主要用于評(píng)價(jià)A、方法的靈敏度B、特異性C、特異性結(jié)合率D、試劑盒穩(wěn)定性E、衡量一批測定中不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品的測定精密度指標(biāo)17、RIA質(zhì)量控制，反應(yīng)誤差關(guān)系應(yīng)為A、小于0.004B、小于0.04C、小于0.4%D、小于4E、小于4018、衡量測定系統(tǒng)準(zhǔn)確度的質(zhì)控指標(biāo)，通常要求回收率介于多少之間A、80-100%B、90-11%C、90-120%D、80-120%E、95-105%19、在質(zhì)控中，低、中、高質(zhì)控樣品，其中兩個(gè)偏離靶值超過2s并在同一方向A、該批測定結(jié)果可用B、質(zhì)控樣品位置不正確C、視具體情況而定D、該批需要重

8、新測定E、如果下次分析仍是這樣，則應(yīng)重新測定20、關(guān)于RIA，當(dāng)降低抗體的濃度時(shí)，對(duì)靈敏度影響是A、靈敏度提高，但檢測范圍變窄B、靈敏度減低，檢測范圍增大C、不影響分析系統(tǒng)靈敏度D、靈敏度提高，但檢測范圍變寬E、靈敏度減低，檢測范圍變窄21、進(jìn)行RIA測定不需要夏磊哪種條件A、標(biāo)記抗體B、特異性抗體C、標(biāo)準(zhǔn)品D、分離劑E、測量儀器22、當(dāng)患者血清降鈣素明顯升高時(shí)，有助于早期診斷哪種疾病A、甲狀腺激素不應(yīng)綜合癥B、甲狀腺隨樣癌C、甲狀腺癌D、甲狀旁腺癌E、惡性嗜絡(luò)細(xì)胞瘤（二）B型題（1-2題共用備選答案）A、化學(xué)發(fā)光免疫分析B、競爭性蛋白結(jié)合分析C、酶的放射分析D、IRMAE、酶標(biāo)記免疫1、放射

9、性核素標(biāo)記抗體，反應(yīng)體系中加入過量抗體，與待測物進(jìn)行全量非競爭性反應(yīng)，形成標(biāo)記抗體-抗原復(fù)合物。為結(jié)合的通過固相發(fā)去除，測上清液中放射性計(jì)數(shù)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得待測=樣品濃度2、以放射性核素標(biāo)記激素與待測激素競爭的與相應(yīng)結(jié)合蛋白來測定激素含量的分析方法。（3-7題共用備選答案）A、125I、14C、3HB、魯米那、異魯米那、吖啶酯C、鈾、鈊、釤D、過氧化物酶、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶E、熒光素3、IRMA示蹤劑標(biāo)記物4、RRA示蹤劑標(biāo)記物5、CLIA 示蹤劑標(biāo)記物6、EIA 示蹤劑標(biāo)記物7、TRFIA示蹤劑標(biāo)記物（8-10題共用備選答案）A準(zhǔn)確度B靈敏度C精密度D穩(wěn)定性E特異性8.同一樣品在多次

10、重復(fù)測定中所得結(jié)果的一致程度 為9.測定值與已知真實(shí)值在數(shù)量上的符合程度 為10測定方法從生物樣品中能夠檢測出某種物質(zhì)的最小濃度為（11-14題共用備選答案）A非放射分析B放射性測量C測定樣品中的微量物質(zhì)D特異性結(jié)合反應(yīng)E標(biāo)記的配體11.體外放射分析的方法學(xué)基礎(chǔ)是12.體外放射分析的示蹤劑是13.體外放射分析的定量手段是14.體外放射分析的目的是（三）X型題1.用于RIA分析的特異性抗體要求A必須使用分子量>5000的大分子蛋白作抗原免疫動(dòng)物所產(chǎn)生的抗體B交叉反應(yīng)越小越好C抗體的滴度越低越好D親和力越大越好E含有特異性抗體的血清皆可用于RIA測定2.放射免疫分析中，每次分析要同時(shí)測定高、

11、中、低質(zhì)控血清，并對(duì)照質(zhì)控圖。下列哪些情況出現(xiàn)時(shí)，其結(jié)果應(yīng)舍棄A三種質(zhì)控血清中有一個(gè)測定值>3sB三種質(zhì)控血清中在同一方向上有兩種>2sC三種質(zhì)控血清中在同一方向上有兩種>1sD三種質(zhì)控血清均在同一方向上>1sE三種質(zhì)控血清均在同一方向上>2s3.非放射性標(biāo)記免疫分析包括ACLIABIRMACTRFIADRRAEELA4.有關(guān)放射性受體分析，下列哪些不正確A測定原理和過程與RIA基本相同B反應(yīng)體系為競爭性結(jié)合反應(yīng)C不產(chǎn)生非特異性結(jié)合D測定結(jié)果穩(wěn)定E測定結(jié)果代表受體的生物活性而不是免疫活性5.非放射性標(biāo)記免疫分析與放射性標(biāo)記免疫分析相比A都是利用了抗原抗體的競爭性結(jié)

12、合反應(yīng)或非競爭性全量反應(yīng)B同樣具備高靈敏度和高特異性C克服了放射性核素可能造成的環(huán)境污染及核素衰變所致的保存期短的缺點(diǎn)D操作程序更為簡捷、快速E為目前最經(jīng)濟(jì)、檢測種類最多的體外微量生物活性物質(zhì)分析方法6.放射免疫分析中，對(duì)標(biāo)記配體的要求描述錯(cuò)誤的是A射線能量以200keV以上為佳B標(biāo)記物的用量要小，應(yīng)等于或略低于待測物的最小量C核素半衰期小于30天為好D足夠的比活度E放化純度高7.免疫放射分析（IRMA）與放射免疫分析（RIA）的比較，哪些是正確的ARIA的靈敏度更高BIRMA的標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍更大CIRMA的分離更簡便DIRMA適合測定小分子物質(zhì)ERIA不適合測定小分子物質(zhì)8在體外放射分析中，應(yīng)

13、用PEG等物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)分離或沉淀分離優(yōu)點(diǎn)是A分離速度快B分離效果好C通用性強(qiáng)D因素影響少E分離劑成本低9在放射免疫分析中，影響生物樣品質(zhì)量的常見因素是A嚴(yán)重溶血B脂肪血C低溫保存D反復(fù)凍融E高溫保存五、問答題1、簡述RIA分析原理2.何謂分離技術(shù)？常用的分離技術(shù)主要有哪些3.IRMA法的主要優(yōu)點(diǎn)是什么？4.非放射性標(biāo)記免疫分析的優(yōu)勢(shì)何在？六、思考與病例分析1.女，31歲，怕熱多汗，乏力，多食易饑3個(gè)月就診核醫(yī)學(xué)科。查體：心律齊，心率120次/min，雙手顫抖，甲狀腺º腫大。根據(jù)你掌握的知識(shí)，請(qǐng)回答以下幾個(gè)問題（1）最可能的診斷是什么？（2）確診的首選無創(chuàng)檢查是什么？（3）RIA方法是

14、哪年由誰創(chuàng)建的？它的必備條件是什么？有哪些優(yōu)點(diǎn)？（4）RIA的質(zhì)量控制主要內(nèi)容有哪些？2、一女性患者，32歲，近3周出現(xiàn)心悸，出汗、低熱和乏力的癥狀，體重稍下降，三周前曾患者有感冒 。臨床查體，突眼（-），甲狀腺º腫大，有結(jié)節(jié)感，但無明顯觸痛，心率102次/min，手顫（+）。血清學(xué)檢查TT3 234ng/dl(參考值 84-169ng/dl,) TT415.7g/dl(參考值 5.7-11.3g/dl,) TSH0.3U/ml(參考值0.3-4.5U/ml)。根據(jù)上述資料，回答以下幾個(gè)問題。（1）應(yīng)首先考慮哪種疾病（2）進(jìn)一步需要做的檢查有哪些（3）結(jié)合你掌握的核醫(yī)學(xué)知識(shí)，簡述檢查

15、可能出現(xiàn)的結(jié)果。參考答案一、名詞解釋1、體外放射分析是以放射性核素標(biāo)記的配體為示蹤劑 ，以結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)，在體外完成的對(duì)人體內(nèi)各種微量生物活性物質(zhì)檢測的一類技術(shù) 的總稱。2.RIA標(biāo)準(zhǔn)品是一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)抗原，它是待測樣品定量的基礎(chǔ)，通過標(biāo)準(zhǔn)品可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.標(biāo)準(zhǔn)曲線是通過標(biāo)準(zhǔn)品制作出的一條表示標(biāo)記抗原-抗體復(fù)合物的量（因變量）與待測抗原的量（自變量）之間存在 的競爭性數(shù)量關(guān)系的曲線。它是RIA定量分析 的基礎(chǔ)。4.交叉反應(yīng)是指抗體與抗原結(jié)構(gòu)類似物的結(jié)合反應(yīng)。交叉反應(yīng)越小，特異性越高5.非特異性結(jié)合率是指不加抗體時(shí)標(biāo)記抗原與非特異性物質(zhì)的結(jié)合率，一般要求小于5%6.標(biāo)記抗原比活度是指每

16、微克抗原上標(biāo)記的放射性核素的千貝克數(shù)（kBq/g）.7.放射化學(xué)純度是指具有免疫活性的標(biāo)記抗原的放射性占總放射性的百分率。一般要求>95%。8.零標(biāo)準(zhǔn)管結(jié)合率是指不加末標(biāo)記抗原時(shí)標(biāo)記抗原與抗體的結(jié)合率，即最高結(jié)合率。它主要用來反映標(biāo)記抗原與特異性抗體的質(zhì)量。一般要求為30-50%。9.免疫放射分析 是用放射性核素標(biāo)記抗體，在反應(yīng)體系 中加入過量的標(biāo)記抗體與待測物進(jìn)行非競爭性全量反應(yīng)的一種體外放射分析法。二、專業(yè)名詞中英文互譯1.in vitro radioassay2.radioimmunoassay(RIA)3.standard curve4.cross reaction5.speci

17、ficactivitypetitive protein binding assay(CPBA)7.chemical luminescent immunoassay(CLIA)8.標(biāo)記抗原9.放射化學(xué)純度10.放射受體分析11.分離技術(shù)12.質(zhì)量控制13.免疫放射分析三、填空題1.125I 60.2天 井型計(jì)數(shù)器 液體閃爍計(jì)數(shù)器 2.特異性抗體 標(biāo)記抗原，標(biāo)準(zhǔn)品 分離技術(shù) 放射性測量儀3.比活度高，放射化學(xué)純度好 良好的免疫活性4.95%5.親和力大，特異性強(qiáng)（交叉反應(yīng)小） 濃度適當(dāng)6.變異系數(shù) 反應(yīng)誤差關(guān)系 精密度圖 回收率7.同種物質(zhì)，化學(xué)結(jié)構(gòu)，免疫活性8.抗體 非競爭性全量反應(yīng)9.以受體代

18、替抗體使用10.血清中的激素結(jié)合蛋白11、高靈敏度 高特異性 放射性核素可能造成的環(huán)境污染 核素衰變所致保存期短四選擇題（一）A型題1.E 2.D 3.C 4.E 5.A 6.B 7.D 8.C 9.A 10.C 11.B 12.A 13.C 14.E15.E 16.E 17.B 18.B 19.D 20.A 21.A 22.B（二）B型題1.D 2.B 3.A 4.A 5.B 6.D 7.C 8.C 9.A 10.B 11.D 12.E 13.B 14.C(三)X型題1.BD 2.ABDE 3.ACE 4.CD 5.ABCD 6.AC 7.BC 8.ACE 9.ABDE五問答題1.RIA分析

19、的原理是應(yīng)用放射性核素標(biāo)記的抗原和非標(biāo)記的被測抗原(或標(biāo)準(zhǔn)品)與限量的特異性抗體進(jìn)行競爭性結(jié)合反應(yīng)。由于反應(yīng)體系中標(biāo)記抗原和抗體的量為恒定量，且標(biāo)記抗原和待測抗原的總量大于抗體上的有效結(jié)合位點(diǎn)，所以標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物的形成隨著被測抗原量的增加而減少，而剩下的未結(jié)合的標(biāo)記抗原則隨著被測抗原量的增加而增加，待反應(yīng)達(dá)到平衡后，將抗原抗體復(fù)合物與游離的標(biāo)記抗原分離，用放射性測量儀測定標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物的量或游離標(biāo)記抗原的量，即可推測出待測抗原的量。2.在放射免疫分析中，標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物呈可溶性狀態(tài)與游離的標(biāo)記抗原同存于反應(yīng)液中，將二者分離后才能分別測定其放射性。分離技術(shù)就是采取一定的手段，使標(biāo)記抗原

20、抗體復(fù)合物與游離標(biāo)記抗原分離的方法。分離技術(shù)有多種，常用的有雙抗體法，沉淀法，雙抗體+沉淀法，吸附分離法及固相分離法等。3.IRMA法的主要優(yōu)點(diǎn)是：示蹤劑為放射性核素標(biāo)記的抗體，過量的標(biāo)記抗體與待測抗原結(jié)合形成標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物，反應(yīng)系統(tǒng)為非競爭性全量反應(yīng)，故反應(yīng)速度快，靈敏度高；固相抗體和標(biāo)記抗體是分別針對(duì)不同的抗原決定簇的單抗，所以特異性強(qiáng)；不易受溫度變化的影響，且待測抗原先于固相抗體結(jié)合，洗滌后再加標(biāo)記抗體，這樣可除去大部分雜質(zhì)的干擾，故穩(wěn)定性好；標(biāo)準(zhǔn)曲線的工作范圍寬，一般待測物含量低時(shí)不必濃縮，高時(shí)不必稀釋，同時(shí)也避免了由于濃縮提純和稀釋帶來的誤差。4.非放射性標(biāo)記免疫分析是指化學(xué)發(fā)光

21、免疫分析，時(shí)間分辨熒光免疫分析及酶標(biāo)免疫分析等這類非放射性免疫分析技術(shù)。其原理與放射性標(biāo)記免疫分析基本相同，只是所用示蹤劑不同，因而測定其各自標(biāo)記物的方法就不同。它們除具備放射性免疫分析的高靈敏度，高特異性外，還克服了放射性核素可能造成的環(huán)境污染以及核素衰變所致的保存期短的特點(diǎn)，且自動(dòng)化程度高，操作簡捷，快速，因此具有廣泛的發(fā)展前景。六思考與病例分析1.（1）甲亢。（2）血清甲狀腺素水平測定。（3）RIA方法于1959年由Yalow和Berson創(chuàng)建。其必備條件是特異性抗體，標(biāo)記抗原，標(biāo)準(zhǔn)品，分離技術(shù)和放射性測量儀。RIA具有靈敏度高，特異性強(qiáng)及測量精確的特點(diǎn)，已成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)診斷和研究的重要手

22、段。（4）RIA是一種高靈敏度，高特異性的體外微量分析方法，極易受各種因素影響而使檢測結(jié)果有誤差，因此嚴(yán)格的指控就顯得非常重要。RIA的質(zhì)量控制（QC）內(nèi)容包括實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部QC,評(píng)價(jià)題外放射免疫分析試劑盒質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)室外QC。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部QC保證從收集樣品開始到發(fā)出報(bào)告為止的全過程中能及時(shí)發(fā)現(xiàn)檢測過程中出現(xiàn)的各種誤差，分析產(chǎn)生原因，找出糾正辦法，以確保監(jiān)測質(zhì)量。它包括零標(biāo)準(zhǔn)觀結(jié)合率（B0%），級(jí)最高結(jié)合率，一般要求在30%-50%;非特異性結(jié)合率（NSB%），一般要求,<5%；最低濃度管結(jié)合率和最高濃度管結(jié)合率之差應(yīng)>30%；標(biāo)準(zhǔn)曲線直線回歸的參數(shù)：截距a,斜率b值穩(wěn)定，相關(guān)系數(shù)r>0.99；ED25,ED50,ED75。質(zhì)控圖。評(píng)價(jià)體外放射免疫分析試劑盒質(zhì)量包括精密度，又稱重復(fù)性，可用變異系數(shù)（CV）,反映誤差關(guān)系（